厚朴有效成分厚朴酚及和厚朴酚最佳提取温度的研究

杨云芝胡俊武（ 南充市中医医院，四川 南充 637000； 太极集团四川南充制药有限公司，四川 南充 637000）



厚朴有效成分厚朴酚及和厚朴酚最佳提取温度的研究

杨云芝1胡俊武2
（1 南充市中医医院，四川 南充 637000；2 太极集团四川南充制药有限公司，四川 南充 637000）

目的 探索厚朴饮片中有效成分厚朴酚及和厚朴酚的最佳提取温度。方法 通过不同温度的乙醇水溶液渗滤厚朴粗颗粒，测定厚朴酚及和厚朴酚含量并统计结果。结果 在45～50 ℃范围的厚朴酚及和厚朴酚含量最高。结论 45～50 ℃是厚朴酚及和厚朴酚的最佳提取温度。

厚朴酚；和厚朴酚；提取温度

厚朴主要含有木脂素类成分厚朴酚及其异构体和厚朴酚等有效成分［1］，两种成分均溶于常用的有机溶剂及苛性碱［2］。在含厚朴乙醇制剂配制时发现，气温较高的夏秋季测定厚朴酚及和厚朴酚的含量明显高于冬春季，可见环境温度对提取的影响较大。本文探索厚朴有效成分厚朴酚及和厚朴酚的乙醇提取最佳温度，为含厚朴制剂质量控制提供参考依据，现将实验结果予以报道。

1　材料与仪器

厚朴饮片，厚朴酚、和厚朴酚对照品；60%乙醇；高效液相色谱仪；化学试剂为分析纯、色谱纯。

2　方法与结果

2.1渗滤液制备：实验地秋冬季节，环境温度约12～16 ℃。取厚朴饮片粉碎为10目粗颗粒150 g，置改良后可升温的渗滤筒进行渗滤，加入60%乙醇150 mL，然后用经洗净消毒的薄膜盖严浸润24 h，再将浸润后的厚朴分别装进5个渗漉筒，装筒时松紧适宜，防止堵筒。向渗漉筒内加入60%乙醇约300 mL淹过药面。打开放滤液的螺旋夹，待药液流出适量无气泡排除为止，夹紧管口，倒回药液，加盖。按照40 ℃、45 ℃、50 ℃、55 ℃、60 ℃分别恒温加热，浸渍24 h后渗漉。按0.7～0.8 mL/min的渗漉速度进行渗漉，收集不同温度的渗滤液［3］。

2.2含量测定

2.2.1供试品制备：精密量取渗滤液5 mL，蒸干，用聚酰胺柱层析，依次用0.5%NaOH、0.8% NaOH、1.0% NaOH洗脱，收集0.8% NaOH 和1.0% NaOH洗脱液，合并，加盐酸调pH值至酸性，析出结晶［2］，弃去NaOH液，结晶加甲醇转移至10 mL容量瓶中，加甲醇至刻度，摇匀，滤过，取续滤液，即得。

2.2.2对照品制备：取厚朴酚对照品、和厚朴酚对照品适量，精密称定，加甲醇分别制成每1 mL含厚朴酚40 µg、和厚朴酚24 µg的溶液，即得［4］。

2.2.3测定波长选择：参照《中国药典》2010年版一部“厚朴”标准项下选用294 nm作为检测波长。

2.2.4色谱条件的选择：参照《中国药典》2010年版一部“厚朴”标准项下，选择十八烷基硅烷键合硅胶为填充剂；以甲醇-水（78∶22）为流动相。理论板数按厚朴酚峰计算应不低于3800。

2.3方法学验证

2.3.1专属性试验：取厚朴酚和和厚朴酚对照品，加甲醇分别制成每1 mL含厚朴酚40 μg、和厚朴酚24 μg的溶液，作为对照品溶液；取60%乙醇作为的阴性溶液；再去40 ℃渗滤液按供试品制备方法制成供试品。精密吸取以上三种溶液10 μL注入色谱仪，记录谱图，由图可见，阴性样品供试液色谱图中，在厚朴酚、和厚朴酚对照品色谱峰相应保留时间处无干扰峰；对照品溶液色谱图中，在厚朴酚、和厚朴酚对照品色谱峰相应保留时间处检出相应的色谱峰。

2.3.2加样回收试验：精密量取厚朴渗滤液（40 ℃）（测得样品含厚朴酚、和厚朴酚总量为0.58 mg/mL），分别置具塞锥形瓶中，分别精密加入5 mL、10 mL、15 mL混合对照品溶液（每1 mL含厚朴酚40 μg、和厚朴酚24 μg），平行两份，按照供试品制备方法制得供试品。精密吸取10 μL，注入色谱仪，记录图谱。以厚朴酚、和厚朴酚总量计算回收率，结果平均回收率为99.48%。RSD（%）=0.58，表明回收率符合要求。

2.3.3重复性试验：取40 ℃渗滤液按供试品制备方法制成供试品，连续测定其厚朴酚、和厚朴酚的总量5次，计算其RSD值为1.8%，结果表明该方法重复性良好。

2.4测定法：分别精密吸取上述溶液3～5 μL，注入液相色谱仪，测定，以每1 mL含其厚朴酚、和厚朴酚的总量计算并统计［4］。

2.5结果：在环境温度为12～16 ℃的情况下，通过加热60%乙醇的方法可以提高厚朴中厚朴酚和和厚朴酚的溶出含量。且在45～50 ℃含量最高。

2.6乙醇量测定：取每种渗滤液，按照2010年版《中国药典》附录规定乙醇量测定方法（2）蒸馏法测定乙醇量［4］，作为控制质量参考依据。

3　讨 论

3.1厚朴药材中除含有厚朴酚、和厚朴酚、挥发油及生物碱类有效成分外，还含有大量树脂类成分，在制剂提取过程中极易发生挥发、氧化等物理化学变化。因此，探索合适的提取工艺是确保厚朴内有效成分被充分提取的关键。

3.2因多数厚朴含醇制剂的乙醇量不会高于60%，所以本次实验选取60%乙醇作为的渗滤溶剂，实验结果只针对60%乙醇作为渗滤溶剂的情况下，其余浓度乙醇的渗滤情况有待进一步研究。

3.3因乙醇量的测定仅为有效成分提取效果的参考依据，因此本次实验内容不再具体阐述

3.4本次实验材料只选用单味厚朴药材，复方制剂含厚朴有效成分的测定有待进一步研究。

3.5本次实验结果，可以给含厚朴制剂的提取工艺做参考，有效的节约提取成本，增加药材的提取效率，提高含厚朴制剂的疗效。

［1］ 李家实.中药鉴定学［M］.上海：上海科学技术出版社,1995：297.

［2］ 杨云.天然药物化学成分提取分离手册［M］.北京：中国中医药出版社,2003：540-541.

［3］ 范碧亭.中药药剂学［M］.上海：上海科学技术出版社,1997：101-104.

［4］ 国家药典委员会.中华人民共和国药典：一部［S］.北京：中国医药科技出版社,2010：235-附录54.

R282.710.2

B

1671-8194（2016）20-0039-01