PTEN、p53和Survivin表达在胃癌组织中的意义

张海鹏,梁鹏锋,苗 峰(.陕西省中医医院普外科，西安 7000;.陕西省渭南市中心医院普外科 74000;.陕西省西安市儿童医院新生儿外科 70056)



·论 著·

PTEN、p53和Survivin表达在胃癌组织中的意义

张海鹏1,梁鹏锋2,苗 峰3(1.陕西省中医医院普外科，西安 710003;2.陕西省渭南市中心医院普外科 714000;3.陕西省西安市儿童医院新生儿外科 710056)

目的 探讨PTEN、p53和Survivin表达在胃癌组织中的临床意义。方法 选择2010～2013年陕西省中医医院收治的60例胃癌患者的胃癌标本作为A组，选择同期于陕西省中医医院手术切除吻合口切缘处的正常胃黏膜60例作为B组，另取不典型增生胃黏膜石蜡标本65例作为C组，采用免疫组织化学链霉亲和素方法检测Survivin、PTEN和p53基因在3组中的表达情况。结果 胃癌组织中的Survivin、p53基因阳性率高于其他两组，差异具有统计学意义(P<0.05)；Survivin基因的阳性表达和p53阳性呈正相关(P<0.05)，和PTEN阴性率呈负相关(P<0.05)；统计结果显示，3种基因在胃癌不同病理指标中的阳性表达差异有统计学意义(P<0.05)。结论 Survivin、PTEN和p53基因异常表达和胃癌发生有密切的关系，其中PTEN与p53基因是判断胃癌生物学行为的重要指标，Survivin、PTEN、p53基因在胃癌发生及发展中有着相互协同的作用。

Survivin基因； PTEN基因； p53基因； 胃癌

胃癌是世界上发病率较高的癌症，中国是一个胃癌高发国家，依据目前的研究结果，胃癌病因学、发病机制和胃癌的转移机制等尚仍未完全研究清楚[1-2]。本研究通过免疫组化法检测胃癌标本、不典型增生胃黏膜以及正常胃黏膜的Survivin、张力蛋白同源物基因(PTEN)和p53的表达情况，并进行比较，同时分析各基因表达和患者的一般情况、肿瘤的浸润深度及分化程度等参数的相关性，进一步阐明在胃癌的发生、发展中的具体分子调控机制，从而有利于判断胃癌预后及为相应的治疗提供重要的理论依据，现将情况报道如下。

1 资料与方法

1.1 一般资料 选择2010～2013年陕西省中医医院收治的60例胃癌患者的胃癌标本作为A组，选择同期于陕西省中医医院手术切除吻合口切缘处的正常胃黏膜60例作为B组，另取不典型增生胃黏膜石蜡标本65例作为C组。A组中男38例，女22例，年龄48～75岁，平均(53.5±2.8)岁。B组中男34例，女26例，年龄46～77岁，平均(52.8±2.7)岁。C组中男35例，女30例，年龄46～78岁，平均(54.5±3.6)岁。所有标本均在术后用40 g/L甲醛进行固定处理，并使用石蜡包埋。3组患者在性别、年龄等一般资料方面差异无统计学意义(P>0.05)，具有可比性。

1.2 方法 兔抗人PTEN、山羊抗人Survivin相关性抗体、p53相关性抗体，山羊抗兔及兔抗山羊SABC试剂盒和DAB显色液均于博士德生物工程有限公司购买。标本进行常规的脱蜡水化之后，置于0.01 mol/L的枸橼酸缓冲液中进行微波抗原修复，并在室温下进行冷却。按照SABC试剂盒的说明书进行相关的操作，其中DAB显色及苏木素的复染使用已知阳性片与PBS分别进行阳性与阴性的对照。

1.3 评价指标 (1)Survivin基因阳性表达判断：染色阳性信号棕黄色颗粒，大部分在细胞质，偶在细胞核。其中每张切片检测5个视野，染色强度高于背景则为阳性，阳性细胞数小于10%为(+)，10%～60%为(++)，高于60%则为(+++)，染色强度和背景之间无明显差异则为(-)。(2)PTEN基因的阳性表达判断：染色阳性呈棕黄色颗粒，于细胞质内，同样每张切片检测5个视野，阳性细胞小于10%为(-)，阳性细胞10%～40%则为(+)，介于40%～70%为(++)，高于70%则为(+++)。(3)突变型p53基因阳性表达判断：染色阳性呈棕黄色颗粒，在细胞核内。每张切片检测5个视野，其中阳性细胞数小于5%则为(-)，5%～25%则为(+)，25%～50%则为(++)，高于50%为(+++)。

1.4 统计学处理 采用SPSS18.0统计软件进行统计学分析，采用等级秩和检验及χ2检验，以P<0.05为差异有统计学意义。

2 结 果

2.1 各组中Survivin基因、PTEN基因、突变型p53基因表达情况比较 胃癌组织中的Survivin基因、p53基因阳性率高于其他两组，差异有统计学意义(P<0.05)。见表1。

表1 各组中Survivin基因、PTEN基因、突变型p53基因表达情况比较

2.2 Survivin基因、p53基因和PTEN表达之间的相关性 Survivin基因的阳性表达和p53阳性关系密切呈正相关(P<0.05)；和PTEN阴性率呈负相关(P<0.05)，具体见表2。

表2 Survivin基因、p53基因和PTEN表达之间的相关性

表3 胃癌各病理指标和Survivin基因、PTEN基因、p53 基因阳性表达之间的关系[n(%)]

注：与中、高分化胃癌相比，aP<0.05；与浸润至浆膜层外胃癌相比，bP<0.05；与无脏器转移胃癌相比，cP<0.05；与无淋巴结转移胃癌相比，dP<0.05。

2.3 胃癌各病理指标和Survivin基因、PTEN基因、p53基因阳性表达之间的关系 统计结果显示，3种基因在胃癌不同病理指标中的阳性表达差异有统计学意义(P<0.05)，具体见表3。

3 讨 论

已有研究表明，肿瘤细胞不仅存在增殖及分化方面的异常，还具有凋亡的异常，并且在细胞凋亡抑制方面，和恶性肿瘤发生、发展之间具有较为密切的关系。Survivin基因属于一种凋亡抑制基因，在人体的生理状态之下，通过细胞凋亡的发生，对体内衰老的及异常的细胞进行清除，对人体内的组织动态平衡的保持具有积极的作用。研究表明在多步骤的肿瘤发生早期，多种因素均具有凋亡抑制作用，这样在促进细胞继续增殖方面就产生了有利的条件，同时有利于异常基因进一步积聚和表达，使细胞更加趋于恶性转化，对肿瘤发生和发展产生了积极的作用[3-6]。本研究中Survivin基因在胃癌中的阳性表达率为75.00%，在不典型增生胃黏膜中阳性表达率为40.00%，而在正常的胃黏膜中则不表达，结果提示Survivin基因表达在胃癌恶性转化早期及进展期较为活跃，Survivin基因和胃癌发生、发展具有密切的关系，Survivin基因在胃癌组织和不典型增生癌前病变中异常的表达抑制了异常突变细胞凋亡的发生，扰乱细胞的生长及凋亡，从而促使了细胞逃离生长监控，加剧了肿瘤细胞的生长。PTEN基因是一种抑癌基因，关于PTEN蛋白的表达有较多的研究，结果认为PTEN等位基因失活可通过PTEN蛋白的表达丢失来反映，可以用免疫组织化学方法进行相应的评估。

p53基因蛋白在17号染色体的短臂上，蛋白产物定位在细胞核中，属于一种含有393个氨基酸的核蛋白，野生型p53的作用是抑制细胞的过度增殖，同时诱导细胞的凋亡，协调细胞凋亡和增殖的速度，同时具有防止细胞异常蓄积及恶性生长的作用，p53基因突变之后，其表达就失去了抑制细胞增殖的作用，从而导致细胞增殖过度。p53基因是迄今为止发现的和胃癌关系最为密切的一种肿瘤抑制基因。p53缺失或者发生突变已经被证实和胃癌发生、发展具有密切关系[7-12]。本研究结果显示，胃癌组织中的Survivin基因、p53基因阳性率高于其他两组，差异具有统计学意义(P<0.05)；Survivin基因的阳性表达和p53阳性关系密切(P<0.05)，呈正相关，和PTEN阴性率呈负相关(P<0.05)；统计结果显示，3种基因在胃癌不同病理指标中的阳性表达差异有统计学意义(P<0.05)。研究结果显示，胃癌中PTEN和突变型p53的表达呈负相关关系。胃癌发生是一个关于多种癌基因激活及抑癌基因失活过程的协调作用，PTEN与p53基因在胃癌组织中表达关系说明两者对胃癌发生、发展具有协同的作用。本研究同时发现胃癌组织中Survivin基因表达和PTEN基因表达具有负相关的关系，由此可见两者在胃癌发病过程中也具有协同的作用。

综上所述，Survivin、PTEN 和p53基因异常表达和胃癌发生有密切的关系，其中PTEN与p53基因是判断胃癌生物学行为的重要指标，Survivin、PTEN、p53基因在胃癌发生及发展中有着相互协同的作用。

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Clinical significance of PTEN,p53 and Survivin expression in gastric carcinoma

ZHANGHai-peng1,LIANGPeng-feng2,MIAOFeng3

(1.DepartmentofSurgery,ShaanxiProvincialHospitalofTraditionalChineseMedicine,Xi′an,Shaanxi710003,China;2.DepartmentofGeneralSurgery,WeinanMunicipalCentralHospital,Weinan,Shaanxi714000,China;3.DepartmentofNeonatalSurgery,Xi′anMunicipalChildren′sHospital,Xi′an,Shaanxi710056,China)

Objective To investigate the expression and clinical significance of PTEN,p53 and Survivin in gastric carcinoma tissue.Methods The gastric carcinoma samples in 60 cases of gastric carcinoma in the 2010 and 2013 in Shaanxi Provincial Hospital of Traditional Chinese Medicine were selected as the group A,at the same period 60 samples of normal gastric mucosa in anastomosis stoma incisal edge in this hospital as the group B and 65 paraffin samples of atypical dysplasia gastric mucosa as the group C.The immunohistochemical streptavidin-biotin method was adopted to detect the expression of Survivin,PTEN and p53 gene in these three groups.Results The positive rate of Survivin and p53 gene in the gastric cancer tissue were higher than the that in the other two groups,the difference was statistically significant(P<0.05);the positive expression of Survivin gene was closely related with the p53 positive(P<0.05),showing the positive correlation,and the negative correlated with PTEN negative rate (P<0.05);the statistic results showed that the positive expression of three genes had statistical difference among different pathological indicators of gastric cancer (P<0.05).Conclusion The abnormal expression of Survivin,PTEN and p53 gene has the close relation with gastric cancer occurrence,in which PTEN and p53 gene are the important indicator for judging the biological behavior of gastric cancer,Survivin,PTEN and p53 gene have a mutual synergistic effect in the occurrence and development of gastric carcinoma.

Survivin gene; PTEN gene; p53 gene; gastric carcinoma

张海鹏,男,本科，主治医师，主要从事肝胆胃肠方面的临床工作。

10.3969/j.issn.1672-9455.2015.18.020

A

1672-9455(2015)18-2700-03

2015-04-15

2015-05-07)