抗雏鸭病毒性肝炎卵黄抗体粉饲料添加剂的研制

张桂荣刘玉梅武桂梅王振辉*刘 军

(1.吉林农业科技学院,吉林吉林 132101; 2.吉林省白山市松树镇畜牧站,吉林白山 234704; 3.吉林正业生物制品股份有限公司,吉林吉林 132101)

抗雏鸭病毒性肝炎卵黄抗体粉饲料添加剂的研制

张桂荣1刘玉梅2武桂梅1王振辉1*刘 军3

(1.吉林农业科技学院,吉林吉林 132101; 2.吉林省白山市松树镇畜牧站,吉林白山 234704; 3.吉林正业生物制品股份有限公司,吉林吉林 132101)

当雏鸭病毒性肝炎卵黄抗体效价达到1∶320倍时,收集免疫鸡蛋分离卵黄,减压低温干燥制成卵黄抗体细粉并进行抗体效价测定和安全检验。最后将合格的卵黄抗体细粉以不同比例加入雏鸭饲料,对雏鸭进行预防量饲喂后强毒攻毒试验及强毒攻毒后治疗量的饲喂试验、小区域雏鸭饲喂试验。结果:预防试验为每kg饲料添加30g卵黄抗体粉末时,攻毒保护率为85.0%;治疗试验为每kg饲料添加50g卵黄抗体粉末时,发病治愈率达到65.0%以上;小区域试验表明:卵黄抗体粉末预防量添加组比同期常规饲养组总发病率降低11%,抗生素用量降低12.3%,增重率提高9%。有效的防治了雏鸭病毒性肝炎病。

雏鸭肝炎病毒;卵黄抗体;饲料添加剂;免疫效果

雏鸭肝炎病毒[1]感染是危害养鸭业极其严重的传染病。按兽医法规的要求，控制雏鸭肝炎病的措施是严格的检疫、净化和饲养管理工作，然而由于检疫上的诸多困难。在当前发病率增高的情况下，本研究采用分离到的雏鸭肝炎病毒制备的灭活抗原，免疫健康的产蛋鸡，制备卵黄抗体粉添加到饲料中，取得较好的免疫效果。

1 材料

菌株从吉林双辽鸭场等数家鸭场分离鉴定的雏鸭肝炎病毒。各种试剂和仪器由吉林农业科技学院生物制药实验室制备和保存。

2 方法

2.1 抗雏鸭病毒性肝炎卵黄抗体干燥粉末制备与检验[2]

2.1.1 卵黄抗体粉末制备 将鸡蛋用自来水冲洗污物后，用0.05%百毒杀浸泡3～5min，再用75%酒精浸泡擦一遍，晾干，在无菌条件下将高免蛋打破，倒入蛋清分离器中分离蛋清，把留下的蛋黄倒入灭菌的组织捣碎机中高速搅拌2～3min制成匀浆，用双层灭菌纱布过滤，进行50℃减压真空干燥，将干燥的卵黄无菌粉碎分装于250ml中性瓶中密封，于4℃保存。

2.1.2 卵黄抗体粉末检验 按无菌检验操作规程进行。蛋鸡的免疫与卵黄抗体效价已经做完并发表核心期刊上

2.1.3 安全检验 随机选取2日龄健康雏鸭40只，随机分成4组，第一组每只饲喂卵黄抗体粉末0.5g，第二组每只饲喂卵黄抗体粉末1g，第三组每只饲喂卵黄抗体粉末1.5g，连续服用3d，第四组作为空白对照，相同条件隔离饲养10d记录结果。

2.2 抗雏鸭病毒性肝炎卵黄抗体饲料添加剂免疫试验[3]

2.2.1 预防添加量试验 选1日龄健康、体重相当的肉雏鸡100只，随机分成5组，1～4组为试验组，第5组为对照组。对4个试验组每1kg基础日粮中依次分别添加10g、20g、30g、40g的抗雏鸭病毒性肝炎卵黄抗体粉，对照组不添加。各组分开隔离喂养，连续饲喂3d。然后每只试验雏鸭连同对照雏鸭各肌肉注射DVH标准强毒，隔离饲养在吉林正业股份责任公司提供的负压过滤消毒免疫室内，饲养观察20d，记录结果。

2.2.2 治疗添加量试验 选1日龄健康、体重相当的肉雏鸭100只，随机分成5组，1～4组为试验组。每组试验雏鸭各肌肉注射DVH标准强毒株，隔离饲养在吉林正业股份责任公司提供负压过滤消毒免疫室内3d，待100%左右雏鸡发病时，4个试验组每kg基础日粮中分别饲喂添加40g、50g、60g、70g的抗雏鸭病毒性肝炎卵黄抗体粉饲料饲喂3d之后，继续用无抗体饲料饲喂10d。第5组为强毒攻毒对照组。观察记录各组试验雏鸭的变化。

2.2.3 小区域试验 对双辽鸭场不同饲养批次共计1 000雏鸭从3日龄开始，在基础日粮饲料里添加30g/kg的抗雏鸭肝炎病毒卵黄抗体粉末，饲喂3d，同未添加组同条件饲养50d统计发病率、饲养成本。

3 结果与分析

3.1 DVH卵黄抗体干燥粉末检验结果

制备的卵黄抗体粉末虽然污染少量的细菌，但均没有致病性；四种剂量的雏鸡饲喂试验均安全；卵黄抗体经过干燥脱水后卵黄抗体效价高达到1∶4048倍数。证明低温减压干燥处理没有影响卵黄抗体效价，而且达到较好的浓缩目的，便于卵黄抗体4℃长期保存与应用。

3.2 卵黄抗体预防添加量试验结果

从表1可知：预防免疫卵黄抗体添加量为3%、4%时，攻毒保护率均为85.00%；治疗时卵黄抗体添加量为5%，6%，7%时，治愈率分别为 65%，75%，65%。可知研制的雏鸭肝炎病毒卵黄抗体具有较好的免疫特异性。攻毒后对照组雏鸭全部死亡，死亡雏鸭都有典型的雏鸭病毒肝炎症状[1]，故抗雏鸭病毒性肝炎卵黄抗体预防添加量为3%时和治疗量5%时比较合适。

表1 卵黄抗体粉饲料添加剂免疫试验结果

3.3 小区域试验结果

卵黄抗体饲料添加组较同期普通饲养组总发病率降低11%，抗生素用量降低12.3%，增重率提高7.7%。证明抗雏鸭病毒性肝炎卵黄抗体粉末的添加，较好的控制了疾病的发生，而且其他疾病的发生率也就随之降低，总体经济效益显著提高9%。

4 讨论

卵黄抗体[3]（IgY）是禽类B淋巴细胞在抗原物质刺激下所产生并沉积在卵黄中的能与抗原发生特异性反应的一种免疫球蛋白，是禽类在长期进化过程中形成的用于提高抵抗力的物质。卵黄抗体作为绿色药物，是较理想的抗生素替代品。由于雏鸭消化系统尚未发育完全，消化酶对IgY消化作用较弱，故可将一定量的针对某些疾病的 IgY 添加到饲料或饮用水中，一部分可经小肠吸收，起到被动免疫作用。本试验研究证明小剂量的卵黄抗体添加剂可以起到预防作用，而大剂量的在发病初期还有治疗作用。卵黄抗体无污染，无残留，对机体不会产生危害，是一种良好的饲料添加剂。由于雏鸭病毒性肝炎是一种高度致死性急性传染病。尤其是3～20日龄的雏鸭以发病急，死亡快特点，而且疫苗接种不能很好控制，使用其卵黄抗体饲料添加剂能够有效地降低家雏鸭发病率与死亡率，提高生产性能，增加养鸭户的经济效益。但卵黄抗体作为添加剂进行大规模的应用还存在一定的问题[4]，如特异性毒株的选择问题，卵黄抗体的稳定性保护和贮存、污染防治等问题，针对各种疾病的卵黄抗体的开发研制，还需要更多专家努力。但可预见，卵黄抗体在饲料添加剂中的应用具有广阔的前景[4]。

5 结论

抗雏鸭病毒性肝炎病卵黄抗体效价到达1：320倍以上时，制成卵黄抗体干燥粉末，预防添加量为3%时，攻毒保护率可达85%，治疗添加量为5%时，治愈率可达65%以上。卵黄抗体添加组比同期普通饲养组总发病率降低7%，抗生素用量降低 12%，增重率提高9 %。

[1] 【美】B.W卡尔尼克.禽病学（第十版）[M].北京：中国农业出版社，1999：92-152.

[2] 刘海生，杨增岐，张淑霞等.抗仔猪大肠埃希菌病高免卵黄抗体粉的研制[J].动物医学进展，2009，30（9）：15-19.

[3] 韩水仲，田泽华，赵津子等.卵黄抗体在饲料添加剂中的应用[J].中国饲料，2010，（15）：3-7.

[4] 武桂梅，王振辉，张桂荣，等.抗鸡白痢沙门氏杆菌病卵黄抗体粉饲料添加剂的研制[J].黑龙江畜牧兽医科技版，2013，（1）：66-107.

吉林省教育厅“十二五”科研项目：吉教科合字[201]

张桂荣（1962—），女，吉林省公主岭市人，硕士，副教授，主要从事动物药理学和动物传染病实验教学工作。

王振辉（1964—），男，吉林省伊通县人，硕士，教授，主要从事生物药物教学、研究工作。