地菍乙酸乙酯提取部位对糖尿病小鼠血糖、血脂及抗氧化作用的影响

李 丽 罗泽萍 周焕第 杨秀芬

(广西中医药大学药学院药理教研室，广西 南宁 530001)

地菍乙酸乙酯提取部位对糖尿病小鼠血糖、血脂及抗氧化作用的影响

李 丽 罗泽萍 周焕第 杨秀芬

(广西中医药大学药学院药理教研室，广西 南宁 530001)

目的 研究地菍乙酸乙酯提取部位对糖尿病(DM)小鼠血糖、血脂及抗氧化水平的影响。方法 腹腔一次性注射链脲佐菌素150 mg/kg制备DM小鼠模型，治疗组分别按地菍乙酸乙酯提取部位高、中、低(60、40、20 g/kg)剂量每天灌胃1次，正常对照组和模型组则以等体积蒸馏水灌胃，连续10 d，观察小鼠空腹血糖(FPG)、总胆固醇(TC)、甘油三酯(TG)、超氧化物歧化酶(SOD)活性、丙二醛(MDA)含量，计算肝脏、肾脏脏器指数。结果 与DM模型组小鼠比较，地菍乙酸乙酯提取部位给药组小鼠血糖、TC、TG显著降低(P<0.01或P<0.05)，血清SOD活性明显升高(P<0.01或P<0.05)，MDA含量明显降低(P<0.01)，肾脏指数也明显降低(P<0.01)。结论 地菍乙酸乙酯提取部位能明显降低DM小鼠FPG，改善血脂代谢紊乱，并具有抗氧化作用。

地菍；糖尿病；血糖；血脂；抗氧化

地菍为野牡丹科植物地菍的全草,在广西桂北瑶族地区，被称为“莫翁样”，是瑶医药的常用药材之一〔1,2〕。关于地菍抗糖尿病(DM)的药效学研究发现地菍水提物具有降血糖、降血脂作用〔3～5〕。本实验对地菍降血糖活性部位进行研究，采用腹腔一次性注射链脲佐菌素(STZ)建立小鼠DM模型，观察地菍乙酸乙酯提取部位对血糖、血脂及抗氧化水平的影响，并探讨可能机制。

1 材料与方法

1.1 药品与试剂 地菍药材购自南宁市小瑶王药店，由本校中药鉴定教研室鉴定为野牡丹科植物地菍(MelastomadodecandrumLour.)的干燥全草。药材加95%乙醇浸泡过夜，加热回流提取3次，每次1 h，过滤，合并滤液，浓缩得乙醇总浸膏。总浸膏与硅胶(1∶2)拌样，依次用石油醚、乙酸乙酯、正丁醇加热回流萃取，分别浓缩成浸膏，本实验取乙酸乙酯部位备用。STZ,美国Sigma公司产品(货号：S0130，批号：031M1287V)(STZ溶液配制：取STZ溶于0.1 mol/L的柠檬酸-柠檬酸三钠缓冲液，pH4.5，现配现用)。格列苯脲，山西云鹏制药有限公司，批号：A110404。葡萄糖氧化酶法测定试剂盒(批号：1203021),总胆固醇(TC)测定试剂盒(批号1111051)，甘油三酯(TG)测定试剂盒(批号：0312061)，购自四川省迈克科技有限责任公司。丙二醛(MDA)测定试剂盒(批号：20120425)，超氧化物歧化酶(SOD)测试盒(批号：20120516)，购自南京建成生物工程研究所。

1.2 仪器 TU-1901双光束紫外可见光分光光度计：北京普析通用仪器有限责任公司；台式离心机：16K，珠海黑马医学仪器有限公司；旋转蒸发仪：上海亚荣生化仪器厂。

1.3 实验动物 昆明种小白鼠，清洁级，雌雄各半,体重(20±2)g,由广西中医药大学实验动物中心提供，实验动物使用许可证号：SYXK桂2010-0001。

1.4 方法

1.4.1 小鼠DM模型建立、分组及给药 取小鼠100只，除正常对照组12只外，其余小鼠腹腔注射新鲜配制的STZ溶液(150 mg/kg)，72 h 后 ,对禁食不禁水8 h的小鼠眼眶后静脉丛取血，测血糖值，以空腹血糖(FPG)≥ 8.0 mmol/L即为DM模型成功并纳入正式实验。DM小鼠随机分为5 组，每组12只，即模型组、格列苯脲组(格列苯脲0.4 g/kg)、地菍乙酸乙酯提取部位高、中、低(60、40、20 g生药/kg)剂量组。各组小鼠均灌胃给予相应药物，正常对照组和模型组给予等容量蒸馏水(20 ml/kg)，每日灌胃1次，连续给药10 d。

1.4.2 指标检测 于末次给药后 1 h(禁食不禁水8 h)，小鼠拔眼球取血，分离血清，按试剂盒说明测定FPG、TC、TG、SOD、MDA等指标。小鼠处死后，剪取肝脏、肾脏称重,计算脏器指数(脏器指数=脏器湿重÷体重×100%)。

2 结 果

2.1 地菍乙酸乙酯提取部位对DM小鼠FPG的影响 与正常对照组比较，给药前(0 d)各组小鼠FPG明显升高(P<0.01)，说明STZ致DM小鼠模型成功建立。给药10 d后，与模型组比较，格列苯脲组、地菍乙酸乙酯提取部位组小鼠FPG显著减低(P<0.01或P<0.05)。见表1。

2.2 地菍乙酸乙酯提取部位对DM小鼠血脂代谢的影响 与正常对照组比较，模型组小鼠TC、TG显著升高(P<0.01)，说明模型组小鼠血脂代谢升高。与模型组比较，格列苯脲组、地菍乙酸乙酯提取部位高、中剂量组小鼠TC、TG显著降低(P<0.01或P<0.05)。见表2。

表1 地菍乙酸乙酯提取部位对STZ致DM小鼠FPG的影响

与正常对照组比较：1)P<0.05，2)P<0.01；与模型组比较：3)P<0.05，4)P<0.01；下表同

表2 地菍乙酸乙酯提取部位对STZ致DM小鼠血脂的影响

2.3 地菍乙酸乙酯提取部位对DM小鼠SOD活性及MDA含量的影响 与正常对照组比较，模型组小鼠SOD活性明显降低(P<0.01)，MDA含量明显增加(P<0.01)，表明模型组小鼠抗氧化能力明显低于正常对照组。与模型组比较，格列苯脲组、地菍乙酸乙酯提取部位组小鼠SOD活性显著升高(P<0.01或P<0.05)，MDA含量明显降低(P<0.01)。见表3。

2.4 地菍乙酸乙酯提取部位对DM小鼠脏器指数的影响 与正常对照组比较，各组小鼠肝脏指数无明显变化(P>0.05)，而模型组小鼠肾脏指数显著升高(P<0.01)。与模型组比较，各组小鼠肝脏指数无明显变化(P>0.05)，格列苯脲组、地菍乙酸乙酯提取部位各剂量组小鼠肾脏指数则显著降低(P<0.01)。见表4。

表3 地菍乙酸乙酯提取部位对STZ致DM小鼠血清MDA含量及SOD活性的影响

表4 地菍乙酸乙酯提取部位对STZ致DM小鼠脏器指数的影响±s)

3 讨 论

STZ是胰岛β细胞毒剂，STZ通过自由基反应损伤胰岛细胞膜及有关细胞器的膜结构，使膜脂质过氧化，进而损伤β细胞引发DM〔6〕。本实验结果提示小鼠实验性2型糖尿病模型建立成功。地菍乙酸乙酯提取部位可降低DM小鼠空腹血糖，降低TC、TG，显著改善脂质代谢紊乱。SOD是机体细胞内清除氧自由基的多种酶之一，能催化氧自由基转化为氧和过氧化氢，从而保护组织细胞免受氧自由基的损伤〔7〕。在长期高糖诱导下，SOD等分子发生了非酶性糖基化从而使酶活性降低，对过氧化氢(H2O2)清除减少，H2O2可通过一系列链锁式反应生成更多其他的自由基，过多的自由基使线粒体膜多不饱和脂肪酸发生脂质过氧化反应，形成脂质过氧化物，后者分解产生MDA〔8〕。本实验结果提示地菍乙酸乙酯提取部位能改善DM小鼠自由基代谢异常，对预防糖尿病并发症发生具有益处。DM小鼠肾脏脏器指数明显升高，可能是高血糖导致肾功能损伤引起的，而地菍乙酸乙酯提取部位显著降低肾脏指数，提示其有一定的肾脏保护作用。

1 覃迅云，罗金裕，高志刚.中国瑶药学〔M〕.南宁：广西民族出版社，2002:712.

2 李 丽，周 芳，黄琼珍.地菍的化学成分和药理作用研究进展〔J〕.广西中医学院学报，2011；14(1)：73-5.

3 李 丽，周 芳，罗文礼.地菍水提物对四氧嘧啶致糖尿病小鼠的降糖作用〔J〕.海峡药学，2008；20(12)：22-3.

4 李 丽，周 芳.地菍提取物对高血糖模型小鼠血糖的影响〔J〕.中国实验方剂学杂志，2011；17(20)：187-9.

5 李 丽，罗泽萍，周焕第，等. 地菍提取物降血脂作用的实验研究〔J〕.时珍国医国药，2012；23(11)：2783-4.

6 张成秋，杨纯珍，葛志明，等.糖尿病心血管病变与一氧化氮及一氧化氮合酶的关系〔J〕.中国老年学杂志，2006；26(3)：262-8.

7 杨桂珍，穆景阳，梁 军，等.沙棘提取物对糖尿病ICR小鼠血糖及氧化功能的影响〔J〕.中国老年学杂志，2011；31(10)：1788-90.

8 田 刚，付雯雯，周小涵，等.心悦胶囊对2型糖尿病大鼠血糖及血脂代谢的影响〔J〕.中国老年学杂志，2012；32(15)：3236-8.

〔2013-09-16修回〕

(编辑 赵慧玲/曹梦园)

广西自然科学基金资助项目(2013GXNSFAA019134)；广西高等学校科研项目(201203YB107)；广西研究生教育创新计划资助项目(2011106001007M11)

李 丽(1973-)，女，博士，教授，硕士生导师，主要从事中药和民族药药效及生化药理研究。

R285.5

A

1005-9202(2015)12-3250-03；

10.3969/j.issn.1005-9202.2015.12.028