HA、HYAL1在预测非肌层浸润性膀胱癌的复发和肌层浸润中的作用

HA、HYAL1在预测非肌层浸润性膀胱癌的复发和肌层浸润中的作用

邢东亮宋东奎1康郑军酒涛

(郑州大学第五附属医院泌尿外科，河南郑州450052)

摘要〔〕目的分析透明质酸(HA)及透明质酸酶(HYAL1)对非肌层浸润性膀胱癌复发及肌层浸润的预测作用。方法将60例非肌层浸润性膀胱癌患者3年后的随访资料进行分析总结，根据3年后复发情况将患者分为22例未见肿瘤复发的未复发组及38例出现肿瘤复发的复发组，并将复发组患者分为未见肌层浸润的16例未浸润组及22例发生肌层浸润的浸润组。对比未复发组与复发组、未浸润组与浸润组HA及HYAL1阳性率差异，并分析HA及HYAL1阳性率对膀胱癌复发及肌层浸润的诊断价值。结果复发组HA及HYAL1阳性率分别为68.42%及76.32%，明显高于未复发组40.91%及50.00%(P<0.05)；浸润组HA及HYAL1阳性率分别为81.82%及90.91%，则明显高于未浸润组50.00%及56.25%(P<0.05)；HA及HYAL1阳性率对膀胱癌复发无预测价值(P<0.05)，但是对复发后肌层浸润存在预测价值(P<0.05)。结论HA及HYAL1阳性率对于预测复发后出现肌层浸润均有着显著的价值，可作为预测膀胱癌复发后出现肌层浸润的观察指标。

关键词〔〕透明质酸；透明质酸酶；膀胱癌

中图分类号〔〕R739〔文献标识码〕A〔

基金项目：国家自然科学

通讯作者：宋东奎(1963-)，男，主任医师，博士，博士生导师，主要从事尿液修饰核苷作为膀胱肿瘤标志物筛选鉴定及分子机制研究。

1郑州大学第一附属医院泌尿外科

第一作者：邢东亮(1976-)，男，博士，主要从事泌尿生殖系肿瘤研究。

膀胱癌是临床上泌尿外科常见的恶性肿瘤，大多数为非肌层浸润性肿瘤，膀胱肿瘤一旦进展为肌层浸润肿瘤，预后不良〔1〕。目前对于膀胱癌的治疗多采用手术切除的方法，但是膀胱癌术后容易复发，复发后容易呈现更高的恶性程度或者侵入肌层，目前临床上还没有很好的预测指标〔2〕。透明质酸(HA)及透明质酸酶(HYAL1)在膀胱癌的发生、发展中具有重要的作用。本文拟探讨HA、HYAL1作为膀胱癌复发和肌层浸润预测指标的可能性。

1资料与方法

1.1一般资料将60例于2009年1月至2011年5月间在我院诊断的非肌层浸润性膀胱癌患者作为观察对象，所有患者均符合本研究的入选及排除标准。根据3年后复发情况将患者分为22例未见肿瘤复发的未复发组及38例出现肿瘤复发的复发组，并将复发组患者分为未见肌层浸润的16例未浸润组及22例发生肌层浸润的浸润组。未复发组22例，年龄33～69岁，平均(51.26±11.67)岁；复发组38例，年龄32～67岁，平均(51.17±11.66)岁，两组年龄比较未见无显著差异，具有可比性。未浸润组16例，年龄33～67岁，平均(51.36±11.21)岁；浸润组22例，年龄32～68岁，平均(51.27±11.22)岁，两组间性别及年龄比较同样未见统计学意义，具可比性。

入选标准：①所有患者均经膀胱镜检查及病理学检查明确诊断为膀胱癌；②具有完整的3年随访资料，并且于诊断3年后同意入院复诊；③复诊时签署知情同意书。排除标准：①合并其他部位恶性肿瘤者；②临床资料不完整；③存在严重可导致肝肾功能不全及心功能不全疾病者；④未签署知情同意书。

1.2检测方法取所有受检者的膀胱癌活检组织，用生理盐水清洗干净后，浸泡于4%多聚甲醛溶液中，石蜡包埋,制备蜡块，厚度5μm，于42℃水浴展片，贴于载玻片上，65℃烤片2h后，经过二甲苯Ⅰ10min，二甲苯Ⅱ10min，100%乙醇Ⅰ5min，100%乙醇Ⅱ5min，90%乙醇5min，85%乙醇5min，75%乙醇5min，梯度透明，然后枸橼酸钠缓冲液(10mmol/L，pH6.0)中高压锅内煮沸，上气3min后缓慢冷却进行抗原修复，然后使用SP免疫组化试剂盒(福州迈新生物有限公司)进行染色。抗人HA、HYAL-1多克隆抗体购自北京中山金桥生物技术有限公司， 染色过程严格按照SP免疫组化试剂盒说明书，结果判定：光镜下见组织切片细胞质、胞膜出现棕黄色或黄色颗粒者为阳性细胞。

1.3观察指标及方法所有患者均于确诊3年后再次入院复诊，行膀胱镜检查并镜下膀胱肿瘤活检及膀胱黏膜随机活检，对留取的活检组织进行HA及HYAL1检查。

1.4统计学方法采用SPSS19.0软件行χ2检验及ROC分析。

2结果

复发组HA及HYAL1阳性率分别为68.42%及76.32%，明显高于未复发组40.91%及50.00%(P<0.05)；浸润组HA及HYAL1阳性率分别为81.82%及90.91%，明显高于未浸润组50.00%及56.25%(P<0.05)。HA及HYAL1阳性率对膀胱癌复发无预测价值(P>0.05)，但是对复发后肌层浸润存在预测价值(P<0.05)，见表1。

表1　 HA及 HYAL1对膀胱癌复发及肌层浸润的诊断价值

3讨论

目前临床上还没有有效的复发和肌层浸润的预测因子。 很多研究显示血管生成和基质的破坏在肿瘤的转移过程起关键作用，可能原因是肿瘤细胞在转移过程中必须丧失黏附能力从而穿透周围的细胞基质，从而在体内远处形成转移灶，并且肿瘤细胞转移的方向与数量受血管新生的影响〔3〕。

HA可以通过抑制新生血管的生成而抑制肿瘤细胞生长转移〔4〕。肿瘤细胞自身合成大量的HA,或者肿瘤细胞诱导周围的间质细胞合成HA,从而导致发生肿瘤浸润的患者HA的阳性率高〔5〕。HA可能通过以下机制促进肿瘤的浸润和转移：①促进肿瘤细胞非停泊性生长；②促进胶原纤维和糖蛋白的结构变形，有利于肿瘤细胞的移动；③与肿瘤细胞膜表面的CD44结合，减少免疫细胞对肿瘤细胞的攻击；④HA与其受体CD44结合，促进CD44相关的酪氨酸激酶磷酸化，使细胞骨架发生改变，促进肿瘤细胞的移动〔6〕。

HYAL1位于抑癌基因3p21上，是HA的特异性降解酶，可以将HA分解为多个寡聚糖，小分子的HA可以促进血管形成，有利于肿瘤的转移和浸润〔7〕。在很多肿瘤中具有抑制肿瘤细胞生长的作用，但是本研究结果与以前的报道不符〔8〕，可能原因是不同组织中的HYAL1对肿瘤的生长具有不同的作用，在泌尿系统肿瘤中HYAL1具有促进肿瘤生长和转移的作用，可能机制是：①将HA分解为小分子寡聚糖促进新生血管的形成，不仅为肿瘤细胞的快速增殖及物质代谢提供物质基础，而且为肿瘤细胞进入血液循环提供通路；②促进肿瘤细胞通过G1期进入S期进行增殖，提高肿瘤细胞的增殖比率。本研究显示HA及HYAL1通过促进肿瘤细胞生长和转移参与肿瘤细胞的基层浸润。

4参考文献

1邓建华,李汉忠,张玉石.非肌层浸润性膀胱癌进展风险研究现状〔J〕.中华医学杂志,2014；94(22)：1758-9.

2路建磊,王超,鹿占鹏,等.透明质酸及透明质酸酶1对膀胱癌术后的监测作用〔J〕.中华实验外科杂志,2013；30(2)：389-91.

3李志强,姜书传,马玲,等.膀胱移行癌中HYAL-1、CD44v6及MVD的临床意义〔J〕.现代泌尿外科杂志,2011；16(5)：439-41.

4LokeshwarVB，CerwinkaW，LokeshwarBL.HYAL1hyaluronidase：amoleculardeterminantofbladdertumorgrowthandinvasion〔J〕.CancerRes，2005；65(6)：2243-50.

5TanJX，WangGXY，LiHY，et al.HYAI1overexpressioniscorrelatedwiththemalignantbehaviorofhumanbreastcancer〔J〕.IntJCancer，2011;128(6)：1303-15.

6蔡建良,李鸣,那彦群.膀胱移行细胞癌组织中透明质酸合成酶基因家族差异表达的临床意义〔J〕.中华肿瘤杂志, 2011;33(2)：121-5.

7张绍谨,刘红耀.尿膀胱癌抗原、核基质蛋白22和透明质酸诊断膀胱癌的临床价值〔J〕.中华临床医师杂志(电子版), 2011;5(24)：7202-5.

8林尤仕,朱明月,谢协驹, 等.肝病患者血清肿瘤标记物含量及肿瘤坏死因子相关凋亡诱导配体受体表达在癌变中的临床意义〔J〕.中华临床医师杂志(电子版), 2011;5(2)：331-4.

〔2014-03-21修回〕

(编辑李相军)