加味去伤片主药的薄层色谱研究

赵严丽，张火旺

(广东省河源市食品药品检验所，广东 河源 517000)

加味去伤片是由重楼、九节茶、延胡索、三七、毛冬青5味药材[1]运用现代中医药提取工艺制成的复方制剂，具有活血化瘀、消肿止痛功效，用于骨折、软组织扭伤、挫伤早期。加味去伤片是河源市中医院制剂，原标准为广东省食品药品监督管理局医疗机构制剂注册标准，在该标准中仅有加味去伤片性状描述和简单的理化鉴别，无法控制该药品的有效性和均一性。本试验中对处方中重楼、延胡索进行了定性研究，建立了其薄层色谱(TLC)鉴别方法。

1 仪器与试药

SartoriusCPA225D型电子分析天平(精确度0.01 mg，赛多利斯科学仪器＜北京＞有限公司);KQ－250DA型超声清洗器(昆山市超声仪器有限公司)。硅胶G薄层板(自制);硅胶G薄层板(青岛海洋化工厂);硅胶G薄层板(MERK公司)。重楼对照药材(供鉴别用，批号为121157－201003)，延胡索对照药材(供鉴别用，批号为120928－201208)，延胡索乙素对照品(供含量测定用，批号为110726－201213)，均由中国食品药品检定研究院提供;加味去伤片(河源市中医院，批号分别为 20140125，20140126，20140127，规格为每片0.3 g);乙醇、甲醇、正丁醇、乙酸乙酯、乙醚、甲苯、丙酮等试剂均为分析纯，水为超纯水。

2 方法与结果

2.1 重楼的鉴别[2－4]

取本品10片，研成细粉，加乙醇10 mL，超声处理30 min(功率250 W，频率100 kHz)，滤过，滤液作为供试品溶液。取重楼对照药材0.5 g，加乙醇10 mL，超声处理30 min，滤过，滤液作为对照药材溶液。再取缺重楼的阴性对照样品，同供试品溶液制备法制得阴性对照品溶液。照2010年版《中国药典(一部)》附录ⅥB中TLC法试验，吸取上述3种溶液各10 μL，分别点于同一硅胶G薄层板上，以正丁醇－乙酸乙酯－水(20∶0.1∶20)的上层溶液为展开剂，展开，取出，晾干，喷以10%硫酸乙醇溶液，在105℃加热至斑点显色清晰，分别置日光灯和紫外灯(365 nm)下检视。供试品色谱中，在与对照药材溶液色谱相应位置上显相同颜色的斑点或荧光斑点，阴性对照无干扰(图1)。

图1 重楼鉴别薄层色谱图

2.2 延胡索的鉴别[2，5]

取本品20片，研细，加甲醇50 mL，超声30 min，滤过，滤液蒸干，残渣加水10 mL使溶解，加浓氨试液调pH至9～10，用乙醚提取2次，每次10 mL，合并乙醚液，蒸干，残渣加甲醇1 mL使溶解，作为供试品溶液。取延胡索对照药材1 g，同法制备对照药材溶液。另取延胡索乙素对照品，加甲醇制成每1 mL含0.5 mg的溶液，作为对照品溶液。再取缺延胡索的阴性对照品，同供试品溶液制备法制得阴性对照品溶液。照2010年版《中国药典(一部)》附录ⅥB中TLC法试验，吸取上述4种溶液各2 μL，分别点于同一硅胶G薄层板上，以甲苯－丙酮(5∶1)为展开剂，展开，取出，晾干，置碘缸中约3 min后取出，挥尽板上吸附的碘后，置紫外光灯(365 nm)下检视。供试品溶液色谱中，在与对照药材溶液色谱和对照品溶液色谱相应位置上显相同颜色的荧光斑点，阴性对照无干扰(图2)。

图2 延胡索鉴别薄层色谱图

3 讨论

不同薄层板比较，取手铺硅胶G薄层板，预制硅胶G板和默克板;不同温度比较，取点样后的薄层板，分别在6℃和20℃中展开;不同湿度比较，取点样后的薄层板，分别在用硫酸调节相对湿度20%和80%的层析缸中展开。试验结果表明，不同条件对鉴别无明显影响。对于重楼鉴别的展开剂，经过多次试验，以正丁醇－乙酸乙酯－水(20∶0.1∶20)的上层溶液为展开剂展开，取得了很好的效果，能有效排除阴性对照的干扰现象，其主斑点分离清晰。本方法重复性好，专属性强，阴性对照无干扰，可作为制订其质量标准时参考。

[1]Z20070983，医疗制剂注册标准标准[S].

[2]国家药典委员会.中华人民共和国药典(一部)[M].北京:中国医药科技出版社，2010:243.

[3]童湘伟.三七血伤宁胶囊中主药的薄层色谱研究[J].中国药业，2010，19(14):45.

[4]孟 芹，郭永利，马克坚.云南红药片质量标准研究[J].中国药业，2001，6(1):27 －28.

[5]肖满民，刘灿辉，叶玉华.天元胶囊的质量标准研究[J].中医药导报，2010(5):106－108.