HPLC法同时测定糕点中7种食品添加剂

HPLC法同时测定糕点中7种食品添加剂

项林敏1，金煜彬2

(1.浙江海洋学院 经济管理学院 浙江 舟山 316000；2.温州质量技术监督检测院 浙江 温州 325000)

摘要：建立了高效液相色谱法(HPLC)同时测定糕点中丙酸钙(钠)、双乙酸钠、脱氢乙酸、苯甲酸、山梨酸、糖精钠、安赛蜜7种食品添加剂。实验采用苯基柱，以0.02 mol/L磷酸二氢钾和甲醇为流动相，采用梯度淋洗，不同的检测波长下进行检测。上述7种物质回收率为92.0%—100.0%，相对标准偏差为0.75%—0.97%。

关键词：液相色谱；同时测定；糕点

收稿日期：2015-04-01.

作者简介：项林敏(1988-)，男，硕士研究生，E-mail:305583720@qq.com.

文章编号：2095-7386(2015)03-0016-04

DOI:10.3969/j.issn.2095-7386.2015.03.004

中图分类号：TS 207

Simultaneous determination of 7 kinds of pastry food additives by HPLC

XIANGLin-min1,JINYu-bin2

(1.School of Economics and Management,Zhejiang Ocean University,Zhoushan 316000,China;

2. Wenzhou Supervision and Inspection Institute of Quality and Technology,Wenzhou 325000,China)

Abstract：A method is proposed for the simultaneous determination of 7 kinds of food additives in pastry,calcium propionate(sodium propionate),sodium diacetate,Dehydroacetic acid,benzoic acid,sorbic acid,sodium saccharin sodium and acesulfame by high performance liquid chromatography.The experiment is accomplished by using phenyl column with 0.02moL/L monopotassium phosphate and methanol as mobile phase and gradient elution with testing in different detection wavelengths.The aboving 7 kinds of substances recovery rate ranged from 92.0% to 101.0%, and the relate standard deviation ranged from 0.75% to 0.97%.

Key words：HPLC;simultaneous determination;pastry

1引言

食品添加剂是为改善食品色、香、味等品质，以及为防腐和加工工艺的需要而加入食品中的人工合成或天然物质。例如：防腐剂是指天然或合成的化学成分，用于加入食品、药品、颜料、生物标本等，以延迟微生物生长或化学变化引起的腐败。防腐剂是用以保持食品原有品质和营养价值为目的的食品添加剂[1-2]。

糕点是一种以面粉或米粉、糖、油脂、蛋、乳品等为主要原料，配以各种辅料、馅料和调味料，初制成型，再经蒸、炸、炒等方式加工制成的食品。其品种丰富，携带方便，越来越受到人们的喜爱。但由于其水分含量较高，比较容易霉变。在生产过程中，许多厂家采用了复合防腐剂，并加入了各种甜味剂以提高其口感。根据GB 2760-2011《食品安全国家标准食品添加剂使用标准》规定, 糕点中可以添加的防腐剂有丙酸钙、丙酸钠、山梨酸及其钾盐、双乙酸钠、脱氢乙酸及其钠盐；糕点中可限量添加的甜味剂有糖精钠和安赛蜜(乙酰磺胺酸钾)。而苯甲酸由于毒性较大，用量过多会对人体肝脏产生危害, 甚至致癌，已不能用在糕点类的食品中。

目前国家在抽检糕点时都会检测上述项目。而目前现有的国家标准[8-12]对糕点中丙酸钙(钠)、双乙酸钠、脱氢乙酸、苯甲酸、山梨酸、糖精钠、安赛蜜等7种食品添加剂进行检测时需要用5种方法来实现，消耗大量人力物力。因此有必要建立一种可以对糕点中7种添加剂同时检测的方法，以提高检测效率，降低检测成本。

笔者主要是以回收率为技术指标，确定糕点中七种食品添加剂的前处理提取方法、确定检出限和线性范围，并最终研究出用HPLC法同时测定糕点中7种食品添加剂。

2材料与方法

2.1实验仪器

液相色谱仪：Waters2695-2996-2475 DAD；真空抽滤器；高速冷冻离心机：Eppendorf 5430R；漩涡混合仪：IKA MS3 basic；超声波发生器：上海科导超声仪器 SK25200H。

2.2实验材料

面包、蛋糕、月饼、磷酸、氢氧化钠、磷酸二氢钾、甲醇、苯基柱、预柱、0.45μm针式过滤器。

2.3标准品

丙酸、双乙酸钠、脱氢乙酸、苯甲酸、山梨酸、糖精钠、安赛蜜。

3实验方法

3.1标样溶液的配制

苯甲酸、山梨酸、安赛蜜、糖精钠、脱氢乙酸标准储备液：称取标准品苯甲酸、山梨酸、安赛蜜、糖精钠、脱氢乙酸各0.1 g(精确至0.000 1 g)，用水定容至100 mL容量瓶中，摇匀，即分别得1 mg/mL的苯甲酸、山梨酸、安赛蜜、糖精钠、脱氢乙酸储备液[8-9]。

丙酸、双乙酸钠标准储备液：称取标准品丙酸、双乙酸钠各1 g(精确至0.000 1 g)，用水定容至100 mL，摇匀，即得10 mg/mL的丙酸、双乙酸钠储备液[10-11]。

根据仪器响应值，各取7种标准储备液适量混合，用水稀释成表1的标准系列。

3.2高效液相色谱条件的选择

色谱柱：Synergi Polar-RP250 mm×4.6 mm；

柱温：30 ℃；

流动相：甲醇+0.02 mol/L磷酸二氢钾(pH2.5)；流速1 mL/min；

检测器：二极管阵列检测器；

检测波长：0—9 min，214 nm；

9.1—30 min，230 nm；

30.1—50 min，293 nm；

进样量：10 μL。

梯度洗脱时间程序如表2所示。

表1　7种标准品的不同浓度　/(mg/mL)

表2梯度洗脱时间程序

时间/min甲醇/%0.02mol/L磷酸氢二钾(pH=2.5)/%001009010010.1356534.0356535.03070503070

3.3样品前处理

由于7种添加剂都易溶于水，本方法采用超声提取法提取。经过实验得到以下方法：称取样品10 g(精确到0.01 g)于100 mL容量瓶中，加入50 mL水和1 mol/L磷酸溶液1 mL，超声提取30 min，用氢氧化钠溶液调pH值至7—8，用水定容至刻度，摇匀。过滤，将滤液转移至50 mL离心管中，5 000 r/min离心5 min。取上清液，经0.45 μm滤膜过滤，其滤液为待测液。

4结果与分析

4.1色谱分离效果图

按照上述参考条件，对7种化合物质进行分析，得到标准样品的谱图如图1所示，出峰循序依次为双乙酸钠、丙酸、安赛蜜、糖精钠、山梨酸、苯甲酸、脱氢乙酸。

图1　7种食品添加剂出峰图

4.2工作曲线及检测限

工作曲线以3.2的色谱条件进行测试分析，得到不同浓度下各组分的峰面积，以浓度和峰面积绘制标准曲线。得到7种物质的标准曲线及检测限，如表3所示。

表3　7种添加剂的线性范围及检出限　/(mg/kg)

4.3实际样品的检测

采用本方法对糕点中月饼、蛋糕、面包等进行检测，结果见表4。从表4可以看出，方法准确度高，结果满意。

表4　实际样品的检测结果　/(mg/kg)

4.4回收率及精密度(RSD)实验

根据3.3方法加入5 mg/L标准混合溶液1 mL至样品中，进行加标实验，计算回收率，并用一混标标准溶液连续进样10次，计算RSD，结果见表5。

表5　各组分RSD和回收率　/(mg/L)

5结论

综上所述，该方法中山梨酸、苯甲酸、糖精钠、安赛蜜、脱氢乙酸、双乙酸钠、丙酸钙(钠)色谱分离效果良好，可同时检测。能够帮助食品检测机构在批量糕点检测中节省人工时间，节省材料成本，同时提高效率，在更少的时间完成更多的任务，适合在实验室间推广。

参考文献：

[1]谭朝勤,吴新. 高效液相色谱法同时测定面包糕点中苯甲酸(钠)、山梨酸(钾)、安赛蜜、糖精钠和脱氢乙酸(钠)的含量[J]. 广东化工，2009(6).

[2]凌东辉,潘翊,钟春霞. 糕点中脱氢乙酸的高效液相色谱C8柱测定[J]. 中国公共卫生，2005(3) .

[3]车燕妮,苏敬武,刘新荣,等.常温液相色谱法快速测定食品中安赛蜜、苯甲酸、山梨酸、糖精钠[J]. 预防医学文献信息，2004(3).

[4]何云亚,陆昱养. 高效液相色谱法同时测定食品中5种添加剂[J]. 中国卫生检验杂志，2007(4).

[5]方波,徐明敏,陈波.豆制品中7种防腐剂的高效液相色谱法同时测定[J]. 中国卫生检验杂志，2011(4).

[6]王冬梅,王家保,李俊玲.液相色谱法同时测定乳制品中糖精钠、苯甲酸、山梨酸[J].中国卫生检验杂志，2005(8).

[7]杨红梅,刘艳琴,殷晓燕,等. 高效液相色谱法同时测定食品中安赛蜜、苯甲酸、山梨酸、糖精钠以及脱氢乙酸[J].食品科技，2007(10).

[8]GB/T 23495-2009，食品中苯甲酸、山梨酸和糖精钠的测定高效液相色谱法[S].

[9]GB/T23377-2009，食品中脱氢乙酸的测定高效液相色谱法[S].

[10]GB/T23383-2009，食品中双乙酸钠的测定高效液相色谱法[S].

[11]GB/T23382-2009，食品中丙酸钠、丙酸钙的测定高效液相色谱法[S].

[12]GB/T5009.29-2003，食品中山梨酸、苯甲酸的测定高效液相色谱法[S].