张 旭,赵芬琴
(河南大学 药学院,河南 开封 475004)
生姜提取液抗炎镇痛作用研究
张旭,赵芬琴
(河南大学 药学院,河南 开封 475004)
摘要:目的研究生姜水提液和生姜醇提液的镇痛抗炎作用。方法通过二甲苯致小鼠耳肿胀模型及小鼠腹膜炎模型,研究其抗炎作用;采用醋酸诱发小鼠扭体反应及小鼠热板法,观察其镇痛作用。结果生姜提取液在一定浓度下能明显抑制炎症发生和醋酸致小鼠扭体反应,并对热板法致小鼠痛阈值有显著提高。结论生姜提取液有明显的抗炎镇痛作用。
关键词:生姜;抗炎;镇痛
中图分类号:R285.5
文献标识码:识码: A
文章编号:编号: 1672-7606(2015)01-0026-03
收稿日期:2014-10-15
基金项目:河南省教育厅自然科学研究指导计划项目(2010B310003);河南大学校内基金(2008YB2R32);开封市科技局项目(100317)。
作者简介:张旭(1979—),女,河南鹿邑人,硕士,讲师,从事中药药理和肿瘤药理研究工作。
Abstract:ObjectiveTo study anti-inflammatory and analgesic of the Fresh Ginger Extract. MethodsThe anti-inflammatory effect of the Fresh Ginger Extract was studied by the mice ear edema model and peritonitis induced by xylene. The analgesic effect was observed by using writhe reaction induced by acetic acid in mice, the pain threshold caused by hot plate in mice. ResultsThe Fresh Ginger Extract could distinctively inhibit the inflammatory edema caused by xylene and reduce the time of writhe induced by acetic acid in mice, could obviously improve the mice’ pain threshold by hot plate. Conclusion The Fresh Ginger Extract has significant anti-inflammatory and analgesic effect.
Experimental studies on Anti-inflammatory and Analgesic effects of Fresh Ginger Extract
ZHANG Xu, ZHAO Fenqin
(PharmacyCollegeofHenanUniversity,Kaifeng,Henan475004,China)
Key words: Fresh Ginger Extract; Anti-inflammatory; Analgesic
生姜为姜科多年生草本植物姜(Zingiber officinale Rosc)的根茎[1],生姜味辛,性温,具有解表散寒、温中止呕、行水解毒、化痰止咳之功效。近年来的研究[2-4]表明,生姜具有广泛的药理作用,如强心、抗氧化、抗肿瘤、增强免疫等作用。我们就生姜水提液和生姜醇提液的镇痛抗炎作用进行研究,目的是观察二者的镇痛抗炎效果及二者的作用是否有异。
1材料与方法
生姜,为开封本地产,经河南大学药学院生药鉴定为姜科植物姜(Zingiber officinale Rosc)根茎,洗净,切丝,置于50 ℃烘箱中干燥。
生姜水提液:将从市场购买的干净生姜500 g切成细丝,在2 500 mL自来水中浸泡2 h后超声1 h,在文火下煮沸30 min,过滤,提取3次,合并滤液,浓缩,得到生姜水提液100 mL,保存于-20 ℃冰箱中,该提取液1周内用完,临用时配成所需浓度并摇匀;生姜醇提液:干净生姜500 g切成细丝于2 500 mL白酒(乙醇体积分数为52%)中浸泡5 d后,超声1 h,提取3次,合并滤液,放入50 ℃下水浴锅中浓缩,得到生姜醇提液100 mL,保存于-20 ℃冰箱中,该提取液1周内用完,临用时配成所需浓度并摇匀。白酒(乙醇体积分数为52%),开封酿制;丙酮,天津市福晨化学试剂厂;冰醋酸,天津市福晨化学试剂厂;二甲苯,天津市福晨化学试剂厂;伊文思蓝,国药集团化学试剂有限公司;阿司匹林原料药,湖北省新银河有限公司。
健康昆明小鼠,清洁级,体重18~22 g,由河南省动物养殖中心提供(合格证号:豫动合字101号)。
电子天平,型号:JY10001,上海精密科学仪器有限公司;0516型-台式低速离心机,上海医疗器械有限公司手术器械厂; UV-1600型分光光度计,上海精密科学仪器有限公司;智能热板仪,RB-200,成都泰盟软件有限公司。
1.4.1生姜水提液/醇提液对二甲苯致小鼠耳廓肿胀的影响[5-6]小鼠60只,雌雄兼有,随机分为6组,每组10只,生姜水提液/醇提液高剂量组、生姜水提液/醇提液低剂量组、模型组及阳性药物阿司匹林组。生姜水提液/醇提液高剂量组、低剂量组分别按5 g/kg、1 g/kg,阿司匹林组按0.2 g/kg,模型组给予相应量生理盐水,均灌胃给药,1次/d,连续14 d。于末次给药30 min后,立即在右耳前后两面均匀涂抹二甲苯0.02 mL/只致炎,左耳不涂作对照。致炎后40 min处死小鼠,用8 mm打孔器分别取双耳耳廓相同部位耳片,精密称重。按下式计算肿胀率。
1.4.2生姜水提液/醇提液对二甲苯致小鼠腹膜炎的影响[5-6]小鼠60只,雌雄兼有,随机分为6组,每组10只,生姜水提液/醇提液高剂量组、生姜水提液/醇提液低剂量组、模型组及阳性药物阿司匹林组。给药剂量按1.4.1项,模型组给予相应量生理盐水,均灌胃给药,1次/d,连续14 d。于末次给药40 min后,小鼠尾部静脉注射10 g/L伊文氏蓝0.1 mL/10 g,注射后立即于小鼠腹部去毛处涂二甲苯0.1 mL,30 min后处死小鼠,剥离腹部正中腹部皮肤,剪取染色皮肤直径2.5 cm,剪碎,放入试管,加5 mL丙酮-生理盐水(7∶3)液,浸泡48 h(中间振摇10次),1 500 r/min离心15 min,取上清液于610 nm处测吸光度(以丙酮-生理盐水7∶3调零)。
1.4.3生姜水提液/醇提液对冰醋酸致小鼠扭体实验的影响[7-8]小鼠60只,雌雄兼有,随机分为6组,每组10只,生姜水提液/醇提液高剂量组、生姜水提液/醇提液低剂量组、模型组及阳性药物阿司匹林组。给药剂量按1.4.1项,模型组给予相应量生理盐水,均灌胃给药,1次/d,连续14 d。于末次给药40 min后,小鼠腹腔注射8 g/L冰醋酸0.1 mL/10 g,记录小鼠扭体潜伏期及20 min内各组小鼠出现扭体反应(腹部内凹,伸展后肢,臀部抬高)的次数。按照下式计算扭体抑制率:抑制率%=[(对照组扭体次数-给药组扭体次数)/对照扭体次数]。
1.4.4生姜水提液/生姜醇提液对小鼠热板致痛实验的影响[7-8]取18~22 g雌性小鼠,放入(55±0.5) ℃热板上,以出现舔后足所需时间(s)作为小鼠的痛阈值。痛阈值在30 s之内的小鼠为合格小鼠。挑选60只合格小鼠随即分为6组,分别与分组与给药量同1.4.1项,每天灌胃1次,连续灌胃14 d,于末次给药后分别测给药后0.5、1、1.5 h的痛阈值。
2实验结果
无论是高剂量组(5 g/kg)生姜水提液还是醇提液都能明显地抑制炎症的发生(P<0.05),但低剂量组抗炎作用不明显(P>0.05),见表1。
注:与模型组比较,*P<0.05。
生姜水提液及生姜醇提液连续灌胃14 d后,无论高剂量组还是低剂量组均能降低小鼠血管通透性,但高剂量组与对照生理盐水组相比,其渗出的染料吸光度明显低于生理盐水对照组(P<0.05),见表2。
注:与生理盐水组比较,*P<0.05。
从表3可见,生姜水提液/生姜醇提液高剂量及阳性对照均有镇痛作用,可延长小鼠发生扭体反应的潜伏期和减少小鼠扭体反应的次数(P<0.01,P<0.05)。
注:与模型组比较,*P<0.05,**P<0.01。
从表4可以看出,生姜水提液/醇提液高剂量1 h后镇痛作用明显,特别是生姜醇提物1 h后痛阈值延长极其显著(P<0.01),而低剂量提取液对痛阈值没有明显影响。
注:与对照组比较,*P<0.05,**P<0.01。
3讨论
炎症是十分常见而又重要的基本病理过程,体表的外伤感染和各器官的大部分常见病和多发病(如疖、痈、肺炎、肝炎、肾炎等)都属于炎症性疾病。急性炎症以发红、肿胀、疼痛等为主要征候。抗炎镇痛的相关研究很多[9-11],方法成熟,结果可靠,我们的试验结果显示高剂量对二甲苯致小鼠耳廓肿胀及醋酸致腹腔毛细血管通透性的增高有明显的抑制作用,说明高剂量生姜水提液/醇提液对急性炎症有一定的对抗作用。生姜水提液/醇提液高剂量可使小鼠醋酸所致扭体反应潜伏期延长,扭体次数明显降低;高剂量对热板法引起的疼痛均有不同程度的镇痛作用,高剂量在1 h后镇痛效果极其显著(P<0.01)。
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[责任编辑李武营]