自体骨髓干细胞经肝动脉灌注治疗1例肝硬化的随访观察

刘林源 浮习凯 尚丽 丁淑亚

自体骨髓干细胞经肝动脉灌注治疗1例肝硬化的随访观察

刘林源 浮习凯 尚丽 丁淑亚

目的 评价体外分离的自体骨髓干细胞经肝动脉灌注途径治疗乙肝后肝硬化的安全性、可行性以及疗效。方法 对1例肝硬化患者行自体骨髓干细胞经肝动脉灌注治疗，进行随访性的观察，了解腹痛、腹胀、纳差等症状的改善情况及不良反应发生的情况，对比分析患者在术后1、3、9周的肝功能、凝血功能、腹部彩超的变化情况。结果 肝动脉灌注过程顺利，无不良事件发生；术后患者肝功能得到改善，肝脏合成白蛋白、凝血因子能力提高，症状也逐渐消失，未出现严重的并发症和不良反应。结论 自体骨髓干细胞经肝动脉灌注治疗肝硬化安全有效，其长期疗效有待进一步研究。

自体骨髓干细胞；介入灌注；肝硬化

现阶段，难治性肝病的治疗困局有望被打破，随着干细胞移植的研究日益进步与发展，国内外多项体外研究与临床资料均证实了骨髓干细胞在活体内、外均能够分化为具有肝细胞功能的细胞[1]，通过不同途径的移植治疗，改善难治性肝病特别是肝硬化的预后成为现实，这种治疗新方法获得了初步的肯定与近期的效果。武警河南总队医院近年来成功开展自体骨髓干细胞经肝动脉介入灌注治疗肝硬化，并取得了较好的临床疗效，现将其中1例的诊疗资料及随访结果总结如下，拟初步了解自体骨髓干细胞移植治疗对肝硬化的影响。

1 资料与方法

1.1 一般资料 患者，男，28岁，主因“腹胀、腹痛9天，加重2天”入院。患者入院前9天无明显诱因出现腹胀，呈持续性发作，进食后明显，伴有腹痛，上腹部明显，无发热、恶心、呕吐，入院前2天自感上述症状加重，为求诊治而来武警河南总队医院，门诊查腹部彩超提示肝硬化并腹水；大便化验提示隐血试验阳性，遂以“肝硬化并腹水”收入科。患者儿童时期患有“黄疸型肝炎”，曾辗转多家医院诊治，后好转。排除“糖尿病”、“冠心病”、“高血压病”等病史，排除药物及食物过敏史，无家族性、遗传性疾病史。

1.2 方法 患者取仰卧位，采用右侧髂前上棘为穿刺点，局部消毒麻醉，使用18号骨髓穿刺针穿刺，抽取抗凝骨髓血约

200 mL，然后采用专门的试剂盒，经离心、分离制成细胞悬液，然后进行骨髓干细胞的分离、纯化，生理盐水调节细胞密度，计数后冰箱待存备用。然后开始移植，常规术前备皮，术前禁食

6 h，术前lh行碘过敏实验。在数字减影血管造影机(DSA)下，采用Seldinger技术，局麻下穿刺右侧股动脉，置入5 F动脉鞘，引入5 F R-H肝动脉导管，超选择插管至肝固有动脉，造影了解血管分布，排除肝内占位性病变。首先注入地塞米松注射液

2.5 mg，其次在15 min之内缓慢灌注已分离好的骨髓干细胞悬液10 mL，最后用l 0mL生理盐水冲洗管腔。术后拔出动脉鞘，加压包扎穿刺部位，右下肢制动6 h，平卧24 h，常规对症处理。

1.3 疗效观察指标 随访观察患者术前、术后以下指标评估疗效：（1）临床症状(食欲、精神、腹胀)、体征(体质量、腹围)；（2）实验室指标：肝功能(ALT、AST、TBIL、ALB)、凝血功能(PT、FIB)；（3）影像学检查：腹部彩超。

2 结果

肝动脉灌注过程顺利，无不良事件发生；术后患者肝功能得到改善，肝脏合成白蛋白、凝血因子能力提高，症状也逐渐消失，未出现严重的并发症和不良反应。见表1。

表1 干细胞灌注治疗前后患者各项指标变化情况对比

3 讨论

肝硬化是一种或多种病因长期或反复引起的肝脏慢性、进行性、弥漫性病变，病理发展在于肝细胞广泛变性和坏死基础上产生肝脏纤维组织弥漫性增生，并形成再生结节和假小叶，导致肝小叶正常结构和血管解剖的破坏[2-3]。病变早期(肝功能代偿期)，患者症状和体征轻微，肝功能检查仅有轻度异常；晚期可进展至肝功能衰竭、门静脉高压并伴发多种并发症，死亡率较高。临床上首先以内科对症治疗为主，但效果平平，再次是原位肝移植，却因肝源缺乏、免疫排斥反应及费用高昂难以普遍推广[4]。如今，干细胞移植提供了新的临床治疗思路，骨髓干细胞进行体内移植后，可成功定植于肝纤维化组织内，在细胞因子诱导下向肝细胞分化，并通过分化成为功能性肝细胞，从而参与肝结构和功能的修复和重构[5-6]，在一定程度上逆转肝硬化病变。

宋向奎等［7］报道30例经肝动脉自体骨髓干细胞移植治疗失代偿期肝硬化，ALB、PA显著升高，APTT显著缩短，部分指标改善不明显，3例肝性脑病患者未再出现肝性脑病症状，合并腹水22例均减轻或消失，大多数临床症状纳差、乏力、腹胀得到明显缓解。刘新能等［8］研究提示，骨髓干细胞移植治疗后，患者肝脏的蛋白合成及修复功能改善显著，这些变化特别是血清白蛋白的升高是一般护肝治疗不可能达到的。有研究证实，骨髓干细胞移植使大多数患者在短期内ALB升高、TBIL下降、凝血功能改善，同期纳差、乏力等症状消失、腹水消退[9]。这也说明骨髓干细胞移植能有效改善损伤的肝组织，有望使患者长期获益。

本例病患由乙型病毒性肝炎发展所致，主要表现为肝功能损害和门脉高压，且并发了上消化道症状。在进行干细胞移植之前，考虑到干细胞悬液经推注后，随血流可以弥散到整个肝脏组织，还可从肝动脉与门脉小支间多条交通支的供血中获得营养成分促进其成活生长，所以选择了经肝动脉介入途径。通过随访观察，患者肝功能得到改善，肝脏合成白蛋白、凝血因子能力提高，症状也逐渐消失，未出现严重的并发症和不良反应，生活质量相应提高。

本研究表明，自体骨髓干细胞经肝动脉灌注治疗从目前来讲是安全有效的，但在临床应用方面还处于起步阶段，如骨髓干细胞的目标用量、介入路径、靶器官的选择、适应症与禁忌症、远期疗效等，仍需要长远的临床探索。

[1] 张善红，姜春萌，李荣宽，等．自体骨髓干细胞移植治疗失代偿期肝硬化的临床研究[J]．中华临床医师杂志，2012，6(4)：165-167．

[2] Jung YL,Ryu KH,Cho SJ,et al.Syngenic bone marrow cells restore hepatic function in carbon tetrachloride-induced mouse liver injury[J]. Stem Cells Dev,2011,15(5):687-695.

[3] Yagi K,Kojima M,Oyagi S,et al.Application of mesenchymal stem cells to liver regenerative medicine[J].Yakugaku Zasshi,2012,128(1):3-9.

[4] Benjamin M,Stutchfield,Stuart J,et al.Prospects for stem cell transplantation in the treatment of hepatic disease[J].Liver Transplantati on,2010,16(7):827-836.

[5] 姚鹏，胡大荣，王帅，等．自体骨髓干细胞移植治疗慢性肝衰竭研究[J]．肝脏，2013，10(3)：171-172．

[6] 朱康顺，单鸿，何可可，等．自体骨髓干细胞肝内移植治疗失代偿期肝硬化的初步临床观察[J]．中国医学影像技术，2011，23(12)：1863-1865．

[7] 宋向奎，刘健，曹名波，等．经肝动脉自体骨髓干细胞移植治疗失代偿期肝硬化30例[J]．中国实用医刊，2010，37(13)：72-73．

[8] 刘新能，刘红梅，朱大磊，等．自体骨髓干细胞移植介入治疗失代偿期肝硬化的临床观察[J]．医学临床研究，2012，29(1)：180-181，186．

[9] 马代全，陈杨，黄茂涛，等．自体骨髓干细胞移植治疗失代偿期肝硬化4 O例疗效观察[J]．实用医院临床杂志，2012，9(1)：120-122．

10.3969/j.issn.1009-4393.2015.8.039

河南 450052 武警河南总队医院消化内科 （刘林源 浮习凯尚丽 丁淑亚）