熊胆粉与家禽胆粉中氨基酸和微量元素的比较分析

李 菲， 王伯初， 祝连彩

（重庆大学生物工程学院，生物流变科学与技术教育部重点实验室，重庆400044）

熊胆粉与家禽胆粉中氨基酸和微量元素的比较分析

李 菲， 王伯初*， 祝连彩

（重庆大学生物工程学院，生物流变科学与技术教育部重点实验室，重庆400044）

目的 分别测定熊胆粉与鸡胆粉、鸭胆粉、鹅胆粉中氨基酸及微量元素的含有量，并进行比较分析。方法 将新鲜的动物胆汁制备成胆粉，再分别用氨基酸分析仪和原子吸收分光光度计测定其中的氨基酸和微量元素。结果 5类胆粉中游离氨基酸的含有量均较低，水解氨基酸的含有量依次为熊胆粉＜肉鸡胆粉＜乌鸡胆粉＜鹅胆粉＜鸭胆粉，其中熊胆粉为29.16 mg/g，而鹅胆粉为149.87 mg/g。它们均含有18种中无机元素，其中Ca、Na、P、K、Mg的含有量相对较高，而且其在熊胆粉中的含有量明显低于其他家禽胆粉。结论 本实验可为从家禽胆粉中寻找熊胆粉替代品提供了一定的理论依据。

氨基酸；微量元素；熊胆粉；鸡胆粉；鸭胆粉；鹅胆粉

熊胆是传统名贵中药［1-2］，《本草纲目》记载，熊胆味苦，性寒，归肝、胆、心经，无毒，能清热、平肝、利胆、明目、杀虫。熊胆粉是黑熊Selenretos thibetanus Cuvier的引流胆汁干燥品［3-4］；鸡胆味苦，性寒，主治百日咳、慢性支气管炎、中耳炎、痔疮等，在临床上已有应用［5-8］；鸭胆与鸡胆相似［5］，主含牛磺鹅去氧胆酸 （TCDCA）［7］，有利胆、溶解胆结石，促进脂肪消化吸收、止咳祛痰平喘、降血脂、抗高血压及抗菌等作用；鹅胆具有解热毒、治初期痔疮等功效，而从中医角度看，鹅胆和熊胆的性味相同、功效相近［9］。研究表明，动物胆汁的主要药理作用来自于胆汁酸，但是非胆汁酸成分也有着不可忽略的地位，虽然关于胆汁酸成分已有很多文献报道，但鲜有对非胆汁酸成分的研究。人们发现，氨基酸和微量元素在中药药效中起到一定作用［10-12］，但不同动物胆粉中其研究报道很少。本实验对熊胆粉、鸡胆粉、鸭胆粉、鹅胆粉中氨基酸和微量元素的种类及含有量进行比较分析，为进一步探讨其药理作用、开发熊胆粉、寻找相关替代品提供参考。

1 仪器与材料

1.1 材料与试剂 乌鸡胆、肉鸡胆、鸭胆、鹅胆 （重庆白市驿禽加工厂）；熊胆粉 （四川省新野生物制药公司，批号20130411），经鉴定，均符合 《中国药典》2010年版规定。盐酸、硝酸、三氯醋酸、高氯酸等均为优级纯 （国药集团化学试剂有限公司）；水为双蒸水 （自制）。

1.2 仪器 L-8900日立氨基酸分析仪、色谱柱 （4.6 mm×60 mm，3μm）、专用离子交换树脂 （日本株式会社日立制作所）；SHMADZU AA-6300C原子吸收分光光度计，波长为570、440 nm（700 nm参比）、M15524空心阴极灯（日本岛津公司）。

2 方法

2.1 样品处理 将新鲜的乌鸡胆、肉鸡胆、鸭胆、鹅胆用75%乙醇局部消毒后，剖胆取汁，盛入不锈钢圆盆内，-40℃下冰箱冷冻24 h，再放入冷冻干燥机内干燥48 h，即得乌鸡胆粉、肉鸡胆粉、鸭胆粉、鹅胆粉，置于干燥器中保存。

2.2 氨基酸的测定

2.2.1 游离氨基酸的测定 样品中加入5%～10%三氯醋酸，超声（200W、25 KHz）10 min，7 000～10 000 r/min离心15min，澄清液用蒸溜水定量，0.45μm滤膜过滤，上机分析，重复3次，结果见表1。

2.2.2 水解氨基酸的测定 将样品置于水解管内，加入6 mol/L HCl，减压状态下封管，于110℃水解炉中加热分解22 h，减压干燥，除去HCl，加入0.02 mol/L HCl稀释定量，0.45μm过滤器过滤，上机分析，每个样品重复测定3次，结果见表2。

2.3 微量元素的测定 称取各胆粉样品约200 mg，置于10 mL比色管中，加入硝酸：高氯酸 （4：1，V/V）的消化混合酸1 mL，160℃下在恒温消化器中消化24 h至清澈液体，冷却，蒸馏水定容，上机分析，每个样品重复测定3次，结果见表3。

3 结果

3.1 氨基酸测定 熊胆粉与乌鸡胆粉、肉鸡胆粉、鸭胆粉、鹅胆粉所含氨基酸的种类一致，均为17种。其中，游离状态氨基酸的含有量均较低，依次为熊胆粉（0.107 g/100 g）＜肉鸡胆粉（0.499 g/100 g）＜乌鸡胆粉（1.029 g/100 g）＜鹅胆粉（1.738 g/100 g）＜鸭胆粉（1.908 g/100 g），熊胆

粉中仅存在痕量的酪氨酸、谷氨酸，鸭胆粉中其含有量最高，鹅胆粉次之，而且主要为精氨酸、苯丙氨酸、谷氨酸、丙氨酸。另外，肉鸡胆粉中游离氨基酸的含有量低于乌鸡胆粉，这也是乌鸡营养价值高于肉鸡的原因之一。

表1 游离氨基酸测定结果（n=3）

表2 水解氨基酸测定结果（n=3）

表3 微量元素测定结果（n=3）

从水解氨基酸的总量来看，熊胆粉（2.916 g/100 g）＜肉鸡胆粉（10.802 g/100 g）＜乌鸡胆粉（10.842 g/100 g）＜鸭胆粉（11.953 g/100 g）＜鹅胆粉（14.987 g/100 g）。其中，熊胆粉中主要为胱氨酸、天冬氨酸、谷氨酸、丝氨酸、亮氨酸；肉鸡胆粉和乌鸡胆粉中水解氨基酸的含有量和种类均相似，无显著性差异；鹅胆粉中谷氨酸、亮氨酸、天冬氨酸、丙氨酸的含有量较高；鸭胆粉中以丙氨酸、谷氨酸、天冬氨酸、精氨酸为主。

3.2 微量元素测定 熊胆粉、乌鸡胆粉、肉鸡胆粉、鸭胆粉、鹅胆粉中均包含了18种微量元素，包括具有生物活性的必需元素Ca、Na、P、K、Mg，必需微量元素Fe、Cu、Zn、Mn、Cr、Co、Ni，非必需和有害微量元素Pb、Cd、Be、Pr、Sr、Ba。其中，熊胆粉中以K（174.336 mg/kg）含有量最高，P、Ca、Na次之，有害金属元素Pb、Cd、Be、Pr、Sr、Ba最低，而且明显低于其他几种胆粉样品；乌鸡胆粉中含有丰富的P、K、Ca（276.432、219.091、116.11 mg/kg），而且明显高于鸭胆粉、鹅胆粉、熊胆粉；肉鸡胆粉中微量元素的含有量与乌鸡胆粉较接近，Ca、P、Mg、Zn略低于乌鸡胆粉，K（171.587 mg/kg）远低于乌鸡胆粉，有害微量元素Pb、Cd、Be、Pr、Sr、Ba高于乌鸡胆粉，所以乌鸡的营养价值比肉鸡高；鸭胆粉以K（248.573 mg/kg）含有量最高，P（165.461 mg/kg）次之；鹅胆粉K（291.193 mg/kg）的含有量高于其他几种胆粉样品，Zn（24.649 mg/kg）远远高于乌鸡胆粉、肉鸡胆粉、鸭胆粉、熊胆粉。综上所述，熊胆粉中微量元素的含有量明显低于其他几种胆粉样品，乌鸡胆粉、肉鸡胆粉、鸭胆粉、鹅胆粉微量元素的种类与含有量较接近，而有害金属元素Pb、Cd、Be、Pr、Sr、Ba明显高于熊胆粉，但都低于 《中国药典》对中药重金属含有量的限定标准。

4 结论

熊胆粉是传统名贵中药，近年来由于其在肝病、流感、眼疾治疗中的效果得到越来越多的临床确认，故需求远大于供应，寻找天然熊胆粉的替代品已成为必然。鸡胆、鸭胆、鹅胆自古也是入药成分，并且相对于其他动物胆汁更容易获得，同时提供量也很大。本实验通过对熊胆粉、鸡胆粉、鸭胆粉、鹅胆粉中氨基酸和微量元素的种类和含有量进行测定和对比分析，可为进一步开发利用鸡胆粉、鸭胆粉、鹅胆粉打下了理论基础，也为从家禽胆粉中寻找熊胆粉的替代品提供了科学依据。

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R284.1

B

1001-1528（2015）11-2555-04

10.3969/j.issn.1001-1528.2015.11.052

2014-07-14

国家新药创制重大专项 （2014ZX09301306-007）

李 菲（1989—），女，硕士，研究方向为天然药物基础成分分析。Tel：18875039891，E-mail：lifei_lucky@163.com

*通信作者：王伯初（1962—），男，教授，研究方向为生物制药工程和天然药物。Tel：（023）65112840，E-mail：wangbc2000@126.com