胶体金快速检测技术的应用简述

舒 展 吕春华 叶尔肯 安纳斯 黄杨波

(新疆阿勒泰地区动物疾病控制与诊断中心 新疆 阿勒泰市836500)

胶体金免疫层析技术（GICA） 是1971年FaulkWP与TaylorGM发明的，迄今已被大量应用于医学检测与动物疫病诊断等领域。该技术是一种快速固相膜免疫分析技术，将硝酸纤维膜作为载体。它主要由胶体金标记技术、免疫检测技术以及蛋白层析技术三种技术组成。该技术操作简便，无需专门的仪器设备，检测结果清晰直观，非常适合现场快速检测。本文主要对GIGA技术在兽医临床诊断中的应用情况作一简要概述。

1 GICA 在动物病毒诊断中的应用

OhJS等建立了一种胶体金免疫层析法，主要用于检测犬瘟热病毒抗体。通过试验证实，和血凝抑制试验（HI）相比，GICA的敏感性更高，为97.1%，其特异性为76.6%[1]。JoonTamY等制作出用于检测伪狂犬病病毒抗原的胶体金试纸条，只需取25μL样品进行检测，5分钟后便可获得检测结果[2]。CuiSJ等建立了检测H5亚型禽流感病毒抗体胶体金试纸条，并将其与HI进行对比，发现其特异性为97.6%，敏感性为88.8%。由于此方法操作简单，反应迅速，不用专门的仪器设备，CuiSJ等认为该方法会被广泛运用到H5N1亚型禽流感病毒抗体的检测中[2]。彭伏虎等研制出一种试剂盒，由稀释液、试纸条、样品管、塑料吸管、一次性手套、说明书等组成。该试剂盒是在H9亚型禽流感病毒胶体金免疫层析检测法基础上组装而成的。在室温条件下试剂盒一般可保存半年，在4℃条件下可保存一年。该试剂盒比HA试验具有更好的灵敏度、特异性，操作简便、迅速，可在10分钟内得出检测结果[3]。

2 GICA 在动物细菌病诊断中的应用

GICA对动物细菌病具有较高的诊断价值，其相关胶体金诊断试纸条早已研制成功，有的已广泛应用于基层兽医临床诊断中，可诊断牛结核、牛布氏杆菌病、鸡白痢、禽霍乱等疫病。檀华等利用胶体金标记葡萄球菌蛋白A组装出一种免疫层析试纸条。该试纸条主要用于检测类鼻疽假单胞杆菌，检测速度快[4]。通过试验证实，该试纸条和间接血凝试验的结果相同，敏感性与特异性均较高。曹春梅建立了一种检测沙门氏菌O9抗原的方法，其检测原理是建立在O9抗原的2株单克隆抗体的夹心基础上的，同时，还借助了胶体金免疫层析试纸条的巧妙设计。这是一种初筛试验，可广泛用于人工污染样品试验以及现场检测试验[4]。朱明东等建立了一种新的胶体金免疫层析法，用于诊断布鲁菌病。他认为GICA能迅速诊断牛布鲁菌病，特异性与敏感性均很好[4]。

3 GICA 在动物寄生虫病诊断中的应用

很多寄生虫病均属于人畜共患性疾病，因此，加强对动物寄生虫病的诊断具有十分重要的公共卫生学意义。何伟等建立出检测家畜血清中抗血吸虫抗体的胶体金试纸条[5]。王艳华等建立了检测弓形虫抗体的免疫胶体金试纸条。与IHA诊断法相比，该试纸条的敏感性更强，另外，该检测法还能比IHA诊断试剂早2d检测出抗体[5]。桌国荣等建立了胶体金免疫层析试纸条，用于诊断犬弓形虫，与IHA试剂盒相比，该试纸条的诊断符合率为99%。苑淑贤等建立了用于检测猪旋毛虫病的胶体金免疫层析试纸条。张守发等分别采用GICA与ELISA两种方法检测147份血清样本，结果显示GICA比ELISA的特异性更好，敏感性也更高，其总符合率约为87.8%[6]。同时，CICA操作简单、检测迅速，可用于大批量检测，是诊断牛新孢子虫病的理想选择。

4 GICA 在水产动物疫病检测中的应用

我国才刚刚将该技术应用于水产动物疫病检测领域中。WangXJ等在2006年建立了一种胶体金免疫层析法试纸条，用于检测虾白斑综合征病毒抗原，其敏感性远好于斑点免疫印迹测定试验[5]。由于操作简单，无需专门的仪器，势必会成为诊断虾白斑综合征病毒的一种有效方法

[1]OhJS，HaGW，ChoYS，etal.One-stepimmunochromatographyassay kit for detecting antibodies to canine parvoviru[J].ClinVaccineImmunol，2006，13（4）：520-524.

[2]林彤，独军政，丛国正，等.胶体金标记免疫层析技术的最新应用进展[J].安徽农业科学，2010，38(16)：8429-9431.

[3]彭伏虎，王政，张进良，等.胶体金试纸条检测H9亚型禽流感病毒的研究[J].畜牧兽医学报，2008，39(8)：1081—1086.

[4]庄金秋，梅建国，沈志强.胶体金免疫层析技术在兽医临床诊断中的应用进展[J].中国动物检疫，2012，29（9）：70-75.

[5]祖立闯，王金良，李娇，等.胶体金免疫层析技术在动物疫病诊断上的应用[J].动物医学进展，2010，31（8）：101-104.

[6]张守发，丁德，鞠玉琳，等.胶体金免疫层析法与ELISA法对牛的新孢子虫血清抗体检测结果的比较[J].中国兽医杂志，2008，44（8）：54-55.