刘海斌, 刘海珍, 陈 亮, 李亚琪, 张立永, 赵月平
(1.河北北方学院牧业研究所,河北张家口 075000;2.阳原县农牧局,河北阳原 075800)
坝上长尾鸡作为地方蛋肉兼用型品种目前群体数量较少,大多集中在张家口和承德地区,为农村放牧零星饲养,未形成规模,数量逐渐减少,其主要品种特征是尾羽较长,公鸡有2~3根大翘尾,大约长45 cm,最长的有时可达60多 厘米,一般6~7月龄达到性成熟(李枝隆等,1965)。性成熟晚导致公鸡的利用率较低,是造成种质流失的重要原因之一。研究表明,中草药含有多种有效成分,可显著影响下丘脑—垂体—性腺轴功能,通过受体功能调节神经内分泌,促进性腺发育和性激素分泌,从而促进性成熟(马红霞等,2009)。本试验研究适宜中草药组方对坝上长尾公鸡性成熟的影响,以期为中草药添加剂的开发利用,解决坝上长尾公鸡性成熟期长、繁殖率低的难题,促进坝上长尾鸡养殖业的发展提供参考。
1.1 中草药组方及用法 将黄芪、当归、淫羊藿、枸杞子、熟地、杜仲、赤芍等中草药按一定比例磨碎混匀,按1%的比例添加在日粮中。
1.2 分组与饲养 选取体重基本一致、健康的110日龄坝上长尾公鸡30只,随机分为2组,每组设3个重复,每个重复5只鸡。三阶梯笼养,自由采食和饮水,光照13 h,室内温度保持18~25℃。
1.3 睾丸切片的制作和观察 分别于110、120、130日龄每组取公鸡2只空腹宰杀,快速取出睾丸,固定于10%甲醛溶液中,制作睾丸组织切片,HE染色,观察睾丸组织学变化 。
1.4 激素水平的测定 分别于120、130日龄采血,制备血浆,采用放射免疫法测定睾酮(T)、促卵泡素(FSH)和促黄体素(LH)激素水平。
1.5 统计分析 试验数据用SPSS 17.0统计软件进行统计分析。
2.1 睾丸曲细精管组织变化 由表1可知,对照组坝上长尾公鸡110日龄曲细精管直径为(103.32±3.64)μm,管腔空洞,管腔液较少,精原细胞单层排列,靠近基膜,出现较多的初级精母细胞和次级精母细胞,精子细胞较少,无精子产生;120日龄曲细精管直径为(111.80±2.92)μm,精原细胞增多,产生大量的次级精母细胞和精子细胞,且聚集在管腔中央,无精子产生;130日龄曲细精管直径达到(126.80±4.60)μm,可见有大量的初级精母细胞和次级精母细胞,精子细胞大量增殖,集中于管腔,可见有少量精子产生,且游离于管腔。试验组坝上长尾公鸡110日龄睾丸曲细精管直径比对照组长1.22%,但差异不显著(P>0.05),管腔中有管腔液,精原细胞排列整齐,靠近基膜,出现较多的初级精母细胞和次级精母细胞,精子细胞较少,无精子产生;120日龄曲细精管管径变粗,管腔直径比试验组长18.78%(P<0.01),初级精母细胞增多,且移向管腔中央,产生大量的次级精母细胞和精子细胞,可见少量精子产生;130日龄曲细精管迅速增粗,管腔直径比对照组长16.25%(P<0.01),产生大量的初级精母细胞和次级精母细胞,精子细胞随处可见,精子存满管腔中央,基膜上除了有精原细胞和支持细胞外,还附有少量的初级精母细胞和精细胞。
表1 中草药添加剂对公鸡睾丸曲细精管直径的影响 μm
2.2 中草药对坝上长尾鸡公鸡外周血生殖激素分泌的影响 由表2可知,外周血浆LH和T含量随着青年公鸡日龄的增加而提高,FSH随日龄的增加而降低。120日龄和130日龄FSH浓度试验组比对照组分别提高79.69%(P<0.05)和24.59%(P>0.05);120日龄和130日龄T浓度试验组比对照组分别提高203.70%和178.95%(P<0.01)。
表2 中草药添加剂对坝上长尾鸡公鸡生殖激素分泌的影响
本试验表明,试验组公鸡睾丸曲精细管管径、生殖上皮细胞等组织发育明显优于对照组。公鸡睾丸曲细精管的发育过程是育成鸡达到性成熟的主要特征。伴随着曲细精管的发育,处于不同发育阶段的精细胞出现。曲细精管的管壁由复层上皮组成,其中有支持细胞和不同发育时期的生精细胞,由外向里依次是精原细胞、初级精母细胞、次级精母细胞、精子细胞和精子。精原细胞紧靠曲细精管基膜,细胞呈圆球形,或椭圆形,着色深;初级精母细胞体积大于精原细胞,细胞呈圆球形,位于精原细胞的内侧;次级精母细胞体积较小,胞核圆形,着色较深,但较少见。精子细胞靠近腔面,体积小,圆形,核着色深。精子呈杆状,着色深,位于管腔面或靠近基膜外的生精细胞之间。睾丸的发育和促性腺激素的分泌活动具有一定的相关性,性成熟期,精原细胞在家禽睾丸内曲细精管中分裂增殖,最终形成精子(Decuypere 和 Scanes,1983)。
精子的发生受下丘脑—垂体—睾丸轴的调控。丘脑下部分泌促性腺激素释放激素(GnRH)作用于垂体,刺激FSH及LH的分泌,FSH作用于睾丸组织的生精细胞和支持细胞,启动精原细胞分裂增殖,并刺激精母细胞的发育。LH与睾丸间质细胞上的LH受体结合,促进睾丸间质细胞合成及分泌T(张庆茹,2007)。T的增加促进精子发育成熟,并促进公鸡第二性征的出现。本研究结果表明,试验组坝上长尾公鸡外周血浆FSH、LH和T浓度均高于对照组,说明中草药作用于公鸡的腺垂体和睾丸组织,促进腺垂体分泌LH和FSH,提高睾丸支持细胞分泌T的能力。熟地、杜仲等中草药含有锌、铜、铁、钾、钙等微量元素,这些营养成分在一定程度上能促进性腺的发育 (李炳如和佘运初,1984)。林春驿(2005)在公鸡日粮中添加2%用黄芪、党参、淫羊藿、菟丝子、蛇床子、甘草等中草药组成的饲料添加剂,结果试验组体重、睾丸重量、精液生成时间、精液品质与对照组相比差异显著。秦绪光等(2006)在后期种公鸡日粮中添加由淫羊藿、补骨脂、茯苓、牡丹皮、泽泻、甘草、肉桂、黄芪等组成的中草药,能显著提高种公鸡的精液量和精子活力,以及血浆中睾酮、促黄体素、促卵泡素浓度,降低精子畸形率。血浆T浓度与血浆LH、FSH浓度呈显著正相关。
公鸡一般12周龄就具有精细胞,具有成熟的精子,但是,坝上长尾鸡生长在寒冷的坝上地区,经过多年对环境的适应,生长速度较慢,性成熟较晚,因此,精子的形成也相对较晚,表现在110日龄精子还没有发育成熟。因此,添加该中草药能够改变下丘脑—垂体—性腺轴功能,从而促进性腺发育,有利于坝上长尾鸡性成熟。
本试验结果表明,黄芪、淫羊藿、杜仲等组成的中草药组方能够促进坝上长尾公鸡睾丸发育和生殖激素分泌,从而促进其性成熟。
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