冠心病患者微量白蛋白尿与血管内皮功能的相关性研究

廖尚宇 张志广

临床研究

冠心病患者微量白蛋白尿与血管内皮功能的相关性研究

廖尚宇 张志广

作者单位：527300 广东省云浮市，云浮市人民医院心内科

目的 探究冠心病（CHD）患者微量白蛋白尿与血管内皮功能的相关性。方法 选取2013年6月至2014年10月我院住院CHD患者150例，依据患者Gensini积分四分位间距将患者分为4组：A组（3～19分）36例、B组（19～34分）39例、C组（34～58分）35例和D组（58～150分）40例；同时选择同期住院，行冠脉造影结果为阴性的40例患者为对照组。采用放射免疫分析法测定患者血管内皮素-1（ET-1）、血管紧张素Ⅱ（AngⅡ）的浓度，酶联免疫吸附法测定血管内皮生长因子（VEGF）、超敏C反应蛋白（hs-CRP）的浓度，采用免疫透射比浊法和氧化酶法测定尿微量白蛋白和尿肌酐的浓度，并计算其比值白蛋白/肌酐浓度值（UACR）。结果 五组间比较显示，UACR、ET-1、AngⅡ、VEGF及hs-CRP值不完全相等，差异有统计学意义（F=87.313、34.312、37.931、354.215、63.214，P<0.05）；两两比较显示，D 组各指标均高于其他四组，C 组高于A、B组及对照组，B组高于A组和对照组，差异均有统计学意义（P<0.05）；A组与对照组比较，未见统计学差 异 （P>0.05）。UACR 与 AngⅡ 、ET-1、VEGF、hs-CRP均 呈 正 相 关 ， 相 关 系 数 分 别 为 （r=0.312，0.209，0.517，0.414；P<0.05）。结论 AngⅡ、ET-1、VEGF、hs-CRP 可反映血管内皮功能，UACR 水平可用于对CHD患者血管内皮功能的评估。

冠状动脉疾病； 微量白蛋白尿； 血管内皮功能

随着人们行为生活方式改变,慢性疾病的发生呈现逐年上升的趋势[1,2]。心血管疾病作为一种慢性病在我国的发病率和死亡率居高不下，其中冠心病（CHD）在心血管病死亡率中位于第一位[3]。如何早期发现、早期干预心血管病的高危人群，是心血管内科不断努力的方向。已证实，内皮细胞分泌的内皮素-1（ET-1）、血管紧张素-Ⅱ（AngⅡ）、血管内皮生长因子（VEGF）、高敏C反应蛋白（hs-CRP）等参与动脉粥样硬化（AS）的形成及病理过程，是导致AS的发生的重要因素[4]。研究显示，微量白蛋白尿与冠心病事件的危险性和总病死率相关，因此，尿微量白蛋白测定可用作临床简单、快速、非损伤性的检测方法对冠心病进行检测[5]。目前国际通常采用随机尿微量白蛋白与肌酐比值（UACR）来测量临床微量白蛋白尿（MAU）排泄变化情况。因此，本研究对 UACR 与血清中 ET-1、AngⅡ、VEGF、hs-CRP反映血管内皮功能的生物标记物的相关性进行研究，为临床实践提供依据。

1 对象与方法

1.1 研究对象 选取2013年6月至2014年10月我院住院CHD患者150例，年龄38～75（58.12±7.42）岁，采用Gensini评分，确定冠状动脉粥样硬化的严重程度。依据患者Gensini积分四分位间距分为 A 组（3～19分）36例、B组（19～34分）39例、C组（34～58分）35例和 D 组（58～150分）40例；选取同期住院，冠脉造影结果为阴性的40例患者为对照组，年龄 40～75（58.31±8.16）岁。排除标准：患有肝肾疾病、甲状腺疾病、血液病、炎症性疾病者；患有瓣膜性心脏病、严重心脏传导疾患、心力衰竭或严重心律失常者；既往有心肌梗死病史者；既往进行血运重建、合并全身免疫性疾病及其他严重合并症者；所有纳入对象均知情同意，并配合完成课题项目。

1.2 标本收集 所有研究者入院24 h，取常规随机中段尿液2份各5 ml，分别检测MAU及尿肌酐（Ucr）浓度。分别取肘静脉血2份，每份5 ml置于促凝管，放于4℃冰箱2 h后，在3000 rpm状态下离心10 min，分离血清。其中一份即刻采用放射免疫分析法（RIA）测定ET-1、AngⅡ；另一份血清处理好后置于-80℃冰箱内保存，日后统一采用酶联免疫吸附法（ELISA）测定VEGF和hs-CRP。

1.3 测量方法 尿白蛋白应用HITACHl7170全自动生化分析仪测定，试剂盒由芬兰Orion公司提供；尿肌酐测定应用HITACHl7170全自动生化分析仪，试剂盒由英国Randox公司提供，均按照说明书参数进行设置并检测，计算UACR值。采用RIA测定ET-1、AngⅡ；用HITACHl7170全自动生化分析仪，应用ELISA测定VEGF、hs-CRP。测定ET-1、AngⅡ的试剂盒由北京北方生物技术研究所提供，VEGF、hs-CRP的试剂盒由上海蓝基生物科技有限公司提供。操作步骤严格按说明书进行。

1.4 统计学方法 采用SPSS 19.0统计学软件对资料进行统计分析。计量资料采用x±s表示，多样本均数间比较采用方差分析，组内两两比较采用SNK法，计量资料资料间关联性分析采用Pearson相关；计数资料采用χ2检验。P<0.05为差异有统计学意义。

2 结果

2.1 五组患者一般情况比较 五组患者吸烟、高血压、糖尿病和冠心病家族史比较，均未见统计学差异（P>0.05），见表 1。

表1 五组患者的一般情况比较（±s）

表1 五组患者的一般情况比较（±s）

注：A 组：Gensini积分3～19分组；B组：Gensini积分19～34分组；C 组：Gensini积分 34～58分组；D组：Gensini积分58～150分组。

组别 例数 男/女 年龄（岁） 吸烟（有/无） 糖尿病（有/无） 高血压（有/无） 高心病家族史（有/无）对照组 40 22/18 58.31±8.16 19/21 8/32 19/21 14/26 A 组 36 17/19 59.22±5.41 22/14 10/26 20/16 18/18 B 组 39 20/19 58.32±6.72 25/14 13/26 23/16 19/20 C 组 35 19/16 58.92±6.32 22/13 12/23 22/13 17/18 D 组 40 18/22 57.23±6.35 23/17 15/25 27/13 22/18

2.2 五组间 UACR、ET-1、AngⅡ、VEGF 及 hs-CRP值比较 五组间UACR、ET-1、AngⅡ、VEGF及hs-CRP值比较，方差分析显示五组间UACR、ET-1、AngⅡ、VEGF及hs-CRP值不全相等，差异有统计学意义（P<0.05）；两两比较显示，D组均高于其他四组，C组高于A、B及对照组，B高于A组和对照组，差异均有统计学意义；A组与对照组间比较，未见统计学差异（P>0.05）。见表2。

2.3 UACR 与 ET-1、AngⅡ、VEGF及hs-CRP值的关联性分析 UACR与 AngⅡ、ET-1、VEGF、hs-CRP存在正相关关系，其相关系数分别为（r=0.312，0.209，0.517，0.414，P<0.05）。

表2 五组间 UACR、ET-1、All、VEGF 及 hs-CRP 值比较（±s）

表2 五组间 UACR、ET-1、All、VEGF 及 hs-CRP 值比较（±s）

注：A 组：Gensini积分 3～19分组；B组：Gensini积分19～34分组；C组：Gensini积分34～58分组；D组：Gensini积分58～150分组。UACR：尿微量白蛋白与肌酐比值；ET-1：内皮素-1；AngⅡ：血管紧张素-Ⅱ；VEGF：血管内皮生长因子；hs-CRP：高敏C反应蛋白。与对照组比较，aP<0.05；与A组比较，bP<0.05；与B组比较，cP<0.05；与C组比较，dP<0.05

组别 例数 UACR ET-1（pg/ml） AngⅡ（pg/ml） VEGF（pg/ml） hs-CRP（ng/ml）对照组 40 4.31±1.32 31.05±8.31 91.22±6.32 127.83±21.31 36.97±9.31 A 组 36 4.36±1.25 29.01±7.93 91.31±6.53 130.21±24.21 39.43±8.98 B 组 39 5.63±1.98ab 32.42±8.24ab 94.31±7.31ab 175.32±31.84ab 44.36±9.93abC 组 35 6.31±2.10abc 35.42±7.68abc 98.34±8.93abc 198.63±27.43abc 49.78±8.59abcD 组 40 8.83±1.89abcd 40.83±7.94abcd 103.74±8.67abcd 233.91±28.64abcd 57.43±9.43abcd

3 讨论

在我国心血管疾病是一种发病率和死亡率较高的慢性病，其中CHD的死亡率位于心血管疾病第一位死因顺位[6-8]。内皮细胞分泌的内皮素ET-1、AngⅡ、VEGF、hs-CRP 等参与 AS 的形成及病理过程，是导致AS的重要因素已被证实，对评估血管内皮功能状态及预防AS性血管病变的发生及发展具有重要的意义[9]。研究显示[10]，MAU排泄率增高者，其同时伴有内皮功能受损，因此，研究者认为MAU排泄率变化情况可作为冠心病患者内皮功能受损的标志。因而，本研究探究CHD患者MAU与血管内皮功能的相关性。

ET-1是由内皮细胞合成和分泌的血管收缩剂，具有较强的收缩血管功能，能够引起各种血管的收缩，其中以冠状动脉最为敏感，对AS的致病起着重要的作用。当内皮功能失调时，ET-1分泌会增加，因而，血清内ET-1的含量能够反映血管内皮的功能。此外，ET-1能诱导细胞外基质生成、促进细胞分裂，参与AS的发生与发展[11]。本研究显示，随着Gensini积分增加，四组ET-1浓度逐渐增高，除A组与对照组比较未见统计学差异外，其余各组间差异均有统计学意义。其原因可能与患者心肌缺氧，释放大量自由基，刺激了内皮细胞因子，致使ET水平显著升高。其中，内皮损伤可引起ET-1升高，当其升高到一定水平可引起冠状动脉缺血、痉挛甚至坏死，进一步损伤内皮细胞使ET-继续升高，加重病情，因此ET-1浓度随Gensini积分增加而增高，四组浓度逐渐增高。

AngⅡ是最主要的活性肽产物，具有强大的缩血管作用，主要引起小动脉和微动脉的收缩[12，13]。本研究显示，AngⅡ浓度随Gensini积分增加而增高，四组浓度逐渐增高，除A组与对照组比较未见统计学差异外，其余各组间差异均有统计学意义。其原因是由于心肌缺血、缺氧致患者心排量下降，激活神经内分泌机制，致使AngⅡ水平升高，与相关研究一致[14]。同时，内皮损伤导致内皮细胞因子释放，缩血管物质AngⅡ水平增高，当其升高至一定水平时，冠状动脉发生疫挛、缺血甚至坏死，加重缺血、缺氧,进一步损伤内皮细胞，使AngⅡ进一步升高，因此AngⅡ浓度随Gensini积分增加而增高，四组浓度逐渐增高。

VEGF不仅能够增加血管通透性，还可以特异性作用于内皮细胞，促进血管内皮细胞分裂、增殖和迁移[15]。正常组织中VEGF含量极低，当内皮细胞受损时，机体会上调VEGF表达，使得血管内皮细胞分泌更多的VEGF[16]。本研究显示，VEGF水平随Gensini积分增加而增高，四组浓度逐渐增高，除A组与对照组比较无差异外，其余各组间差异均有统计学意义。其原因可能由冠心病患者心肌出现缺血、缺氧及释放大量自由基，从而刺激内皮细胞释放更多的VEGF。同时，随着患者AS的加重，心肌缺血、缺氧也加重，进一步使VEGF表达增加。

Hs-CRP被认为是最适宜用于临床的炎症标记物，不仅可以反映炎症早期，而且可导致AS发生、演变和进展[17,18]。本研究显示，hs-CRP浓度随Gensini积分增加而增高，四组浓度逐渐增高，除A组与对照组比较无差异外，其余各组间差异均有统计学意义。这可能是因血管内皮损伤，引起炎症反应，产生大量CRP并沉积、活化，同时CRP活化炎症细胞，通过浸润、聚集或产生细胞因子，进一步引起血管内皮功能受损，导致hs-CRP浓度随Gensini积分增加而逐渐增高。

本研究显示，UACR水平随Gensini积分增加而增高，四组浓度逐渐增高，除A组与对照组无差异外，其余各组间差异均有统计学意义。表明UACR水平不仅与CHD发病进展存在密切关系，且与疾病的严重程度存在相关性。此外，UACR水平与血清 ET-1、AngⅡ、VEGF、hs-CRP 浓度均呈正相关关系，说明UACR与血管内皮功能之间存在一定关系，相关系数分别为（r=0.312，0.209，0.517，0.414，P<0.05），说明UACR可作为间接评估冠心病患者内皮功能的指标之一，与相关研究一致[19]。

综上所述，ET-1、AngⅡ、VEGF、hs-CRP 指标均能反映血管内皮功能，且随着内皮功能的损伤程度加重，其浓度逐步上升。UACR与血管内皮功能之间存在一定的关系，且UACR水平与血清ET-1、AngⅡ、VEGF、hs-CRP浓度均呈正相关，说明UACR可用作为间接评估冠心病患者内皮功能的指标。

[1]Buzunov VO，Prikaschikova KY，Domashevska TY，et al.Doseand age-dependent cardiovascular mortality among inhabitants of the Chornobyl contaminated areas.1988-2010 observation period.Probl Radiac Med Radiobiol，2014，19：59-66.

[2]Cheungpasitporn W，Thongprayoon C，Mao MA，et al.The Risk of Coronary Heart Disease in Patients with Kidney Stones：A Systematic Review and Meta-analysis.N Am J Med Sci，2014，6：580-585.

[3]Liu H，Zhu C，Guo Y，et al.A rare case of complex anomalous origin of coronary arteries with severe atherosclerosis.Chin Med J（Engl），2014，127：4297-4298.

[4]Li GH，Jiang HY，Xie YM，et al.Preliminary study on integration of traditional Chinese medicine and western medicine in patients with coronary heart disease in real world.China Journal of Chinese Materia Medica，2014，39：3474-3478.

[5]Krasnikova LI，Buzunov VO.Role of radiation and non-radiation factors on the development of coronary heart disease in the Chornobyl clean-up workers：epidemiological study results.Probl Radiac Med Radiobiol，2014，19：67-79.

[6]黄觊，钱海燕，李志忠，等.80岁以上高龄冠心病患者临床特点及预后分析.中国医药，2013，8：721-723.

[7]王秋菊，李鹏飞.中年女性冠心病患者危险因素分析.中国医刊，2013，48：37.

[8]王永军，周旭.冠心病流行病学与危险因素研究近况.中国煤炭工业医学杂志，2011，15：1087-1091.

[9]Akhmineeva AKh.Biochemical markers of endothelial dysfunction in chronic obstructive pulmonary disease concurrent with hypertensive disease or coronary heart disease.Ter Arkh，2014，86：20-23.

[10]Tulppo MP，Piira OP，Hautala AJ，et al.Exercise capacity is associated with endothelin-1 release during emotional excitement in coronary artery disease patients.Am J Physiol Heart Circ Physiol，2014，307：391-396.

[11]ElSafouryOS， EzzatM， AbdelhamidMF， etal.The Evaluation ofthe ImpactofAge， Skin Tags， Metabolic Syndrome，Body Mass Index，and Smoking on Homocysteine，Endothelin-1，High-sensitive C-reactive Protein，and on the Heart.Indian J Dermatol，2013，58：326.

[12]章晓燕，於佳炜，刘春凤，等.血管紧张素转换酶抑制剂和血管紧张素Ⅱ受体拮抗剂单药治疗及联合应用对慢性肾脏病患者肾素-血管紧张素系统表达的影响.肾脏病与透析肾移植杂志，2012，21：217-222.

[13]龚永飞，戴海龙，尹小龙，等.血管紧张素-（1-7）与心血管疾病.中国心血管病研究，2014，12：160-163.

[14]Kim HY，Bae EH，Ma SK，et al.Effects of Spironolactone in Combination with Angiotensin-Converting Enzyme Inhibitors or Angiotensin Receptor Blockers in Patients with Proteinuria.Kidney Blood Press Res，2014，39：573-580.

[15]Kazmierczak E，Grajek S，Kowal J，et al.Prognostic usefulness ofIL-6 and VEGF forthe occurrence ofchanges in coronaryarteries of patients with stable angina and implanted stents.Eur Rev Med Pharmacol Sci，2014，18：2169-2175.

[16]Zhu H，Lu S，Su W，et al.Effect of liandouqingmai recipe on quality of life and inflammatory reactions of patients with coronary heart disease.J Tradit Chin Med，2014，34：539-543.

[17]Lieberman J，Goff D Jr，Hammond F，et al.Dietary intake relative to cardiovascular disease risk factors in individuals with chronic spinal cord injury：a pilot study.Top Spinal Cord Inj Rehabil，2014，20：127-36.

[18]刘丽华.不同类型冠心病患者血清超敏C反应蛋白水平差异的研究.中国心血管病研究，2013，11：95-96.

[19]Goud BK， NayalB， DeviOS， etal.Comparison of microalbuminuria with hs-CRP and low density lipoprotein levels in nondiabetic，nonhypertensive myocardial infarction patients.J Cardiovasc Dis Res，2012，3：287-289.

The relationship between microalbuminuria and vascular endothelial function in patients with coronary heart disease

The relationship between microalbuminuria and vascular endothelial function in patients with coronary heart disease

LIAO Shang-yu，ZHANG Zhi-guang.Cardiovascular Internal Medicine Guangdong Yunfu People′s Hospital，Yunfu 527300，China

ObjectiveTo explore the relationship between microalbuminuria and vascular endothelial function in patients with coronary heart disease（CHD）.Methods150 cases of patients were selected with CHD and divided into 4 groups with the categorical threshold of Gensini score by quartile values：A group （3-19）with 36 cases，B group（19-34）with 39，C group（34-58）with 35 and D group（58-150）with 40.The levels of ET-1 and AngⅡ were measured by radioimmunoassay，VEGF and hs-CRP by enzyme-linked immunosorbnent assay，urinary albumin by immunity transmission turbidity，and creatinine by oxidase method，then computed the ratio of urinary albumin to creatinine.ResultsThe level of UACR，ET-1，AngⅡ，VEGF and hs-CRP were significant difference among the five groups（F=87.313，34.312，37.931，354.215，63.214，P<0.05）.The value of AngⅡ，ET-1，VEGF，hs-CRP among the four Groups，D group were higher than other four groups，C group higher than that of A and B and the control group，B group was higher than A group and the control group，the differences were statistically significant（P<0.05）.There was no significant difference between group A and control group（P>0.05）.There was positive corelation between UACR and ET-1，AngⅡ，VEGF，hs-CRP and the correlation coefficient were（r=0.312，0.312，0.517，0.414，P<0.05）respectively.ConclusionThe ET-1，AngⅡ，VEGF and hs-CRP indexes are marks of endothelial function，the level of UACR can be used for the evaluation of endothelial function in patients with CHD.

Coronary heart disease； Microalbuminuria； Endothelial function

10．3969/j．issn．1672－5301．2015．04．012

R541.4

A

1672-5301（2015）04-0339－04

2015-01-07）