山东和河北部分地区四种猪病的血清学调查

李晓林，王相芹，刘杉杉，刘　阳，李明义

（山东信得科技股份有限公司，山东青岛　266061）

山东和河北部分地区四种猪病的血清学调查

李晓林，王相芹，刘杉杉，刘阳，李明义

（山东信得科技股份有限公司，山东青岛266061）

［目的］了解山东和河北部分地区猪瘟、猪繁殖与呼吸综合征、猪伪狂犬、猪圆环病毒病的发病情况。［方法］用间接ELISA方法对144个规模化养猪场的2 008份猪血清进行抗体水平检测。［结果］两省猪瘟、猪繁殖与呼吸综合征、伪狂犬中和（gB基因）、伪狂犬病毒野毒感染（gE基因）、圆环病毒病的抗体平均阳性率分别为：89%～92%、87%、92%～95%、33%～40%和76%。各阶段猪群的猪瘟、猪繁殖与呼吸综合征、猪伪狂犬中和（gB基因）抗体阳性率普遍较高，都在80%以上；伪狂犬野毒（gE基因）抗体阳性率在14%～90%之间，其中流产母猪的抗体阳性率最高，为90%；1～4周的仔猪圆环抗体阳性率为76%（152/199），4～10周的保育猪的抗体阳性率最低，为67%（327/489）。［结论］这四种猪病的抗体阳性率较高，免疫猪基本能得到保护，但在个别猪场仍有发病，可能与免疫失败、新流行毒株的出现、继发感染等因素有关。提示各大猪场要针对实际情况，制定出严格的综合性防控措施。

规模化猪场；猪瘟；猪繁殖与呼吸综合征；猪伪狂犬；圆环病毒病；血清学检测；间接ELISA

近年来，由于我国的养猪规模和数量不断扩张、饲养密度日益增大，加之生产周转加快、健康养殖技术滞后等原因，造成部分地区多种猪病流行，尤其是病毒性传染病。此类疾病的特点是传播速度快、流行地区广、危害性大。针对上述情况，2013年12月至2015年5月，选取了我国北方地区有代表性的山东省和河北省的144个规模化猪场进行了流行病学调查与统计分析。由于抗体水平是反映猪群感染状态或免疫状态的重要指针［1］，我们从各猪场按10%～20%的比例随机采集不同日龄段猪的血样，进行猪瘟、猪繁殖与呼吸综合征、猪伪狂犬、猪圆环病毒病的抗体检测，以便了解河北和山东部分地区规模化养猪场这四种猪病免疫效果和感染状况，为净化猪场和控制疾病的蔓延提供依据。

1　材料与方法

1.1样本采集

从144个猪场共采集猪血清2 008份（仔猪199份、育肥猪489份、保育猪255份、后备公猪92份、后备母猪277份、妊娠母猪327份、断奶母猪248份、流产母猪121份），主要来自河北省的保定、邢台、衡水、邯郸、唐山等市以及山东省的潍坊、临沂、烟台、威海、聊城、青岛、淄博等市。

1.2检测用试剂

猪瘟、猪繁殖与呼吸综合征、猪伪狂犬 ELISA抗体检测试剂盒购自北京爱德士元亨生物科技有限公司；猪圆环病毒病ELISA抗体检测试剂盒购自深圳市康百德生物科技有限公司。

1.3检测方法

1.3.1血清的制备。按照常规方法从前腔静脉或耳静脉采血，每头猪4～5ml，置入4℃冰箱过夜或37℃培养箱2h，待淡黄色血清析出后，1 500r/min离心10min，取上清于灭菌的离心管，置于4℃或-20℃保存备用。

1.3.2ELISA检测。采用间接ELISA方法，根据试剂盒说明书进行操作，将待检猪瘟、猪繁殖与呼吸综合征、圆环病毒病的血清按1∶40倍稀释，伪狂犬病的血清按1∶2倍稀释。根据说明书进行结果判定。

2　检测结果

2.1两省情况比较

检测伪狂犬病毒gB基因和gE基因抗体是为了区别免疫抗体水平与伪狂犬病野毒感染（采样猪场均采用伪狂犬gE基因缺失活疫苗免疫），从表1、表2可知，河北省和山东省伪狂犬（gB基因）中和抗体平均阳性率都最高，平均为92%（563/611）和95%（1 329/1 397），二者差异不显著（P＞0.05）；两省的伪狂犬病野毒（gE基因）抗体阳性率较低，平均为33%（204/611）和40%（559/1 397），检出204头和559头野毒抗体阳性猪，二者差异显著（P＜0.05）；猪瘟平均抗体阳性率为92%（561/611）和89%（1 247/1 397），二者差异不显著（P＞0.05）；猪繁殖与呼吸综合征和圆环病毒病两省的平均抗体阳性率相同，分别为87%和76%，差异不显著（P＞0.05）。

表1　河北部分地区猪病血清学抗体检测结果

表2　山东部分地区猪病血清学抗体检测结果

表3　各阶段猪群猪病血清学抗体检测结果

2.2不同阶段猪群抗体阳性率情况

从表3可知，各阶段猪群的猪瘟、猪繁殖与呼吸综合征、猪伪狂犬中和（gB基因）抗体阳性率普遍较高，都在80%以上；不同阶段的猪群都存在伪狂犬野毒（gE基因）感染的现象，抗体阳性率在14%～90%之间，两省共检出gE基因抗体阳性血清763份，阳性率为38%，其中流产母猪的抗体阳性率最高，为90%；1～4周的仔猪圆环抗体阳性率为76%（152/199），4～10周的保育猪的抗体阳性率最低，为67%（327/489）。

3　讨论与结论

3.1对2008份猪血清四种病检测结果显示，每一种病的抗体阳性率在两省之间差异不大，说明这些猪场在疾病流行程度、疫苗免疫效果和感染状况具有相同或相近的规律。表3中的结果显示，圆环抗体阳性率具有一定的规律，随着周龄的增长，抗体阳性率先下降后上升，这与郎洪武、宋建国、林琳等［2-4］报道的结果相似。仔猪的抗体阳性率比保育猪高，因为仔猪通过初乳获得的母源抗体较高；断奶后，仔猪的母源抗体随着日龄的增长不断被消耗，到达保育猪阶段，血清阳性率最低，此时易导致猪群发生感染，到了后期的育肥阶段，抗体阳性率又慢慢升高［5］。大于20周的成年猪抗体水平随着日龄的增长而升高，一直达到稳定的抗体水平。流产母猪的抗体阳性率相对较低，平均为73%（88/121），可能是因为疫苗效果不佳、免疫时期不恰当、处于疾病流行期、机体抵抗能力差等因素。

3.2表2中的结果显示，山东的伪狂犬病野毒（gE基因）抗体阳性率在2013年12月至2014年2月的检出率最低，未检测出野毒阳性猪，3月至5月检出的阳性率也很低，仅为6%（9/155），说明这一时间段伪狂犬病疫苗免疫效果最好，而且猪场安全卫生防护工作做得最好。流产母猪的伪狂犬病野毒（gE基因）抗体阳性率最高，高达90%，说明妊娠母猪流产的主要原因是感染了伪狂犬病毒；另一方面，可能有其他不确定因素造成母猪流产，流产之后的母猪免疫力差，共济失调，致使伪狂犬病病毒趁虚而入，发生感染。猪场应及时淘汰伪狂犬野毒抗体阳性猪，达到全面净化猪场和控制疾病的扩散的目的。

3.3从血清检测结果上来看，猪瘟、猪繁殖与呼吸综合征、猪伪狂犬病（gB基因）、圆环病毒病猪的抗体阳性率较高，基本能保护猪群免受病毒侵袭，但个别猪场仍暴发疾病。从临床症状和剖检结果上来看，可能与疫苗免疫失败、新流行毒株的出现、继发感染、免疫抑制等因素有关。建议猪场养殖人员在疫病防控方面，不但要从抗体水平高低方面考虑，还要根据规模化猪场的实际情况，选用合适的疫苗。

3.4各猪场对疑似病例应该及时隔离淘汰［6-7］，防止并发症的发生，特别是伪狂犬野毒感染和圆环病原的感染都可以侵害猪群的免疫系统，导致猪群出现免疫抑制，使得其他病原的继发性感染变得更加容易，给养猪业造成巨大的经济损失［8-9］。应针对各大猪场的实际情况，制定出严格的综合性防控措施。定期给各日龄段的猪群免疫是预防疾病的主要参考文献：

手段，另外，搞好饲养管理与卫生消毒工作，能增强猪群的抗病能力。要防止疫病的发生和传播，加大流行病学调查的研究力度，加强猪群疾病检测，做到及时诊断治疗。

［1］Alblna E， Madec F， Cariolet R， et al. Immune response and persistence of the porcine reproductive and respiratory syndrome virus in infected pigs and farm units ［J］. Vet Rec，1994，134（27）：567-573.

［2］郎洪武，张广川，吴发权，等.断奶猪多系统衰弱综合征血清抗体检测［ J］.中国兽医科技，2000，30（3）：3-5.

［3］宋建国，高生智，魏润生.规模化猪场猪圆环病毒2型感染的血清学调查［J］.中国兽医科技，2004，34（12）：26-27.

［4］林琳，江斌，吴胜会，等.2004年福建省部分地区猪圆环病毒病血清学调查［J］.福建畜牧兽医，2005，27（3）：19-20.

［5］赵津， 张小敏， 周斌， 等. 2008～2010年华东部分地区猪圆环病毒2型感染血清学调查［J］.中国动物传染病学报， 2010，18（6）：49-52

［6］王海霞，郑素君，卢黎明，等.猪圆环病毒病的流行病学与防控措施［ J］.浙江畜牧兽医，2006，26（4）：10-11.

［7］甘晓峰.猪圆环病病毒防制技术［ J］.疫病防制，2010，35（7）：24-25.

［8］Calsamiglia M， Segales J， Quintana J， et al. Detection of porcine circovirus type 1 and 2 in serum and tissue samples of pigs with and without postweaning multisystemic wasting syndrome［J］.J Clin Microbiol，2002，40（6）：1848-1850.

［9］Chianini F，Majo N，Segales J，et al. Immunohistochemical characterization of PCV2 associate lesions in lymphoid and non-lymphoid tissues of pigs with natural postweaning multisystemic wasting syndrome（PMWS）［J］.Vet Immunol Immunopathol，2003，94（6）：63-75.

（责任编辑：王伟涛）

Serological Investigation and Analysis of Four Swine Viral Diseases in Large-scale Swine Farms in Parts of Shandong and Hebei Provinces

Li Xiaolin， Wang Xiangqin， Liu Shanshan， Liu Yang， Li Mingyi
（Shandong Sinder Technology Co.，Ltd.，Qingdao，Shandong，266061）

［Objective］ In order to obtain a primary understanding of classical swine fever， porcine reproductive and respiratory syndrome virus（PRRSV）， peudorabies and porcine circovirus antibody status in large-scale swine farms in parts of Shandong and Hebei provinces. ［Methods］ 2 008 swine sera samples from 144 large-scale farms were examined with indirect ELISAs for antibodies to the 4 mentioned viral diseases. ［Results］ The average positive rate of CSFV antibody was 89%～92%， the average positive rate of PRRSV antibody was 87%， the average positive rate of the PRV neutralizing antibody（gB gene） was 92%～95%， the average positive rate of the wild PRV antibody（gE gene）was 33%～40%， and the average positive rate of the PCV antibody was 76%. ［Conclusion］ The antibody positive rates of the 4 swine diseases were high， which could basically protect the herd from virus infection， but these diseases occurred in few individual farms. This was possibly due to vaccination failure， emergence of new endemic strains and secondly infections， suggesting that the swine farms should formulate strict and integrated control measures according to their actual conditions.

large-scale swine farm；classical swine fever；porcine reproductive and respiratory syndrome；peudorabies；porcine circovirus；serological detection；indirect ELISA

S852.5+3

B

1005-944X（2015）09-0004-04

王相芹