重组血管内皮抑素对晚期食管胃交接部腺癌患者外周血Treg、CD8+T细胞、TSGF影响及疗效观察

郭宇，任志丽，张瑞新

(唐山工人医院 胸外科，河北 唐山 063000)



重组血管内皮抑素对晚期食管胃交接部腺癌患者外周血Treg、CD8+T细胞、TSGF影响及疗效观察

郭宇，任志丽，张瑞新

(唐山工人医院 胸外科，河北 唐山 063000)

目的 探讨重组血管内皮抑素对晚期食管胃交接部腺癌患者外周血Treg、CD8+T细胞、恶性肿瘤特异生长因子(tumor specific growth factor，TSGF)的影响及临床疗效观察。方法 收集唐山工人医院收治的晚期食管胃交接部腺癌患者52例，随机分为对照组和实验组，每组各26例，对照组给予OLF化疗方案，实验组给予OLF化疗方案联合重组血管内皮抑素治疗。每21 d为1个周期，共治疗4个周期。治疗结束后，对所有患者的外周血Treg、CD8+T细胞水平、血清TSGF含量及临床疗效进行检测。结果 治疗后，与对照组比较，实验组患者的外周血Treg水平较低(P<0.05)；外周血CD8+T细胞水平较高(P<0.05)；血清TSGF含量较低(P<0.05)；有效率较高(P<0.05)。结论 重组血管内皮抑素能够明显降低晚期食管胃交接部腺癌患者外周血Treg水平和血清TSGF含量，提高CD8+T细胞水平，提高治疗的有效率，对临床有指导意义。

重组血管内皮抑素；晚期食管胃交接部腺癌；Treg；CD8+T细胞；恶性肿瘤特异生长因子；临床疗效

食管胃交界部腺癌(adenocarcinoma of the esophagogastric junction，AEG)是指发生于贲门附近的食管下端，贲门及贲门下方近胃端的恶性肿瘤，多可侵蚀胃-食管交接部。因此，食管-胃交接部腺癌泛称为 “贲门癌”[1]。20世纪80年代以来，世界许多地区和国家均出现胃远侧端肿瘤发病率降低，而贲门癌和食管末端腺癌的发病率升高。在一些国家，腺癌在食管癌构成比中已超过鳞癌[2]。对于AEG，手术是目前最常用的治疗方式，但是单纯术后5年生存率仅为34.0%～52.3%之间[3]，尤其是很多晚期AEG患者已经不适合手术治疗。因此，采取合适的化疗方案对于延长患者生存期尤为重要。研究发现[4]，重组血管内皮抑素是新出现的血管抑制类药物，具有抑制肿瘤新生血管形成、妨碍肿瘤增殖转移的效果，已有研究表明[5]，应用重组血管内皮抑素联合OLF化疗方案治疗晚期胃癌的有效率较单纯OLF化疗方案要高。但是，目前关于重组血管内皮抑素对晚期AEG治疗作用的相关研究较少，因此，本研究通过对患者外周血Treg、CD8+T细胞及恶性肿瘤特异生长因子(tumor speicfic growth factor，TSGF)水平的检测分析，来探讨重组血管内皮抑素对晚期AEG的影响及其临床疗效。

1 资料与方法

1.1 一般资料 收集唐山工人医院2014年5月～2015年5月的确诊为AEG的患者52例。按照随机数字表法分为实验组和对照组，每组26例患者，实验组男15例，女11例，年龄40～75岁，平均年龄(58.5±8.2)岁；对照组男16例，女10例，年龄45～81岁，平均年龄(62.0±8.1)岁。2组患者的年龄、性别一般资料比较，差异无统计学意义。

1.2 诊断及排除标准 诊断依据根据2008年《欧洲癌症研究与治疗组织胃肠肿瘤专业组胃及食管结合部腺癌诊疗专家共识》[6]关于AEG的诊断标准，并经超声内镜和病理学确诊；分期根据2010年国际抗癌联盟/美国癌症联合委员会(UICC/AJCC)的TNM分期标准[7]。排除标准：既往经过手术、放化疗再复发的患者；预计生存期<3个月；合并其他恶性肿瘤；严重的心脑血管疾病、肝肾功能衰竭等其他内科疾病；对试验中所涉及药物过敏。

1.3 方法

1.3.1 治疗方法：对照组给予OLF化疗方案：奥沙利铂135 mg/m2，d1；亚叶酸钙200 mg/m2，d1～d5；5-氟尿嘧啶500 mg/m2，d1～d5。实验组在对照组基础上联合重组人血管内皮抑制素注射液(山东先声麦得津生物制药有限公司，国药准字S20050088)75 mg/m2，d1～d14。每21d为1个周期，2组均治疗4个周期。

1.3.2 血清指标采集：所有研究对象均于治疗前后采集空腹12 h后静脉血5 mL，然后分离血清，采用临床检验科全自动酶联免疫分析仪(SS228BEPIII)，严格按照人肿瘤特异性生长因子(TSGF)检测试剂盒(上海酶联生物技术有限公司)的说明书操作，检测血清中TSGF的含量。

1.3.3 细胞学指标检测：治疗前后抽取空腹静脉血5 mL，加入EDTA-K2抗凝，采用CytoFLEX流式细胞仪(美国贝克曼)，检测外周血中调节性T细胞(Treg)、CD8+T细胞水平。

1.3.4 临床疗效评估：根据世界卫生组织(WHO)关于实体瘤的评价标准：缓解：肿瘤缩小在50%以上，且维持时间大于1个月；稳定：25%<肿瘤缩小<50%，同时无新病灶；进展：肿瘤增大或转移。有效率=缓解率+稳定率。

2 结果

2.1 治疗前后2组患者外周血Treg水平比较 治疗后，2组患者的外周血Treg水平较治疗前显著降低(P<0.05)；与对照组比较，实验组患者的外周血Treg水平显著降低(P<0.05)。见表1。

表1 治疗前后2组患者外周血Treg水平比较±s)Tab.1 Comparison of Treg between two groups pre-and post- ±s)

*P<0.05，与治疗前比较，compared with pre-treatment；#P<0.05，治疗后与对照组比较，compared with control group post-tretment

2.2 治疗前后2组患者外周血CD8+T细胞水平比较 治疗后，2组患者的外周血CD8+T细胞水平较治疗前显著升高(P<0.05)；与对照组比较，实验组患者的外周血CD8+T细胞水平显著升高(P<0.05)。见表2。

表2 治疗前后2组患者外周血CD8+T细胞水平比较±s)Tab.2 Comparison of CD8+T between two groups pre-and post- treatment ±s)

*P<0.05，与治疗前比较，compared with pre-treatment；#P<0.05，治疗后与对照组比较，compared with control group post-tretment

2.3 治疗前后2组患者血清TSGF含量比较 治疗后，2组患者的血清TSGF含量与较治疗前显著降低(P<0.05)；与对照组比较，实验组患者的血清TSGF含量显著降低(P<0.05)。见表3。

表3 治疗前后2组患者血清TSGF含量比较±s)Tab.3 Comparison of TSGF between two groups before and after the ±s)

*P<0.05，与治疗前比较，compared with pre-treatment；#P<0.05，治疗后与对照组比较，compared with control group post-tretment

2.4 2组患者的临床疗效比较 治疗后，实验组患者的有效率为84.62%，显著高于对照组的53.85%(χ2=5.78，P<0.05)。见表4。

表4 2组患者的临床疗效比较[n(%)]Tab.4 Comparison of clinical effect between two groups[n(%)]

#P<0.05，与对照组比较，compared with control group

3 讨论

AEG的发病率不断上升，逐渐受到医学界的广泛关注。AEG的定义与病理分型尚未统一，目前多认为AEG相关的危险因素为胃食管反流病、Barrett’s 食管与食管裂孔、肠上皮化生、幽门螺杆菌感染、肥胖等[8]。研究认为，胃食管反流物的刺激会导致食管上皮细胞损伤，引起细胞上皮异常分化成柱状上皮来适应环境变化，出现肠化生和不典型增生，引起癌变。由于解剖位置特殊，早期AEG多无明显症状[9]，发现时多已进展为晚期AEG，化疗是晚期AEG主要的治疗手段。重组血管内皮抑素是新研发的一种抗肿瘤药物，能够作用于血管内皮细胞，对VEGF等促进血管生成的细胞因子有抑制作用[10]。恶性肿瘤增殖、转移的基础是新生血管的形成，重组血管内皮抑素抑制VEGF表达，妨碍新生血管的形成，阻断了肿瘤的营养供给，从而起到抑制肿瘤发展的作用。重组血管内皮抑素功能广泛，与其他化疗药物联合使用还能增强其疗效，已有研究表明重组血管内皮抑素联合化疗在非小细胞肺癌、乳腺癌、胰腺癌、骨和软组织肉瘤、胃癌等的治疗中，均取得了一定的临床疗效[11]。在本实验中，通过检测患者治疗前后患者外周血Treg、CD8+T细胞和血清TSGF水平，以及临床疗效的评估，来探讨重组血管内皮抑素对晚期AEG患者的治疗效果。

本研究结果发现，实验组患者的外周血Treg水平与对照组比较显著降低(P<0.05)，证实了重组血管内皮抑素对晚期AEG患者的免疫功能具有调节作用。恶性肿瘤的发生，不只与外来刺激导致细胞异常分化有关，还与机体的免疫功能关系密切。机体免疫功能正常，可以行使免疫监视和防御功能，及时清除分化异常的细胞，防止肿瘤发生；而免疫功能低下，分化异常的细胞不受控制的增殖，最终导致肿瘤发生。Treg是具有调节功能的T细胞亚群，能够抑制免疫反应，正常情况下可以维持自身免疫功能的稳定。曾有研究报道[12]，胃癌患者外周血中Treg水平高于健康对照组，异常升高的Treg水平导致机体免疫抑制，肿瘤细胞发生免疫逃逸，使得机体杀伤肿瘤细胞的功能减弱，导致肿瘤进展。

CD8+T细胞是T淋巴细胞亚群的一员，属于细胞毒性T细胞，对肿瘤细胞具有杀伤作用。CD8+T细胞能够识别肿瘤细胞并与之接触，释放穿孔素蛋白，使大量的离子和水进入肿瘤细胞，促进细胞溶解，同时释放细胞毒素，破坏肿瘤细胞核内的DNA，诱导细胞凋亡。有研究显示[13]，胃肠道癌患者外周血CD8+T细胞水平低于正常对照组，表明CD8+T细胞的形成受抑制，机体促进肿瘤细胞凋亡的作用减弱，这可能与Treg水平异常有关。本研究结果显示，实验组患者的外周血CD8+T细胞水平与对照组比较显著升高(P<0.05)，表明重组血管内皮抑素能够影响晚期AEG患者的免疫功能，加强抗肿瘤作用。

TSGF是一种可溶性肽类物质，由恶性肿瘤细胞分泌，是肿瘤特异性的生长因子。TSGF具有具有促进肿瘤新生血管生成增殖的作用，增加肿瘤的血液供应，促进肿瘤组织的生长和转移。在正常情况下，TSGF的分泌量极少，而在恶性肿瘤发生时，TSGF的含量随之增高，研究表明[14]，晚期上消化道恶性肿瘤患者血清TSGF水平明显高于正常人，且随治疗效果变动，可以作为肿瘤治疗效果评估的特异敏感性指标。本研究结果显示，实验组患者的血清TSGF含量与对照组比较显著降低(P<0.05)，表明重组血管内皮抑素能够降低晚期AEG患者血清TSGF水平，对肿瘤的治疗效果较好。

2组患者的临床疗效比较结果显示，实验组患者的有效率明显高于对照组(P<0.05)，证实了重组血管内皮抑素联合其他化疗方案具有协同作用，对晚期AEG患者的治疗效果明显。这可能与重组血管内皮抑素抑制肿瘤血管生成相关因子分泌，阻断肿瘤组织营养供应，调节机体的免疫功能，提高促进肿瘤细胞凋亡的作用有关。

本实验通过对52例晚期AEG患者外周血Treg、CD8+T细胞水平、血清TSGF含量及临床疗效检测结果进行分析，证实了重组血管内皮抑素能够明显降低晚期食管胃交接部腺癌患者外周血Treg水平和血清TSGF含量, 提高CD8+T细胞水平，提高治疗的有效率。本实验将进行分子机制方面研究，并对此结果做出进一步论证和分析。

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(编校：王冬梅)

Effect of recombinant endostatin on Treg, CD8+T cells ,TSGF in peripheral blood of patients with advance desophageal gastric junction adenocarcinoma and clinical observation

GUO Yu, REN Zhi-li, ZAHNG Rui-xin

(Department of Thoracic Surgery, Tangshan Gongren Hospital, Tangshan 063000, China)

ObjectiveTo analyse the effect of recombinant endostatin on Treg, CD8+T cells, tumor specific growth factor (TSGF) in peripheral blood of patients with advanced esophageal gastric junction adenocarcinoma and clinical efficacy observation.Methods52 patients who were diagnosed with acute cerebral infarction in our hospital were collected. All patients were randomly divided into experimental group and control group, 26 cases in each group. The control group was given OLF chemotherapy, the experimental group was treated with OLF chemotherapy regimen combined with recombinant endostatin. 21 days was 1 cycle, a total of 4 cycles.After treatment, the levels of Treg, CD8+T cells, serum TSGF and clinical efficacy were detected in all patients.ResultsAfter treatment, compared with control group,the peripheral blood Treg was significantly lower in the experimental group (P<0.05); the peripheral blood CD8+T cells level in the experimental group was significantly higher (P<0.05);the serum TSGF level in the experimental group was significantly lower (P<0.05);the effective of patients in the experimental group was higher (P<0.05).ConclusionRecombinant endostatin can significantly reduce the levels of Treg and serum TSGF in patients with advanced esophageal gastric junction adenocarcinoma, improve the level of CD8+T cells, and improve the efficiency of treatment, have guiding significance to clinical.

recombinant endostatin; advanced adenocarcinoma of esophagogastric junction; Treg; CD8+T cells; tumor specific growth factor; clinical efficacy

郭宇，女，本科，副主任护师，研究方向：食管癌，肺癌，E-mail：jgjdgfg@21cn.com。

R735.1

A

1005-1678(2015)08-0158-03