三七中五氯硝基苯残留检测方法研究

曾鸿超，张文斌，赵爱，马妮，杨莉，冯光泉

（文山学院 文山三七研究院，云南 文山 663099）

三七中五氯硝基苯残留检测方法研究

曾鸿超，张文斌，赵爱，马妮，杨莉，冯光泉

（文山学院 文山三七研究院，云南 文山 663099）

为了检测三七中五氯硝基苯残留的情况，分别采用正己烷提取，预处理柱净化；石油醚提取，浓硫酸磺化净化作为样品的前处理方法。对两种前处理试验方法进行对比，发现在以石油醚为提取溶剂条件下，采用浓硫酸磺化净化处理较为理想，其平均回收率为93.7%，RSD值为2.97%。

五氯硝基苯；三七；残留

三七［ Panax notoginseng（Bruk）F.H.Chen ］为五加科人参属植物，是我国传统的名贵中药材，也是文山乃至云南的一大优势和特色生物资源。三七具有止血补血、活血化瘀、消肿定痛之功效，已有600多年的应用历史。目前，全国有1302个制药企业以三七为原料生产药品，含有三七的国药准字号中成药制剂3207个，药品品种324个，进入国家中药保护品种的有20余个，包括：血塞通、血栓通、复方丹参片、片仔癀等，每年市场销售额达50亿元以上。因此，三七的生产水平直接影响着我国现代医药和健康产业的发展水平。中药材种植过程中的病虫害防治，严重依赖化学农药的使用，农户多凭经验或农药店推荐用药，缺失来自政府及企业的专业指引和监管。五氯硝基苯属有机氯农药的一种，又名土壤散，不溶于水，易溶于有机溶剂，化学性质稳定，不易分解，残效期长［1］，是三七栽培过程中使用的土壤消毒剂，也用于种子和移栽苗的杀菌处理，主要防治由尖孢镰刀菌及茄丝核菌等病菌所引起的植物病害。由于五氯硝基苯价格便宜，药效高，近年来在三七栽培中广泛使用，导致三七和土壤中五氯硝基苯的残留量较高，严重影响了三七质量。

1　材料和方法

1.1材料

三年生三七干燥主根，粉碎过40目筛。

1.2仪器

岛津GC-2010气相色谱仪（日本岛津，带ECD检测器），AS3120A超声波清洗机（天津奥特恩斯），硅镁吸附剂预处理小柱，DFT-100粉碎机（温岭林大），TDL-40B离心机（上海安亭），HZQX500C振荡器（上海一恒），HH-4恒温水浴锅（金坛盛威），R-200旋转蒸发仪（瑞士BUCHI）。

1.3试剂与药品

五氯硝基苯标准品（农业部环境保护科研监测所，100 ug/mL），无水硫酸钠，浓硫酸（优级纯），正己烷，丙酮，石油醚均为分析纯重蒸馏试剂。

1.4色谱条件

进样口温度230 ℃，检测器温度300 ℃，柱箱温度190 ℃，载气为高纯氮，不分流进样。

1.5前处理方法

方法1：称取5.0 g样品5份置于50 mL离心管中，加20 mL正己烷，振荡提取10 min，在3000 r/min条件下离心5 min，将提取液移入25 mL容量瓶中，向离心管中加5 mL正己烷，按上法再提取1次，将提取液合并，定容至25 mL。

预处理柱净化处理：先用1 mL丙酮+正己烷（1+9）分两次淋洗预处理柱，再用1 mL正己烷淋洗该柱，弃去淋洗液。将提取液5 mL过柱，收集过滤液，用3 mL丙酮+正己烷（1+9）淋洗该柱，将淋洗液合并，浓缩至1 mL，备用。

方法2：称取样品5.0 g，置于200 mL离心管中，加入40 mL石油醚，振荡提取10 min，在3000 r/min条件下离心5 min，将上清液过无水硫酸钠到150 mL浓缩瓶中，重复上述操作1次，合并提取液，于40 ℃水浴下旋转蒸发至约1 mL，用石油醚转移至25 mL刻度管中，分别用2 mL石油醚洗涤浓缩瓶5次，合并洗涤液至刻度管中。于40 ℃水浴中，氮吹浓缩并定容至5 mL，加入浓硫酸1.5 mL，加盖振荡2 min，在3000 r/min条件下离心10 min，取上清液1 mL，备用。

1.6回收率试验

取已知含量的三七样品，加入一定量的五氯硝基苯标准液，分别按方法1和方法2提取、检测，分别计算回收率与精密度。

2　结果与讨论

实验采用两种不同的前处理方法，对提取三七中五氯硝基苯效果的影响见表1。

表1　不同前处理方法对三七中五氯硝基苯添加回收率的影响（n=5）

从表1可以看出，用方法1和方法2提取三七中的五氯硝基苯的平均加标回收率分别为92.9%、93.7%，RSD值分别为3.41%、2.97%，均能满足实验需要。石油醚相对于丙酮、正己烷毒性小，易纯化，成本低，对环境及人体危害较小。

方法1用到硅镁吸附剂预处理小柱，导致检测成本较高，方法2则成本较低。在综合比较两种方法后，选择石油醚提取，浓硫酸磺化净化作为检测三七中五氯硝基苯残留量的前处理方法。

［1］ 张正尧，苗春雨.气相色谱法测定甘草、黄芪中五氯硝基苯［J］.中国卫生检验杂志，2006（9）：1060-1061.

［2］ 张文斌，冯光泉，曾鸿超，等.市售三七中五氯硝基苯的残留情况调查［J］.人参研究，2008（3）：14-16.

A Study on the Detection Method of PCNB Residue in Panax Notoginseng

ZENG Hongchao， ZHANG Wenbin， ZHAO Ai， MA Ni， YANG Li， FENG Guangquan
（Research Institute of Panax Notoginseng， Wenshan University， Wenshan Yunnan 663099， China）

To test PCNB residue in Panax Notoginseng， the experiment uses n-hexane extraction respectively，pretreatment column purification， petroleum ether extraction and purification of concentrated sulfuric acid as a sample pretreatment method. The paper discovers that the treatment of concentrated sulfuric acid is more ideal with petroleum ether as the solvent extraction， whose average recycling rate is 93.7% and RSD value is 2.97%， based on the comparison of two test methods，

Fungiclor； Panax Botoginseng； residue

S482

A

1674 - 9200（2015）06 - 0004 - 02

（责任编辑 张铁）

2015 - 03 - 19

云南省应用基础研究项目“三七中五氯硝基苯残留检测方法及分布、累积规律研究”（2011FB138）。

曾鸿超，文山学院文山三七研究院助理研究员。

冯光泉，文山学院文山三七研究院研究员，E-mail:sanqiflx@163.com。