通督活血汤抗炎镇痛作用的实验研究*

吴　昊，董秋梅

(1.内蒙古医科大学2013级硕士研究生,内蒙古 呼和浩特 010110; 2.内蒙古医科大学中医内科学教研室，内蒙古 呼和浩特 010110)



·实验研究·

通督活血汤抗炎镇痛作用的实验研究*

吴昊1，董秋梅2

(1.内蒙古医科大学2013级硕士研究生,内蒙古 呼和浩特 010110; 2.内蒙古医科大学中医内科学教研室，内蒙古 呼和浩特 010110)

摘要目的：探讨通督活血汤的抗炎、镇痛作用。方法：采用二甲苯致小鼠耳廓肿胀实验,观察通督活血汤的抗炎作用；采用醋酸致痛及热致痛模型，观察通督活血汤的镇痛作用。结果：通督活血汤可减轻二甲苯致小鼠耳炎症反应的肿胀度，显著减少醋酸致痛时小鼠扭体反应数，通督活血汤高、中剂量组可明显提高热致痛小鼠的痛阈值，延长抬脚反应时间。结论：通督活血汤具有良好的抗炎、镇痛作用。

关键词通督活血汤；抗炎；镇痛；动物；小鼠

通督活血汤是在全国第四批名老中医临床经验与学术思想传承指导教师、内蒙古地区名老中医朱宗元教授治疗颈椎病的经验方[1]基础上，结合临床治疗脊柱关节疾病经验，加减拟名而成。为进一步明确通督活血汤的药理药效，拓展其应用范围，笔者对该方的抗炎、镇痛作用进行了实验研究。

1材料与方法

1.1动物

健康昆明种小鼠200只，雌雄各半，体质量(25±5)g，由内蒙古大学实验动物研究中心提供,合格证号：SCXK(蒙)2002-0001。

1.2药品、试剂与仪器

通督活血汤由葛根、桂枝、赤芍、白芍、鹿角胶、片姜黄、桃仁、红花、川芎、地龙、白芷、鸡血藤、威灵仙、水蛭、土鳖虫、甘草、补骨脂、青风藤、徐长卿组成，由内蒙古医科大学中医学院实验室制备；塞来昔布胶囊，辉瑞制药有限公司产品，批号 J20120063；颈复康颗粒，河北颈复康药业集团有限公司产品，批号 Z13022204。冰醋酸(批号20140617)、二 甲 苯 (批 号20140908)，均为分析纯，天津市致远化学试剂有限公司产品。 TE214S型电子天平，北京赛多利斯科学仪器有限公司产品；YLS-6B智能热板仪，安徽正华生物仪器设备有限公司产品；YLS-Q4型耳肿打孔器，南京便诊生物科技有限公司产品。

2方法与结果

2.1统计学方法

2.2抗炎实验

观察通督活血汤对二甲苯所致小鼠耳廓肿胀的影响[2]。将60只小鼠(雌雄各半)随机分为6组，正常对照组、塞来昔布组(0.03 g/kg)、颈复康组(2.60 g/kg)，通督活血汤高(54.6 g/kg)、中(27.3 g/kg)、低(13.7 g/kg)剂量组，每组10只。各实验组小鼠每日灌胃给药1次，正常对照组给等容积蒸馏水，0.04 mL/g，连续7 d。末次给药后30 min，每只小鼠右侧耳廓正、反面均匀涂抹0.02 mL 二甲苯。造模1 h后，将小鼠颈椎脱臼处死，沿耳廓对称剪下小鼠两耳，用直径 8 mm 打孔器在左右耳廓相同部位打孔取材，迅速用电子天平精密称量，计算小鼠耳廓肿胀度及抑制率。肿胀度(mg)=右耳片质量-左耳片质量。抑制率(%)=(正常对照组平均肿胀度-给药组平均肿胀度)/对照组平均肿胀度×100%。结果见表1。

注:与正常对照组对比,*P<0.05,**P<0.01。

由表1可知：与正常对照组对比，塞来昔布组、颈复康组和通督活血汤高、中、低剂量组小鼠耳肿胀度降低，差别有统计学意义(P<0.01或P<0.05)。颈复康组耳肿胀度>通督活血汤高剂量组>塞来昔布组,但差别无统计学意义(P> 0.05 )。通督活血汤高、中、低剂量组之间耳肿胀度两两对比，差别均有统计学意义(P<0.01)。结果显示:通督活血汤高、中、低剂量组均对二甲苯所致小鼠耳廓肿胀有抑制作用(P<0.01或P<0.05)。 表明：通督活血汤具有明确抗炎作用，但存在量效关系，其中高剂量疗效最优，与塞来昔布、颈复康的抗炎作用相当。

2.3镇痛实验

2.3.1扭体法[2]

60只小鼠的分组及给药方法同2.2。末次给药后30 min,每只小鼠给予 6 g/L醋酸溶液0.2 mL腹腔注射，观察并记录各小鼠首次扭体时间(潜伏期)及20 min内扭体次数,计算扭体反应抑制率。结果见表2。

注:与正常对照组对比,*P<0.05,**P<0.01。

由表2可知：与正常对照组对比，塞来昔布组、颈复康组和通督活血汤高、中、低剂量组小鼠扭体潜伏期延长，扭体次数减少，差别有统计学意义(P<0.01或P<0.05)。通督活血汤中剂量组扭体次数>通督活血汤高剂量组>颈复康组>塞来昔布组,但差别无统计学意义(P>0.05)。通督活血汤高、中、低剂量组之间潜伏期和扭体次数两两对比，高低组间有统计学意义(P<0.05)，高中、低中组之间对比均无统计学意义(P>0.05)。结果显示:通督活血汤高、中、低剂量均能减少醋酸所致小鼠扭体反应次数(P<0.01或P<0.05)。表明：通督活血汤对醋酸所致小鼠有镇痛作用，但存在量效关系，其中高剂量疗效最优，高、中剂量与塞来昔布、颈复康对醋酸致痛的镇痛作用相当。

2.3.2热板法

参照文献[2]方法进行。将智能热板仪加热至(55.0±0.5) ℃ ,取小鼠1只放在热板仪上，按“开始”键记录时间，自放入热板仪至出现舔后足所需的时间(s)作为该鼠的痛阈，凡舔足时间<5 s,或者>30 s,或者跳跃者弃之不用。取合格的60只小鼠进入下一步实验，分组及给药方法同2.2。重复测定正常痛阈值,取两次正常痛阈平均值作为给药前痛阈值,末次给药后分别测量并记录第15 min、30 min、60 min、90 min、120 min各小鼠舔后足所需时间。结果见表3。

注:与正常对照组对比，*P<0.05,**P<0.01。

由表3可知：给药前各组小鼠热板痛阈值差别无统计学意义。给药后各组小鼠热板痛阈值较给药前、各给药组给药后各时间点小鼠热板痛阈值较正常对照组痛阈值,均有不同程度地延长。与正常对照组对比，塞来昔布组、颈复康组和通督活血汤高、中剂量绝大多数时间点镇痛阈值均有明显提高，表现出明显镇痛作用(P<0.01或P<0.05)；通督活血汤低剂量组在60min、90min时对热刺激所致小鼠疼痛有明显抑制作用(P<0.05)，其余时间镇痛作用不明显。结果显示:通督活血汤各剂量均能不同程度地延长小鼠热板痛阈时间,延长抬脚反应时间。表明：通督活血汤对热致痛小鼠有镇痛作用，但存在量效关系，其中高剂量疗效最优。随着给药时间的延长，通督活血汤作用效果持久性也比较好。

3讨论

颈椎病属中医学“痹症”范畴[3]，过去多发于中老年人，而现在由于工作、生活方式的改变，发病率逐年升高，且发病年龄呈现年轻化趋势，已成为人类严重的公共卫生健康问题之一[4]。中医学认为年老体衰，阳气亏虚，督脉气血亏虚，失于温煦，脉络瘀阻；或者长期的不良坐姿等导致颈项部气血瘀阻不通,日久正衰,腠理空虚,风寒湿邪乘虚而入,血脉凝滞不通,内外相搏,痹阻督脉,督阳受损而发为颈椎病诸症。通督活血汤方中葛根甘寒生津、辛凉解肌，可疏通太阳经脉之气，鼓舞津液循经布达，引药直达颈项，缓解经脉拘挛；桂枝辛温祛风,又擅温经通脉；二药合用, 调和营卫、舒筋缓急治疗颈项脊背强痛效果显著。白芍苦酸微寒，入肝经，可柔肝止痛、养血敛阴，以补为功。赤芍功能凉血散瘀，以泻为用，与白芍为对，一散一补,既散瘀止痛,又补血养筋。鹿角胶温通督脉，补命门，大补精髓，最能补精生血而益元阳，补骨脂温肾助阳，二药合用以补肾固督。片姜黄苦、辛温，功能破血行气，通经止痛，与葛根相配，善行疏通脊背之肌肉筋脉。桃仁、红花活血化瘀,兼能止痛。川芎活血行气，同时与白芷引药上行。虫类药地龙、水蛭、土鳖虫长于破血逐瘀、通络止痛。鸡血藤行血补血，与威灵仙、青风藤、徐长卿共用能温经通络、驱风散邪、活血止痛。甘草酸甘化阴，缓急止痛。诸药合用，共奏补肾固督、活血通络止痛之功。

本实验所用对照药物塞来昔布是目前治疗骨关节病最常用的止痛药，与传统非甾体抗炎镇痛药相比，大大降低了患者的胃肠道不良反应[5]，但也有研究显示服用塞来昔布的患者发生心血管疾病的危险性增加，临床上有较多副作用和禁忌症。本实验显示：塞来昔布对不同小鼠抗炎、镇痛作用个体差异性较通督活血汤大；此外，在小鼠热致痛实验中，其疗效持久性未及通督活血汤。本实验所用另一对照药物颈复康是临床最常用于治疗颈椎病的中成药。本实验显示：其与通督活血汤高剂量抗炎、镇痛作用相当，而通督活血汤用药更加安全，重在通督活血，改善恢复督脉 “阳脉之海”的作用，临床无论颈椎病还是其他脊柱关节病，只要辨证为肾督虚瘀者即可应用。

本研究结果显示：通督活血汤能明显抑制二甲苯致小鼠耳肿胀炎性反应，减少醋酸所致疼痛小鼠扭体次数，延迟小鼠首次扭体时间，提高小鼠热刺激下的痛阈值，对不同刺激引起的疼痛均有良好的镇痛效果。通督活血汤高、中剂量与塞来昔布、颈复康的抗炎、镇痛作用相当。结果表明：通督活血汤有明显的抗炎、镇痛效果作用，且抗炎、镇痛作用呈现一定的量效关系。此为该方药的临床应用与推广提供了客观依据。

4参考文献

[1]杨巧芳，杨荔勇，董秋梅,等.朱宗元教授治疗颈椎病经验[J].中华中医药学刊，2010,28(10)：2057-2058.

[2]徐叔云,卞如濂,陈修,等.药理实验方法学[M].3 版.北京:人民卫生出版社,2002: 882-915.

[3]董秋梅，杨巧芳，郝华.朱宗元循经论治颈椎病临床经验探析[J].上海中医药杂志，2012，46(7)：64-65.

[4]Hori M, Tsutsumi S, Yasumoto Y, et al.Cervical Spondylosis:Evaluation of microstructural changes in spinal cord white matter and gray matter by diffusional kurtosis imaging[J]. Magn Reson Imaging,2014，32(5):428-432.

[5]周翔，区品中. 塞来昔布对膝骨性关节炎的疗效及副作用观察[J].药物流行病学杂志, 2002, 11(5):228-229.

(编辑陶珠)

文章编号:1001-6910(2016)01-0063-03

中图分类号:R285.5

文献标志码:B

doi:10.3969/j.issn.1001-6910.2016.01.27

通信作者：董秋梅，医学博士，教授，博士研究生导师，d.qium@163.com

* 基金项目：内蒙古自治区研究生科研创新资助项目(S20141013205)

收稿日期：2015-04-24；修回日期：2015-09-18