双波长分光光度法测定雷贝拉唑钠肠溶片含量

双波长分光光度法测定雷贝拉唑钠肠溶片含量

徐花荣1，杨世霆2，次丽倩3，赵芝菁3

1.上海信谊天平药业有限公司(上海，201108)

2.上海信谊嘉华药业公司(上海，201815)

3.上海理工大学 医疗器械与食品学院(上海，200093)

【摘要】应用双波长分光光度法测定雷贝拉唑钠肠溶片中雷贝拉唑钠的含量。以磷酸盐缓冲液为溶剂，在波长290 nm、360 nm处进行测定，测得雷贝拉唑钠的线性范围是0.200 2～1.801 mg/mL，相关系数为0.999 7。雷贝拉唑钠的回收率为99.7%～100.4%，测定结果的相对标准偏差为0.218%。

【关键词】双波长；分光光度法；雷贝拉唑钠；肠溶片

doi:10.3969/j.issn.1674-1242.2015.02.008

作者简介：徐花荣, E-mail: 1851923773@qq.com

【中图分类号】O657.32

【文献标识码】A

文章编号：1674-1242(2015)02-0095-04

Abstract【】 Dual wavelength spectrophotometry is used for the determination of rabeprazole sodium in rabeprazole sodium enteric-coated tablets. The solvent is phosphate buffer and the determine wavelength is 290 nm and 360 nm, respectively. The linear calibration curve of rabeprazole sodium ranges 0.200 2～1.801 mg/mL, and the correlation coefficients is 0.999 7. The recovery of rabeprazole sodium was 99.7%～100.4% and RSD is 0.218%.

收稿日期：(2105-01-15)

Determination of Rabeprazole Sodium Enteric-coated

Tablets by Dual Wavelength Spectrophotometry

XU Huarong1，YANG Shiting2，CI Liqian3，ZHAO Zhijing3

1. Shanghai Sine Tianping Pharmaceutical Co.Ltd( Shanghai，201108)

2. Shanghai Sine Jiahua Pharmaceutical Co.Ltd( Shanghai，201815)

3. School of Medical Instrument and Food Engineering,

University of Shanghai for Science and Technology(Shanghai，200093)

【Key words】 dual wavelength, spectrophotometry, rabeprazole rodium, enteric-coated tablets

雷贝拉唑钠肠溶片，主要成分为雷贝拉唑钠，其化学名为2-{4-(3-甲氧基丙氧基)-3-甲基吡啶-2-基甲亚磺酰基}-1H-苯并咪唑钠。适用于治疗活动性十二指肠溃疡；良性活动性胃溃疡；伴有临床症状的侵蚀性或溃疡性的胃-食管返流征(GORD)；与适当的抗生素合用，可根治幽门螺旋杆菌阳性的十二指肠溃疡；侵蚀性或溃疡性胃-食管返流征的维持期治疗。雷贝拉唑钠的测定方法有紫外分光光度法、比色法、高效液相色谱法等[1]，但运用双波长方法测量雷贝拉唑钠目前未见文献报道。双波长分光光度法通过测定参比波长处和测定波长处的吸光度的差值进行定量，由于仅用一个吸收池，且用试液本身作参比液，因此，可消除吸收池及参比液所引起的误差，在一定程度上克服了单波长的局限性，扩展了分光光度法的应用范围。

雷贝拉唑钠药物本身在290 nm处有极好吸收，但是其辅料在290 nm处也有小量吸收，因此单一使用290 nm作为其含量测定的检测波长，会有一定的误差存在。经过全波长扫描发现，辅料在360 nm存在稳定吸收，因此选择290 nm和360 nm双波长，作为雷贝拉唑钠肠溶片双波长检测的波长检测其含量，消除辅料的影响。该方法简便可靠，重现性良好，测定结果满足标准要求[2]。

1　实验材料

1.1试剂

磷酸盐缓冲液(pH=6.8)；雷贝拉唑钠对照品(中国药品生物制品检定所，纯度99.8%);雷贝拉唑钠肠溶片(自制，批次20141109，20141201，20141215，标示量10%)；蒸馏水(雀巢)。

1.2仪器

紫外分光光度计(型号UV-5300，上海元析仪器有限公司)；分析天平(BS224S，赛多利斯科学仪器有限公司)；酸度计(PHS-3B，上海精科仪器有限公司)；超声波清洗仪(KQ3200，上海精密仪器仪表有限公司)；纯化水仪(ESW-I-1，Millipore)。

2　实验方法

2.1溶液配制

(1)磷酸盐缓冲液(pH=6.8)：取磷酸氢二钾13.6 g，加水溶解并稀释到2 000 mL，用氢氧化钾溶液调节pH值至6.8，摇匀作为溶媒待用。

(2)雷贝拉唑钠对照品溶液：分别精密称取雷贝拉唑钠对照品约10 mg，置于10 mL容量瓶中，以pH =6.8的磷酸盐缓冲液稀释至刻度，摇匀作为储备液。精密量取储备液1.00 mL，置于10 mL容量瓶中，以pH =6.8的磷酸盐缓冲液稀释至刻度，摇匀作为对照品溶液。

2.2检测波长的选择

取雷贝对照品适量，加入缓冲液制成每1 mL溶液中含有雷贝拉唑钠100 μg的溶液；同时按照处方比例配制包衣粉溶液，照分光光度法(中国药典2005年版二部附录IV A)测定，在190 nm～600 nm波长范围内对两份样品进行紫外全扫描。扫描结果如图1和图2。

图1雷贝拉唑钠紫外全波长扫描

Fig.1UV wavelength scanning for rabeprazole sodium

图2　包衣粉紫外全波长扫描

由图1可见，本品在215 nm，290 nm波长有最大吸收，215 nm属于边缘吸收，会对测定结果产生影响，故我们选择290 nm作为含量测定的波长，350 nm后无吸收；而包衣粉在300 nm后有稳定吸收(见图2)，因此选择290 nm与360 nm作为双波长测量波长。经过试验发现，辅料包衣粉在360 nm和290 nm处吸光度比值为0.65，则在测定样品含量时，以360 nm为参比波长，290 nm为测定波长，同时测定，令△A=A290-0.65*A360为定量信息来测定样品中雷贝拉唑钠的含量。采用此双波长测定雷贝拉唑钠的含量能有效的排除包衣粉对其的干扰，结果更准确。

2.3方法对比

取雷贝拉唑钠样品一片于10 mL容量瓶中，加入pH6.8缓冲液稀释定容至刻度，取其中1 mL至10 mL容量瓶中，定容至刻度，作为样品溶液(n=3)。同时取雷贝对照品储备液1 mL至10 mL，定容至刻度，做为标准溶液。同时采用双波长法和单波长法进行测定，对测得含量进行对比(以标示量为准)，测定结果如表1。

表1　双波长与单波长法测定结果比较

由表1可见，由于包衣粉存在紫外吸收，双波长扫描的测定结果更接近真实值，且平行实验RSD值更小，方法准确度更高。实际检测中，由于包衣粉的用量无法测定，无法扣除由其带来的吸光度，所以双波长测定更有使用价值。

2.4双波长测定法方法学验证

2.4.1标准曲线的绘制

精密称取雷贝拉唑钠对照品0.100 2 g，置50 mL量瓶中，加混合溶剂溶解并稀释至刻度，摇匀，作为储备溶液；分别精密量取储备溶液1、3、5、7、9 mL，置10 mL量瓶中，再加混合溶剂稀释至刻度，摇匀，扫描双波长，记录吸光度，以浓度(C)为横坐标，雷贝拉唑吸光度(△A)为纵坐标，计算回归方程，得标准曲线方程为：△A=0.4928c-0.0605，相关系数r2=0.999 7。应与结果见表2、图3。

表2　线性测定结果

图3标准曲线

Fig.3Standard curve

2.4.2精密度试验

取雷贝拉唑钠对照品储备液4 mL至10 mL容量瓶中，定容至刻度后进行连续测定，结果见表3。

表3　精密度试验结果

实验结果表明，连续测定6次，测定结果RSD值为0.741，符合要求，说明该检测方法精密度良好。

2.4.3辅料干扰实验

制备含雷贝拉唑钠浓度相同( 0.1 mg /mL)，而包衣粉浓度按照处方量的80%，100%，120%各有不同的样品溶液，按照双波长法测定吸光度并计算△A ，检测结果如表4所示。

表4　辅料干扰实验结果

由表4可知，加入不同量的包衣粉，回收率良好，说明包衣粉对雷贝拉唑钠的测定并没有干扰，说明该方法可以很好地避免辅料干扰，用于测定雷贝含量，具有一定的可靠性。

2.4.4稳定性试验

取雷贝拉唑钠对照品溶液于室温下放置0、2、4、6、8、10、12 h后，分别进行测定，记录吸光度值变化，结果见表5。

表5　雷贝拉唑钠溶液稳定性试验结果

结果表明：雷贝拉唑钠对照品溶液于室温放置12 h，吸光度值未发生显著变化，12 h内吸光度值RSD值为0.553%，符合要求。

2.4.5回收率试验

分别取已知含量雷贝拉唑钠的对照品，取处方量的80%、100%、120%，置100 mL量瓶中，加入处方量100%的辅料，加混合溶剂溶解并稀释至刻度，摇匀，过滤，分别测定。计算回收率。测定结果见表6。

表6　雷贝拉唑钠回收率结果

结果表明：雷贝拉唑钠在辅料溶液中的回收率在99.7～100.4%之间，RSD为0.218%，回收率良好，符合测定要求。

2.4.6重复性试验

取雷贝拉唑钠样品一片于10 mL容量瓶中，加入PH6.8缓冲液稀释定容至刻度，取其中1 mL至10 mL容量瓶中，定容至刻度，作为样品溶液(n=6)。同时取雷贝对照品储备液1 mL至10 mL，定容至刻度，做为标准溶液。采用双波长法测样品中雷贝含量，测定结果见表7。

表7　含量测定重复性试验结果

结果表明：采用双波长分光光度法测定样品含量，6份样品测定结果相对标准偏差小于2.0%，说明该方法重复性好，测定结果准确、可靠。

2.5三批样品的含量测定

精密称取装量差异下三批自制样品的细粉适量(约相当于雷贝拉唑50 mg)，置50 mL量瓶中，加混合溶剂，超声溶解，定容，放冷至室温，精密量取5 mL置50 mL容量瓶中，用混合溶剂稀释至刻度，摇匀，测定，记录吸光度；另取雷贝拉唑钠对照品适量，精密称定，加混合溶剂稀释并制成0.1 mg/ml的对照品溶液，同法测定。按外标法以吸光度计算出供试品中雷贝拉唑钠的含量，结果见表8。

表8　雷贝拉唑钠含量测定结果

3　结果讨论

参考文献综上所述，参考《中国药典》2010年版二部附录规定的检测方法`([3])及相关的，根据雷贝拉唑钠原料性质、口服制剂的国家标准及注射剂制剂通则，采用双波长分光光度法测定雷贝拉唑钠肠溶片含量。通过验证，该分析方法准确、可靠、方便、快捷，在0.200 4～1.803 6 mg/mL范围内线性良好，相关系数为0.999 7。雷贝拉唑钠的回收率为99.7～100.4%，测定结果的相对标准偏差为0.218%。

同样本法亦可以适用于雷贝拉唑钠肠溶片释放度的测量，相比于部颁标准采用的高效液相色谱法，同样能够达到准确、可靠、方便、快捷的要求，本法对于设备要求简单，尤其适合于生产厂家在产品留样考察时大批实验数据的测量。

[1] 陈孝治.新一代质子泵抑制剂-雷贝拉唑[J].世界药品信息,2001,2(6):52-53.

[2] 裴晓丽，刘明月.HPLC测定雷贝拉唑钠原料的含量及有关物质[J].中国药学杂志,2004,39(8):631.

[3] 国家药典委员会编.中华人民共和国药典(二部)[M].2005年版.北京：化学工业出版社，2005.

[4] 池秀珍.双波长分光光度法测定阿司匹林肠溶片的含量[J].海峡药学,2002,14(1):27.

[5] 杨泉生,黄坚峰.双波长分光光度法发展近况[C].华东区第二届有色冶金分析学术年会专题报告,1980(5):460.

[6] 倪永年.双波长分光光度法测定混合组分[J].分析化学，1987,15(2) :156-158.

[7] 孙玲，张小华，于生兰.双波长分光光度法测定阿丙沙星可溶性粉中阿莫西林、盐酸环丙沙星的含量[J].化学分析计量，2004,13(1) :16-29

[8] 徐燕，邵家德.双波长分光光度法测定枳芩合剂中黄芩总黄酮的含量[J].中国药事，1997,11(4):250-251.

[9] 全红，白小红，杨雪.双波长分光光度法测定曲克芦丁和微量芦丁的含量[J].山西医科大学学报.2005,36(5):592-594.

[10] 罗东，马文秀，刘松青.双波长分光光度法测定栓剂中甲硝唑、诺氟沙星的含量[J].中国医院药学杂志，1996,16(1) :22-46.