支气管哮喘儿童血清1，25－(OH)2D3与MMP－9的相关性研究

支气管哮喘儿童血清1，25－(OH)2D3与MMP－9的相关性研究

儿童支气管哮喘是儿童最常见的慢性呼吸道疾病，是一种高气道反应性的炎症性疾病，涉及到多种炎症介质和炎症细胞对气道的作用［1］。血清1，25－(OH)2D3是人体内非常重要的维生素D活性代谢产物，也有文献称之为一种前体激素，其活性型为1，25－(OH)2D3。其作用原理与经典的类固醇激素一样，主要是通过维生素受体(Vitamin D receptor，VDR)结合而产生的生物学效应。最近的流行病学研究表明补充1，25－二羟维生素D3不仅可以有效改善激素的治疗反应，而且还可以提高CD4+细胞在地塞米松作用下分泌IL－10的能力［2］。MMP－9是一类结构中含有锌和钙等金属离子的蛋白酶，可以降级细胞外基质(ECM)蛋白，在炎症的发病过程中起着重要作用。虽然慢性哮喘已经证实多是由嗜酸性粒细胞等炎症因子的脱颗粒造成，但是近几年大量研究表明气道重塑所造成的不可逆性的气流阻塞和肺功能损害也是慢性哮喘的重要因素之一。张玉彩等在研究中发现在慢性哮喘大鼠模型中1，25－(OH)2D3不但可以提高地塞米松的抗炎能力，而且还有一定的免疫调节的作用［3］。本研究通过比较三个程度哮喘儿童与正常儿童血清中1，25－(OH)2D3和MMP－9的含量来探讨1，25－(OH)2D3与气道重塑的关系，并有效地针对性地为治疗儿童支气管哮喘提供一个新的理论依据。

1 资料与方法

1.1 临床资料:收集2014年1月至10月住院并确诊为哮喘的患儿90例，年龄为1～6岁，符合支气管哮喘的诊断标准［4］，并且根据以上标准选取哮喘儿童轻度持续级、中度持续级和重度持续级三个级别，每组30例。随机选取健康体检儿童30例。所有儿童均无慢性肝肾疾病，均无其他代谢性疾病。各组间性别和年龄的构成比均无统计学意义。

1.2 方法:入托体检的健康儿童，清晨空腹，肘正中静脉抽血5mL;哮喘儿童在治疗前，清晨空腹，肘正中静脉抽血5mL。所有标本3000转/分离心10min，分离出血清，－20℃冰箱保存等待统一测量。提前30min从冰箱取出1，25－(OH)2D3和MMP－9检测试剂盒(大连宝晶技术有限公司)，室温放置。严格按照试剂盒说明，使用酶联免疫吸附法对标本进行检测。为了保证实验结果的准确性和可靠性，实验过程由同一人完成，减少主观误差。

1.3统计学处理:采用SPSS软件17.0对检验结果进行统计学分析。P＜0.05和P＜0.01表明差异有统计学意义。

2 结果

2.1 从轻、中、重三个程度的哮喘患儿的血清1，25－(OH)2D3的含量来分析:轻度持续期哮喘患儿的血清1，25－(OH)2D3与对照组比较，无明显变化，无统计学意义;中度持续期哮喘患儿的血清1，25－(OH)2D3含量低于对照组(P＜0.05);重度持续期哮喘患儿的血清1，25－(OH)2D3含量明显低于对照组(P＜0.01)(见表1)。

表1 各组儿童1，25－(OH)2D3含量(±s)

表1 各组儿童1，25－(OH)2D3含量(±s)

注:*表示与健康体检组比较;#表示与轻度持续组比较;Δ表示与中度持续组比较

组别例数1，25－(OH)2D3(ng/mL健康体检组3036.17±12.87轻度持续组3028.51±6.01*中度持续组3022.21±8.41*#重度持续组3015.11±4.71*#Δ

2.2 从轻、中、重三个程度的哮喘患儿血清中的MMP －9的含量来分析:轻度持续期哮喘患儿的血清MMP－9与对照组比较，无明显变化，无统计学意义;中度持续期哮喘患儿的血清MMP－9含量高于对照组(P＜0.05);重度持续期哮喘患儿的血清MMP－9含量明显高于对照组(P＜0.01)(见表2)。

表2 各组儿童MMP－9含量(±s)

表2 各组儿童MMP－9含量(±s)

注:*表示与健康体检组比较;#表示与轻度持续组比较;Δ表示与中度持续组比较

组别例数MMP－9(pg/mL)健康体检组300.53±0.25轻度持续组300.99±0.02*中度持续组303.29±1.21*#重度持续组305.87±1.43*#Δ

3 讨论

儿童支气管哮喘是一种气道的变态反应疾病，它由多个因子诱发，容易反复的发作。儿童的哮喘常在夜间或者清晨发作，是儿童期的常见病和多发病。哮喘的发病机制尚不清楚，大量的研究资料表明嗜酸性粒细胞和肥大细胞的脱颗粒，释放炎症介质造成的气道炎症损伤已经成为确证的结论。近几年对哮喘的研究则把重点放在了气道重塑这个方面。气道重塑的病理结构改变主要表现为上皮细胞的脱落和再生、杯状细胞和腺体的增生，上皮下胶原和细胞外基质(ECM)的沉积平滑肌细胞聚集增多，血管形成及血管软骨减少［5］。这种气道的重塑最终导致气流不可逆阻塞，肺功能损害。Araujo［6］研究发现MMP－9是ECM降解的关键酶，不仅是其代谢的限速酶，而且是导致气道重塑的关键原因。除此之外，在重症哮喘患者的支气管平滑肌细胞中发现了MMP－9的高表达，以上这些报道都表明了MMP－9参与哮喘的病理过程。

目前，对于哮喘儿童的治疗主要是使用布地奈德等激素药物的雾化治疗。激素的治疗效果虽然明显，但是长期使用的不良反应更为明显，尤其是对儿童的影响更是不容乐观。本文旨在研究支气管哮喘儿童血清中的1，25－(OH)2D3是否与气道重塑有所关联，这样就可为临床提供一种降低哮喘反应的新方法。宋颖芳［7］等人仅在大鼠哮喘模型中研究过大鼠血清中1，25－(OH)2D3可以降低MMP－9的含量，降低了气道重塑，并没有在儿童支气管哮喘的血清中研究过两者的关系，没有在儿科治疗的理论上对其加以诠释。朱永洁等［8］在研究中得出了1，25－(OH)2D3可以辅助治疗儿童支气管哮喘的结论，只是从降低气道炎症反应的方面证实了其治疗作用。本文研究发现哮喘患儿血清中的MMP－9含量高于对照组，并且与哮喘的严重程度相关，哮喘越严重，表现出血清中MMP－9的含量越高。这表明1，25－(OH)2D3对哮喘有一定的抑制作用，并且降低了MMP－9在支气管平滑肌细胞的高表达，这与宋颖芳等人在大鼠模型的研究中得出的结论相一致。最近的流行病学研究表明补充1，25－二羟维生素D3不仅可以有效改善激素的治疗反应，而且还可以提高CD4+细胞在地塞米松作用下分泌IL－10的能力。此次实验从患儿血清的1，25－二羟维生素D3和MMP－9的相关性来分析，得出了1，25－二羟维生素D3可以降低患儿血清MMP－9的表达，改善气道重塑，治疗儿童支气管哮喘的结论。以上结论提示临床可以使用1，25－二羟维生素D3辅助治疗儿童哮喘，此方法较为安全，具有一定的前景，值得进一步的深入研究。

［1］Sun B，Karin M.NF－κB signaling liver disease and hepatoprotective agents［J］.Oncogene，2008，27(48):6224～6228.

［2］Xysrrakis E，Kusumakar S，Boswell S，et al.Reversing the defective induction of IL－10 secreting regulatory T cells in glucocorticoid－resistant asthma patients［J］.Clin Invest，2006，116:146～155.

［3］张玉彩，费艳，张林.哮喘儿童血清1，25－(OH)2D3与IL－10水平及肺功能的相关性研究［J］.成都医学院学报，2013，8(3):333～335.

［4］中华医学会儿科分会呼吸学组.儿童支气管哮喘诊断与防治指南［J］.中华儿科杂志，2008，42(10):100～106.

［5］Bergeon C，Boulet LP.Strucctural changes in airway diseases characteristics，mechanisms，consequences and pharmacologic modulation［J］.Chest，2006，129(4):1068～1087.

［6］Araujo BB，Dolhnikoff M，Silva LF.Extracellular matrix components and regulators in the airway smooth muscle in asthma［J］.Eur Respir，2008，32(1):61～69.

［7］宋颖芳，洪景芳.1，25－(OH)2D3对慢性哮喘小鼠气道重塑中MMP－9及NF－κB表达的影响［J］.中国呼吸与重症监护杂志，2013，1(12):36～40.

［8］朱永洁，周晓英.支气管哮喘儿童血清1，25－(OH)2D3和CRP测定的临床意义［J］.上海预防医学，2012，24(12): 702～703.

熊慧华1，温艳1，李玉华1，刘艳芳1，张中敏2，冯毅雯1
(1.河北省承德市妇幼保健院，河北承德067000 2.承德附属医院承钢分院，河北承德067102)

目的:探讨支气管哮喘患儿血清1，25－(OH)2D3与基质金属蛋白酶9(MMP－9)的关系，为治疗患儿哮喘提供一个新的方法和理论依据。方法:收集本院住院的支气管患儿90例，分为轻度持续级、中度持续级和重度持续级三个级别，每组30例。随机选取30例健康体检儿童为对照组。用酶联免疫吸附法测定各组血清中的1，25－(OH)2D3和MMP－9的含量。结果:轻度哮喘组血清中的1，25－(OH)2D3和MMP－9的含量与对照组相比无统计学意义;中度哮喘组和重度哮喘组血清中的1，25－(OH)2D3和MMP－9的含量与对照组相比均有统计学意义。结论:哮喘患儿可以通过补充1，25－(OH)2D3来降低MMP－9在气道的高表达，减轻气道重塑，改善肺部功能，从而达到治疗支气管哮喘的目的。

哮喘;1，25－二羟维生素D3;基质金属蛋白酶9

The Correlation of Content of Serum 1，25－(OH)2D3and Level of MMP－9 of Children with Asthma

XIONG Huihua，WEN Yan，LI Yuhua，et al
(Children and Women Health Care Hospital of Chengde，Hebei Chengde067000，China)

Objective:To explore the correlation between the level of serum 1，25－(OH)2D3and MMP －9 in children with asthma.Method:90 children with asthma were considered as asthma group，30 healthy children were considered as control group.30 cases of mild persistent group，30 cases of moderate persistent group and 30 cases of severe persistent group were chosen in the asthma children.The level of 1，25－(OH)2D3and MMP－9 were measured by enzyme－linked immunosorbent assay(ELISA).Result:The level of 1，25 －(OH)2D3and MMP－9 in the persistent group was not correlated with the control group.The level of 1，25 －(OH)2D3and MMP－9 in the moderate persistent group and severe persistent group were correlated with the control group.Conclusion:1，25－(OH)2D3can down－regulate the level of the MMP－9 and alleviate the established chronic asthma－induced airway remodeling，thus 1，25－(OH)2D3can improve the lung function and treat the asthma.

Asthma;1，25－(OH)2D3;MMP－9

B

10.3969/j.issn.1006－6233.2015.07.024

1006－6233(2015)07－1131－04