电化学指纹图谱法测定复方中药祛痘软膏剂含量①

祁永华，吴 迪，刘 丽，张 玲，方 丹，彭玉生，李守君

(1.佳木斯大学药学院，黑龙江 佳木斯 154007；2.黑龙江中医药大学佳木斯学院，黑龙江 佳木斯 154007)

电化学指纹图谱法测定复方中药祛痘软膏剂含量①

祁永华1,2，吴 迪2，刘 丽1，张 玲1，方 丹1，彭玉生1，李守君1

(1.佳木斯大学药学院，黑龙江 佳木斯 154007；2.黑龙江中医药大学佳木斯学院，黑龙江 佳木斯 154007)

目的：建立一种应用电化学指纹图谱技术测定复方中药祛痘软膏剂含量的方法。方法：采用电化学指纹图谱技术，以诱导时间为评价指标，对复方中药祛痘软膏剂含量进行测定。结果：中药浸膏粉检测范围6～34mg/mL，回归方程：t=6898-183.5c，R=0.9970，日内RSD为1.07%，日间RSD为1.68%，加样回收率RSD<1%，三批样品含量(相当标示量)在98.6%～101.4%，符合要求。结论：通过方法学考察，建立一种有效、便捷、可靠、准确地评价中药软膏剂的方法。

电化学指纹图谱；复方中药祛痘软膏；苦参；黄芩；芦荟

复方中药祛痘软膏剂是由苦参、黄芩和芦荟三种中药按等比例混合所得浸膏粉，与基质制备成O/W型软膏剂。基质成分主要为有机物，与主药分离困难，测量时会产生干扰，很难准确测定含量，因此，为测得软膏剂准确含量，不得不研究主药与基质的分离方法，费时且专业技术要求高，增加了软膏剂分析的难度[1～3]。电化学指纹图谱在中药领域被广泛应用，是一种方便快捷鉴别中药的方法[4,5]。李守君等人采用电化学指纹图谱技术优化大黄提取工艺及鉴别黄连真伪[6,7]，张海珍等人采用电化学指纹图谱(Electrochemicalfingerprint)技术测定蜂蜜中糖含量[8]。本文利用中药活性成分参与电化学振荡反应而软膏剂基质不参与这种反应这一原理，对复方中药祛痘软膏剂浸膏粉含量进行测定。该方法不需要分离主药和基质[9]，操作简便,结果准确,为中药软膏剂质量检测研究开拓新思路。

1 材料

数控超级恒温器(SC-15型，宁波海曙天恒仪器厂)；电化学工作站(LK2005型，天津兰力克科技有限公司)；电子天平(BP211D，德国Sartorius)；硫酸、硫酸锰、丙酮、溴酸钾均为分析纯，水均为二次蒸馏水；苦参、黄芩、芦荟购于药材市场(由黑龙江中医药大学陈效忠教授鉴定)。

2 方法

2.1 样品制备

取中药浸膏粉1.0021g，用20mL蒸馏水稀释，置于25mL容量瓶中定容，吸取上述溶液1、2、3、4、5mL分别置于25mL容量瓶中定容，作为对照品溶液；取空白基质和复方中药祛痘软膏剂各5g，置于25mL容量瓶中定容。

2.2 电化学指纹图谱测定方法

开启B-Z振荡系统，当温度达到(37±0.02)℃时，依次加入硫酸溶液、硫酸锰溶液、丙酮溶液各10mL，加入待测溶液4mL，搅拌15min，加入KBrO3溶液10mL开始计时，由电化学工作站记录电势(E)随时间(t)的变化，绘制指纹图谱。

2.3 精密度考察

精密称取浓度为70mg/g复方中药祛痘软膏剂10g，按2.2方法进行测量，重复测量5次，隔日同法测量5次。

2.4 加样回收率考察

精密称取浸膏粉和空白基质，配制成含量为50mg/g、70mg/g、90mg/g软膏，每种软膏精密称取5g，按2.2方法进行测量，每个样品平行测量3次。

2.5 复方中药祛痘软膏剂中药浸膏含量测定

按照2.2方法，对三批样品进行测量，每批样品平行测量3次。

3 结果

3.1 标准曲线的绘制

以诱导时间为评价指标，绘制诱导时间(t)与浓度(c)的曲线，得回归方程：t=6898-183.5c，R=0.9970，由图1可知，不同含量复方中药祛痘软膏剂的诱导时间随含量增大而减小，中药浸膏浓度在6～34mg/mL范围内线性相关良好。

图1 复方中药软膏剂标准曲线

3.2 空白对照品与供试品的电化学指纹图谱比较

由图2可知，空白基质的电化学指纹图谱在0～8000s内没有产生振荡波形，是一条平滑曲线，而供试样品在5000～7000s产生振荡图谱，表明空白基质在软膏剂检测计量范围内不产生电化学振荡，不会对中药软膏剂含量测定产生影响。

图2 空白对照品与供试品的电化学指纹图谱比较

a.复方中药祛痘软膏剂；b.空白基质

3.3 精密度加样回收率结果

日内RSD为1.07%，日间RSD为1.68%，回收率在98%～102%，均符合方法学要求。对三批样品进行测量，每批样品平行测量3次，由表1可知，三批样品的含量检测限度在98.6%～101.4%，均在90%～110%，符合药典软膏剂含量限度的规定，达到试验设计要求。

表1 样品测定结果 (n=3)

4 讨论

4.1 搅拌速度对复方中药软膏剂电化学指纹图谱的影响

搅拌速度主要影响反应溶液体系物质混合的均匀程度。由于软膏剂制备时原料大多为油脂类，具有一定的黏稠性，当被加入反应溶液体系时，提高了溶液的黏度，增加溶液均匀混合的难度。因此采用电化学指纹图谱测量软膏剂时，搅拌速度的选择较为重要，搅拌速度过低或过高，都会产生混合不均匀现象，获得的指纹图谱不理想。本实验通过实验测定，搅拌转数为600r/min时，获得指纹图谱较理想。

4.2 电化学指纹图谱鉴别复方中药软膏剂真伪的探讨

软膏剂含量测定的难点在于基质的干扰，采用高效液相色谱测定时，需要选择适当的溶媒溶解基质或主药[1]，将主药与基质分离。电化学指纹图谱法在中药应用中的特点是，在分析过程中是对中药群集信息的研究[10]，不必分离有效部位，尤其在复方中药分析研究时，这一特点表现出极大的优势。本文综合考虑上述因素，挖掘出，电化学指纹图谱技术具有解决上述问题的优势。通过对比基质、单味药和成品指纹图谱的区别，可以用来鉴别复方中药软膏剂是否含有处方药材，从而，可建立一种鉴别复方中药软膏剂真伪的便捷新方法。

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[10]袁斌.电化学指纹图谱与中药群集信息表征[D].天津:南开大学,2007，7-8

The Determination of electrochemical fingerprint on compound Chinese medicine acne ointments content

QIYong-hua1,2,WUDi2,LIULi1,ZHANGLing1,FANGDan1,PENGYu-sheng1,LIShou-jun1

(1.College of Pharmacy of Jiamusi University,Jiamusi 154007, China;2.Heilongjiang University of Chinese Medicine Jiamusi School, Jiamusi 154007,China)

Objective: To establish a method in which an electrochemical fingerprint technology is used to determine the content of the compound medicine acne ointments. Methods: Electrochemical fingerprint technology was used to determine the acne ointment of Chinese medicine with the induction time as the evaluation index. Results: The detection range of Chinese medicine extract powder was 6～34mg/mL. The regression equation is t=6898-183.5c, R=0.9970, days’ RSD 1.07%, daytime RSD 1.68%, Recoveries RSD <1%. The content of the sample batches (The content of the equivalent amount of marked out) ranged between 98.6%～101.4%. Conclusion: By the methodological study, an effective, convenient, reliable, and accurate evaluation of Chinese medicine ointment approach is established.

electrochemical fingerprint; acne ointment of Chinese medicine; Sophora; skullcap; aloe

佳木斯大学研究生科技创新项目，编号：LM2014_059。

祁永华(1982～)女，宁夏固原人，在读硕士研究生。

李守君(1962～)男，黑龙江绥化人，硕士，教授，硕士研究生导师。E-mail:lishoujun1962@163.com。

R

A

1008-0104(2015)02-0064-02

2014-12-03)