Coulter LH750血细胞分析仪有核红细胞报警分析

章梅英

Coulter LH750血细胞分析仪有核红细胞报警分析

章梅英

血细胞分析仪；有核红细胞；血涂片镜检

有核红细胞（nucleated red blood cell，NRBC）是骨髓红系造血系统释放到外周血中的幼稚红细胞（外周血以中、晚幼红为主）。除新生儿、胎儿外，正常人外周血中不会出现NRBC，常见于溶血性贫血、急、慢性白血病、红白血病、髓外造血及严重缺氧等患者的病理性外周血涂片中[1]。Coulter LH750全自动血液分析仪通过体积激光三维技术（VCS）从体积、内部结构及颗粒状况区分细胞类型并结合电阻抗法，实现对NRBC的自动化计数。我们通过分析Coulter LH750全自动血液分析仪NRBC报警与血涂片染色人工镜检计数结果进行比较，对NRBC自动化检测的可靠性进行了评价。

1 材料与方法

1.1 标本来源 收集绍兴上虞区人民医院2015年7月—2015年9月，通过Coulter LH750全自动血液分析仪“CBC+DIFF”模式自动化检测有NRBC报警的293例住院患者的血常规标本,男性176例，女性117例，年龄1.0天～92.0岁；其中成人组228例，年龄18～55岁，平均（31.97±11.54）岁;婴儿组65例，年龄1～12个月，平均（4.28±3.67）个月.

1.2 仪器与试剂 美国 Beckman Coulter公司LH750型全自动血液分析仪及其配套试剂；日本OLYMPUS公司光学显微镜；EDTA-K2抗凝真空管。瑞氏染液及缓冲液按照《全国临床检验操作规程》[2]配制。

1.3 方 法

1.3.1 血细胞分析仪法 真空管采血1.8mL，于2h内按照Coulter LH750的操作规程上机检测，记录NRBC报警的样本信息、血红蛋白（HGB）参数及提示。

1.3.2 血涂片镜检计数法 取仪器法NRBC报警的标本按照《全国临床检验操作规程》制备血涂片，行瑞氏染色15min后进行显微镜镜检，计数100～200个白细胞时检到的NRBC数，以XXNRBC/100WBC格式报告，此标本的白细胞计数结果通过校正公式予以校正后报告。

1.4 结果判断 以仪器自动化检测NRBC报警为仪器检测阳性，血涂片镜检检到NRBC为镜检阳性。

1.5 统计学方法 应用SPSS16.0统计软件，阳性符合率的比较采用χ2检验，以P＜0.05为差异有统计学意义。

2 结果

2.1 仪器提示NRBC阳性报警与镜检阳性结果符合率比较 根据NRBC自动化检测计数值不同，将293例仪器报警结果分为低值（0＜NRBC≤2）、中值（2＜NRBC≤4）和高值（NRBC＞4）三组。高值组仪器检测和血涂片镜检的阳性符合率与其余两组比较差异有统计学意义（χ2=18.58，P＜0.01），中、低值组间差异无统计学意义（χ2=0.091，P＞0.05），见表1。

表1 仪器提示NRBC阳性报警与镜检阳性结果符合率比较（例）

2.2 年龄因素对NRBC仪器检测和血涂片镜检阳性符合率的影响 成人组仪器检测NRBC阳性228例，血涂片镜检阳性119例，阳性符合率52.2%；婴儿组仪器检测NRBC阳性65例，血涂片镜检阳性41例，阳性符合率63.1%，两组阳性符合率差异无统计学意义（χ2=2.42，P＞0.05）。

2.3 血红蛋白（HGB）对NRBC仪器检测与血涂片镜检阳性符合率的影响 根据HGB值将293例标本分为HGB≥90g/L和HGB＜90g/L两组，HGB≥90g/L组仪器检测NRBC阳性137例，血涂片镜检阳性56例，阳性符合率40.9%；HGB＜90g/L组仪器检测NRBC阳性156例，血涂片镜检阳性104例，阳性符合率66.7%；二者仪器检测和血涂片镜检的阳性符合率差异有统计学意义（χ2=13.48，P＜0.01）。

3 讨论

除部分新生儿外周血中可有少量有核红细胞出现外，NRBC一般仅在病理状态下在外周血中被检出，如强烈促红细胞生成素刺激，造血功能严重不全,组织缺氧状态等[3]，故NRBC的检测有着重要的临床意义。目前多数全自动血液分析仪均能对外周血NRBC进行准确计数。Coulter LH750血细胞分析仪通过溶解红细胞，同时使白细胞的固有特点如表面胞质及细胞大小等仍保持与在人体内相同的状态，运用VCS（体积、电导和光散射）技术从细胞体积、内部结构、核浆比及颗粒状况区分细胞类型，结合智能微数技术对NRBC进行自动识别及计数，并能够根据结果自动纠正所测得的白细胞数。白细胞校正公式为：校正后的的白细胞/L=校正前白细胞数乘以100除以100+Y（Y为白细胞计数时100个白细胞中有核红细胞的数量）[4]。

本文实验结果表明，当仪器NRBC计数为高值或HGB＜90g/L时，仪器检测结果与血涂片镜检阳性的符合率较高。故对于上述标本，进行有核红细胞的手工复检以确认NRBC的存在显得尤为重要。我们在实验过程中遇到1例仪器检测时因干扰而出现NRBC假阳性的病例，此时NRBC的假阳性严重影响其白细胞计数的准确性，如不对其进行镜检确认并校正白细胞数，将直接影响到临床的诊断与治疗。本文实验结果还显示，成人样本与婴儿样本的仪器检测与血涂片镜检的阳性符合率相近，提示Coulter LH750对不同年龄段患者血常规样本NRBC的检测无明显差异。而在仪器NRBC计数处于中、低值和HGB＞90g/L时，仪器结果与镜检的阳性符合率明显下降，考虑主要原因是由于手工法镜检细胞数目（100～200个白细胞）偏少而仪器法细胞计数量更多，而血涂片上有核细胞分布不均匀、血涂片染色情况的好坏以及操作者对NRBC的辨认的主客观因素同样会造成镜检出现阴性结果[5]。

综上所述，Coulter LH750对NRBC的报警提示有较好的可靠性。可以在一定程度上代替标本的显微镜检查以减轻劳动强度提高工作效率。但是值得关注的是，目前的检验工作中存在依赖仪器检测结果而忽视显微镜镜检的情况，从本研究结果中可以看出，对于部分NRBC计数值偏高（NRBC＞4）或红细胞参数异常（HGB＜90g/L）的血标本仍必须对其进行血涂片镜检确认。在日常检测中，必须严格执行血细胞计数的复检规则[6]，同时须对每份血标本的三维散点图及仪器的提示信息予以足够的重视及研究，才能保证每个结果的真实可信。

［1］李智夏，铁安.孕妇外周血胎儿有核红细胞的分离与检测［J］.中华医学遗传学杂志，1998，18（2）：111-114.

［2］叶应妩，王毓三，申子瑜.全国临床检验操作规程［M］.第3 版.南京：东南大学出版社，2006：128.

［3］邓家栋.临床血液学［M］.上海：上海科技出版社，2001：1171.

［4］Byeon Y，Ki CS，Han KH.Isolation ofnucleated red blood cells in maternal blood for Non-invasive prenatal diagnosis［J］.Biomed Microdevices，2015，17（6）：118.

［5］Cremer M，Roll S，Graf C，et al.Nucleated red blood cells as marker for an increased risk of unfavorable outcome and mortality in very low birth weight infants［J］.Early Hum Dev，2015，91（10）：559-563.

［6］中华检验医学杂志编辑委员会.全国血液学复检专家小组工作会议纪要暨血细胞自动计数复检规则释义［J］.中华检验医学杂志，2007，30（4）：380-382.

（收稿：2016-01-05 修回：2016-02-20）

淅江省绍兴市上虞区人民医院检验科（上虞 312300）