浅谈奶牛乳房炎PCR 诊断技术的应用

高清清

(江苏省太仓市浏河动物防疫站215400)

浅谈奶牛乳房炎PCR 诊断技术的应用

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(江苏省太仓市浏河动物防疫站215400)

奶牛乳房炎是由物理、化学或微生物等因素刺激奶牛乳腺所引发的一种炎症反应，其中多种病原微生物的感染是引起奶牛乳房炎的主要病因。该病广泛存在于世界各地，其发生率至今仍相当高。它不仅仅给世界奶牛养殖业带来了巨大的经济损失，也给乳品工业的发展、公共卫生以及食品安全带来一定隐患。目前，奶牛乳房炎的防治仍以采用抗菌素进行治疗为主，临床治疗过程中由于盲目使用抗生素，致使耐药菌株不断产生，不但疗效不佳，而且造成治疗成本增加；还可引起乳中药物残留，这将大大降低经济效益。早期的检测不仅能够预防乳房炎的发病，而且也可为乳房炎治疗提供有效依据，是直接提高牛奶质量有效、切实的手段。目前奶牛乳房炎主要的诊断方法有乳汁体细胞计数、微生物鉴定、电导率值检验、乳成分检验、MTT和PCR检测等方法。

微生物鉴定法是目前比较认同的一种标准检测方法，但此种检测方法检测时间长，检测环境要求高，工作量大，并且极易产生假阴性误判，因此目前还仅限于实验室检测，并未在奶牛养殖场进行推广。随着分子生物学的广泛发展，PCR应用技术日益完善，PCR检测奶牛乳房炎是目前在临床诊断中广泛应用的一种分子水平方法。此次笔直应用上海奶牛育种中心PathoProof奶牛乳房炎PCR诊断系统对江苏太仓地区部分牧场两百多个样本进行检测，发现其具备以下特点：（1）准确：100%特异性鉴别出牛奶样本中的DNA，结果客观，无需依赖检测者经验；实现定性和定量分析，如果样本中同时存在多种病原菌，所有病原菌会被同时检测到并报告各种细菌的比例。 （2）高效：从样本到结果只需4～5h，包括支原体。 （3）便捷：可用于分析鲜乳及添加溴硝丙二醇防腐剂保存了3个月的牛乳样本，样本常温运输，使牛奶跟踪样本 （DHI样本）能首次用于乳腺炎检测项目；可用于对奶牛治疗期间的样本进行检测，不受抗生素药品的影响；不需要非常丰富的微生物鉴定经验和严格的无菌操作环境及设备就能得到准确结果。

基于该技术的特点，牧场可对乳房炎急性发病高产奶牛，久治不愈的、反复发作的奶牛优先进行采样送检，及时确定主要致病菌及用药浓度，避免盲目用药、过量用药，缩短治疗周期，减少生产上的损失。有条件的牧场也可以制定科学的计划，结合奶牛临床症状及隐性乳房炎检测结果，定期集中采样送检，获得牧场全年度不同季节奶牛乳房炎病原菌发病情况及其药物敏感性的系统资料，为指导临床合理用药和制定来年牧场环境、挤奶管理计划，提高奶牛乳房炎防治效果提供理论依据。