水产品中关于硝基呋喃类代谢物检测方法的方法确证研究

◎黎天勇，刘 斌，张 博，蔡扬尧

（云浮出入境检验检疫局综合技术服务中心，广东 云浮 527300）

硝基呋喃类药物是一类人工合成广谱抗生素，对大多数革兰氏阳性、阴性菌，真菌和原虫等病原体均有杀灭作用[1]。20世纪90年代，硝基呋喃类药物被发现具有致畸、致突变和致癌作用[2]，2002年我国颁布了《食用动物禁用的兽药及其它化合物清单》，禁止使用硝基呋喃类抗生素，并于2003年将水产品硝基呋喃代谢物纳入残留监控计划中[2]。食品中硝基呋喃类代谢物的检测方法，主要有免疫分析法[3]、液相色谱法及液质联用法[4-6]。

1 仪器与设备

仪器名称：Agilent 1290-6460安捷伦液质联用仪；配有电喷（ESI）离子源；生产厂家：美国安捷伦。

2 方法参考

主要参照GB/T 21311-2007（LC-MS/MS法），对硝基呋喃类药物四种代谢物AOZ、AMOZ、AHD、SEM进行研究，以验证采用的方法是否有效。

3 标准曲线测试数据

为检验物质线性是否达到要求，绘制硝基呋喃代谢物标准曲线，如图1～4所示。

4 方法的定性分析数据

表1 SEM标准曲线

表2 AOZ标准曲线

表3 AMOZ标准曲线

表4 AHD标准曲线

因为定性分析涉及到色谱峰的保留时间和相对丰度，因此利用加标来进行方法定性的确证，在检测限进行分析。如表5所示。

5 方法检出限测试数据表

分别对各种标准物质溶液稀释成不同低浓度，分别上机，分析方法检出限。如表6所示。

根据3倍信噪比确定药物的方法检出限，10倍信噪比（S/N）确定药物的方法定量限，SEM、AOZ、AMOZ、AHD方法检测限均为0.5 μg/kg。

6 方法精密度及加标回收率

以进行硝基呋喃代谢物标准样品的6次重复性测试，分别在检测限及检测上下点进行测试，计算各类物质的精密度及加标回收率，如表7所示。

7 方法准确度测试数据

因为被测物质硝基呋喃代谢物标准样品为固体物质，所以用加入各被测定组分的纯物质进行回收试验来估计和确定准确度。如表8所示。

8 方法验证结论

以 GB/T 21311-2007方 法 测 得 SEM、AOZ、AMOZ、AHD方法检测限均为0.5 μg/kg；定性分析定性离子对相对离子丰度偏差均在±20%之间；方法精密度分别为4.72%、3.03%、2.44%、3.73%；方法准确度相对误差分别为2%、0%、0%、2%；方法加标回收所得测试数据，回收率均在90%～110%之间；对国家有证标准物质分析的相对误差均在3%以下，满足实验室质量控制的要求，为进一步保证测量的准确性，我们参加了呋喃妥因测量审核，结果均为满意，本次验证结果有效。

表5 硝基呋喃类代谢物定性分析数据

表6 方法检出限测试数据表

表7 SEM、AOZ、AMOZ、AHD精密度测试数据

表8 SEM、AOZ、AMOZ、AHD准确度测试数据

[1]生威,李季,许艇.动物性产品中硝基呋喃类抗生素残留检测方法研究进展[J].农业环境科学学报,2006(25).

[2]田蕴,罗晓琴.水产品硝基呋喃类药物残留检测[J].动物保健,2006(7).

[3]徐一平,金征宇,胥传来.ELISA方法检测呋喃妥因代谢物1-氨基乙内酰脲[J].食品工业科技,2008(8).

[4]葛宝坤,王云凤,常春艳,等.测定鸡肉、水产品中四种硝基呋喃类药物残留量的固相萃取-液相色谱法[J].分析测试学报,2003(5).

[5]庞国芳,进杰,曹彦忠,等.高效液相色谱-串联质谱法测定家禽组织中硝基呋喃类抗生素代谢物残留的研究[J].食品科学,2005(10).

[6]动物源性食品中硝基呋喃类药物代谢物残留量检测方法高效液相色谱-串联质谱法（GB/T21311-2007）[S].北京:中国标准出版社,2007.