CD2AP基因多态性与晚发性阿尔茨海默病相关性研究

杨 平丁艳萍

CD2AP基因多态性与晚发性阿尔茨海默病相关性研究

杨 平1丁艳萍2

目的分析宁夏汉族人群CD2AP的rs9296559位点多态性与晚发性阿尔茨海默病（LOAD）是否存在关联。方法采用病例-对照研究，提取研究对象的外周血DNA，用ARRAY iPLEX行CD2AP基因的rs9296559位点单核苷酸多态性（SNP）的表达分布情况。结果LOAD组和对照组的C等位基因频率分布比较差异有统计学意义（P＜0．001，OR＝1．52，95%CI：1．18～1．97）。结论CD2AP基因与宁夏汉族人群 LOAD有相关性，其rs9296559 SNP位点C等位基因为危险等位基因。

阿尔茨海默病；CD2AP基因；单核苷酸多态性

阿尔茨海默病是痴呆最常见的类型，晚发型AD（LOAD）占AD总数的95%以上，其病因并不十分清楚，被认为是环境和基因因素共同作用所导致的复杂性疾病，其最主要的易感基因是载脂蛋白E（ApoE）。近年来国外学者大样本量的高加索人群中对LOAD的全基因组关联研究（GWAS）发现了多个与AD发病相关的候选基因研究，如CD2AP基因［1］。本研究通过对LOAD的患者CD2AP基因的rs9296559的多态位点进行基因检测，探讨给该位点多态性与LOAD的相关性。

1 资料与方法

1.1 一般资料

收集2012年1月～2016月10月在宁夏医科大学附属总医院神经内科门诊LOAD组患者389例，男178例，女211例，平均年龄（67.60±9.93）岁，正常对照组来自于上述就诊患者的配偶以及社区LOAD流行病学调查的正常人群共379例。男226例，女153例，平均年龄（68.50±9.06）岁。两组的一般资料比较差异无统计学意义（P＞0.05）。

1.2 纳入与排除标准

（1）纳入标准：LOAD组入选患者均符合美国国立神经病语言障碍卒中研究所和AD相关疾病协会（NINCDS-ADRDA）临床诊断标准确定为“可能AD”的标准；（2）对照组纳入及排除标准：纳入标准：日常生活能力良好、MMSE≥28分，性别和年龄与患者组完全匹配。排除标准：脑血管病、代谢性疾病，额颞叶及路易体痴呆等。

1.3 方法

所有研究对象均行叶酸、维生素B12及梅毒血清等检查，所有患者行头颅CT或MRI平扫。提取清晨取空腹静脉血2 ml，血样加EDTA抗凝剂后保存于-80 ℃冰箱中。PCR基因扩增和分析CD2AP基因表达检测和rs9296559位点基因多态性分析方法。采用ARRAY iPLEX行CD2AP基因的rs9296559位点SNP的表达分布情况。

1.4 统计学处理

使用SPSS 17.0统计软件进行分析，基因频率采用基因计数法，组间基因频率的比较采用χ2检验，当P＜0.05认为差异有统计学意义。

2 结果

LOAD组的等位基因C频率为0.166，高于对照组的0.116（P＜0.001，OR＝1.52，95%CI：1.18 ～ 1.97）。LOAD组的等位基因T频率为0.833，对照组的等位基因T频率为0.882，两组比较差异无统计学意义（P＞0.05）。

3 讨论

CD2AP基因是近年来国外学者对LOAD的GWAS发现与AD发病相关的候选基因，由于不同人口的遗传背景及遗传异质性的差异［2］。我们当前研究发现rs9296559的CD2AP与中国汉族人口有相关性。Naj等［3］通过一个三阶段设计的AD GWAS首次研究发现CD2AP与AD发病有显著相关性，随后2阶段的进一步验证中，这些结果得到了证实，其中CD2AP上游rs9349407和LOAD 存在显著的相关性（P＝8.6×10-9）。Holingworth等［4］通过meta分析的方法验证结果存在可靠性。本文研究（由于rs9349407和rs9296559完全连锁）结果显示rs9296559显著的差异，提示CD2AP是AD的易感基因，并且C等位基因增加了LOAD的患病风险。CD2AP编码的Cd2ap是一种衔接蛋白，主要功能对细胞骨架的调节作用及参与信号转导通路［5］。文献报道CD2AP细胞突触功能障碍及细胞膜的处理过程有关［6］。2012年一项CD2AP在AD患者脑中转录情况的研究推测CD2AP与神经元突触功能有关而参与AD发病［7］，在脑中CD2AP主要表达在毛细血管，然而它在中枢神经系统及AD中的作用还不清楚［8］。

总之，研究结果显示CD2AP的rs9296559的多态位点与中国汉族人口相关性，结果需要在大样本及不同的人口中验证，潜在的蛋白功能需要近一步的探索。

［1］ Lee JH，Cheng R，Barral S，et al． Genome Wide Association Study in Late-onset Alzheimer'S Disease Among Caribbean Hispanics Supports Clu，Picalm，Bin1，And Cugbp2 And Identifies Novel Loci［J］． Alzheimers & Dementia，2010，6（4）：e13．

［2］ 孟大川，余自华，王道静，等． 中国汉族儿童散发性激素耐药型肾病综合征CD2AP基因突变分析［J］． 临床儿科杂志，2012，30（7）：641-645．

［3］ Naj AC，Jun G，Beecham GW，et al． Common variants at MS4A4/MS4A6E，CD2AP，CD33 and EPHA1 are associated with late-onset Alzheimer's disease［J］． Nature Genetics，2011，43（5）：436-441．

［4］ Hollingworth P，Harold D，Sims R，et al． Common variants at ABCA7，MS4A6A/MS4A4E，EPHA1，CD33 and CD2AP are associated with Alzheimer's disease［J］． Nature Genetics，2011，43（5）：429-435．

［5］ 毛建华，杜立中．CD2AP与肾小球足细胞裂孔隔膜功能损伤的分子机制［J］． 国外医学：儿科学分册，2005，32（1）：15-17．

［6］ Morgan K． The three new pathways leading to Alzheimer's disease［J］． Neuropathology and Applied Neurobiology，2011，37（4）：353-357．

［7］ Karch CM，Jeng AT，Nowotny P，et al． Expression of Novel Alzheimer’s Disease Risk Genes in Control and Alzheimer’s Disease Brains［J］． Plos One，2012，7（11）：e50976．

［8］ Schellenberg GD，Montine TJ． The genetics and neuropathology of Alzheimer's disease［J］． Acta Neuropathologica，2012，124（3）：305-323．

Association BetweenCD2APGene Polymorphism and Late-onset Alzheimer's Disease

YANG Ping1DING Yanping21 Department of Neurology，General Hospital of Ningxia Medical University，Yinchuan Ningxia 750004，China，2 Department of Gynaecology and Obstetrics，Ningxia Children's Hospital，Yinchuan Ningxia 750004，China

ObjectiveTo analyze the association betweenCD2APand rs9296559 polymorphisms of LOAD in Ningxia Han population．MethodsFor the casecontrol studies，all subjects’peripheral blood DNA was extracted，distribution of single nucleotide polymorphisms （SNP） in the rs9296559 locus ofCD2APgene by ARRAY iPLEX．ResultsThe frequency distribution of C allele in the LOAD group and the control group was statistically significant（P＜0．001，OR＝1．52，95%CI：1．18～1．97）．ConclusionCD2APgene is associated with LOAD in Ningxia Han population，the C allele of rs9296559 locus of SNP is a risk allele．

Alzheimer's disease，CD2APgene，Single nucleotide polymorphism

R749．1

A

1674-9316（2016）36-0029-03

10．3969/j．issn．1674-9316．2016．36．015

宁夏医科大学校级重点课题（XZ2015022）

1 宁夏医科大学总医院神经内科，宁夏 银川 750004；2 宁夏儿童医院妇产科，宁夏 银川 750004