武昌鱼脂肪酸的气相色谱-质谱分析

刁全平，侯冬岩，郭华，洪学莲，回瑞华

(鞍山师范学院化学与生命科学学院，辽宁鞍山114007)

武昌鱼(M．amblycephala Yih)，属鲤形目，鲤科，鲌亚科，鲂属，主产于长江中下游，以湖北为最多，多产在5～8月．武昌鱼体扁侧，呈菱形，背色深，腹色浅．武昌鱼肉细嫩肥美，具有补虚、益脾、养血、祛风、健胃之功效，可以预防贫血症、低血糖、高血压和动脉血管硬化等疾病．

目前关于武昌鱼繁育养殖及加工生产方面的研究较多，而有关有效化学活性成分的研究较少，李阳等对武昌鱼的挥发性成分进行了分析［1］．本文采用Bligh-Dyer提取法提取武昌鱼中的脂肪油［2］，然后进行甲酯化处理，再利用GC-MS对其进行分析测定［3］，分离鉴定其中的脂肪酸成分，并测定其含量，寻求其成分与功效之间的关系，为武昌鱼的进一步深度开发提供一定的支持．

1 材料与方法

1．1 材料与试剂

武昌鱼购自鞍山大润发超市，氯仿、甲醇、氢氧化钾、正己烷、硫酸钠等均为分析纯，水为自制二次蒸馏水．

1．2 仪器与设备

HP6890GC/5973MS型气相色谱-质谱联用仪(美国惠普公司);RE-52C型旋转蒸发器(上海亚荣生化仪器厂);85-1型恒温磁力搅拌器(常州国华电器有限公司);80-2B台式离心机(上海安亭科学仪器厂);KQ-250B型超声波清洗器(昆山市超声仪器有限公司)．

1．3 方法

1．3．1 脂肪油的提取 取武昌鱼一条，用剪刀从其背部取样，剪碎后，用四分法称取样品14．05 g置于250 mL锥形瓶中，加入氯仿140 mL，甲醇70 mL，再加入生理盐水42 mL，磁力搅拌器搅拌20 h，抽滤，分液，取下层有机相，旋转蒸发回收氯仿，得黄色油状液体2．03 g．

1．3．2 脂肪油的甲酯化 用8 mL正己烷将鱼油溶解，加入2 mL浓度为0．5 mol/L的氢氧化钾-甲醇溶液在70℃水浴中回流20min，冷却后加入10mL蒸馏水，超声振荡5min，然后以3 000 r/min离心10 min，取上层正己烷溶液用无水硫酸钠干燥后，待GC/MS分析备用．

1．3．3 脂肪酸的分析鉴定

色谱条件:色谱柱为HP-5弹性石英毛细管柱(25 m×0．20 mm×0．33μm);进样口温度300℃;

程序升温:100℃→200℃升温速率为10℃/min，200℃→280℃升温速率为5℃/min，280℃保持5 min．;分流比 100 ∶1，溶剂延迟 3 min．

质谱条件:全扫描，四级杆质量分析器，扫描范围为20～500 m/z;离子源为电子轰击源，离子源温度为230℃;电离电压为70 eV;电子倍增器电压为1 988 V;发射电流为34．6μA;接口温度为230℃．

定性分析:取经1．3．2项处理过的样品0．4μL，用GC/MS进行分析鉴定．通过G1701BA化学工作站数据处理系统，检索NIST98谱图库，确定样品中各个化学成分．

定量分析:通过G1701 BA化学工作站数据处理系统，按峰面积归一化法进行定量分析，分别求得各化学成分的相对百分含量:

2 结果与讨论

2．1 武昌鱼脂肪酸甲酯总离子流谱图

按照步骤1．3．3进行实验，得武昌鱼脂肪酸甲酯总离子流谱图如图1所示，并将样品中的脂肪酸种类及其相对百分含量列于表1．

表1 武昌鱼脂肪油中脂肪酸(以酯表示)的组成及相对含量

对表1进行分析，从武昌鱼中鉴定出14种脂肪酸，其中饱和脂肪酸5种，相对百分含量占总检出量的28．46%;不饱和脂肪酸9种，相对百分含量占总检出量的71．27%．

十六碳烷酸(棕榈酸)具有一定的提高血清胆固醇作用，弱于月桂酸，强于油酸［4］，在武昌鱼中含量较高，为18．05%．9-十六碳烯酸(棕榈油酸)具有预防老年人心脑血管疾病等功能［5］，武昌鱼中含量为4．38%．9-十八碳烯酸(油酸)为低血脂性脂肪酸，有降低胆固醇和低密度脂蛋白的作用［6］，是一种良性脂肪酸，在武昌鱼中的含量为28．12%．9，12-十八碳二烯酸(亚油酸)能降低血液胆固醇，预防动脉粥样硬化，人体不能合成亚油酸，必须通过食物摄入，武昌鱼中含量为21．07%．5，8，11，14，17-二十碳五烯酸(EPA)和4，7，10，13，16，19-二十二碳六烯酸(DHA)被称为“脑黄金”，能够对心脑血管疾病起到预防作用［7］，武昌鱼中含量分别为 3．21%和 7．23%．

2．2 讨论

对样品脂肪酸的提取中，通常采用索氏提取法［8］，笔者认为不饱和脂肪酸特别是多不饱和脂肪酸化学性质不稳定，索氏提取温度较高，容易使脂肪酸变性．本文采用Bligh-Dyer法在室温下对武昌鱼中脂肪油进行提取，尽量避免不饱和脂肪酸在提取过程中发生变性，提高武昌鱼中脂肪酸分析的准确度．武昌鱼中的脂肪酸组成丰富，不饱和脂肪酸含量高，具有预防心血管病等疾病的功效，具有很高的药用价值，本文的研究为武昌鱼资源的进一步开发提供一定的依据．

［1］李阳，汪超，胡建中，等．武昌鱼中挥发性成分的HS-SPME和GC-MS分析［J］．湖北农业科学，2014，53(4):907－912．

［2］刘安军，杨书文，曹东旭，等．两种鱼中各部位脂肪酸的GC分析［J］．天津科技大学学报，2007，1:3－7．

［3］回瑞华，侯冬岩，李铁纯，等．棉籽油中脂肪酸不同的酯化方法与气相色谱-质谱分析［J］．质谱学报，2005，26(2):90－92．

［4］森．月桂酸，棕榈酸．油酸对胆固醇影响比较［J］．粮食与油脂，1998，12(4):56－56．

［5］王维群．营养学［M］．北京:高等教育出版社，2005．

［6］徐华顺，罗玉萍，李思光．产棕榈油酸酵母发酵条件的研究［J］．中国油脂，1999，24(6):53－55．

［7］陈丽花，肖作兵，周培根．中国对虾的脂肪酸分析及其营养价值评价［J］．上海海洋大学学报，2010，19(1):125－129．

［8］邢晓燕，回瑞华，侯冬岩，等．几种稻米中脂肪酸的研究［J］．鞍山师范学院学报，2006，8(4):43－45．