SY SMEX X T-4000i血液分析仪应用性能评价

夏红安，刘颖，鲁小龙

广安市人民医院 检验科，四川 广安638001

SY SMEX X T-4000i血液分析仪应用性能评价

夏红安，刘颖，鲁小龙

广安市人民医院 检验科，四川 广安638001

目的 对SYSMEX XT-4000i血液分析仪的性能进行验证及评价。方法 使用临床常规血液、体液标本和仪器配套质控物对XT-4000i的本底计数、携带污染率、精密度（批内、日间）、线性范围、准确度，仪器间的比对等分析性能进行验证和评价。结果 XT-4000i测定的本底计数均低于厂商设计规定的要求；XT-4000i检测血液标本白细胞、红细胞、血红蛋白含量、血小板4项，其携带污染率低，精密度、线性范围、准确度均良好，其白细胞分类计数与显微镜分类具有相关性；XT-4000i 检测体液标本白细胞、红细胞计数及白细胞分类与手工法检测结果具有较高的相关性。结论 XT-4000i血液分析仪性能良好，可以较好地满足临床常规血液标本及体液标本的检测要求。

血液分析仪；性能评价；体液细胞检测；质量控制

临床血液学检验是临床和实验室最常规、最基础的一项检验项目，全血细胞分析的准确与否对临床医生判断疾病及治疗非常重要。SYSMEX XT-4000i血液分析仪（下称XT-4000i）是日本SYSMEX公司生产的一台性能较高、自动化程度较强的五分类血液分析仪，同时该仪器增加了体液细胞的分析模式，使体液常规的细胞检测成为可能，为了验证其可靠性，本研究依照国家相关行业文件对仪器进行分析评价，现报告如下：

1 材料与方法

1.1 材料

1.1.1 测定样品

定值样本采用SYSMEX公司配套的样品，日间精密度测试样品采用公司配套的高值和低值室内质控品，每日开机后先使用配套质控物进行室内质控，室内质控在控后，测定样本。携带污染、批内精密度、线性范围、准确度和比对试验均使用患者EDTA-K2抗凝的新鲜静脉全血（BD真空采血管采集静脉血3 mL，采血后迅速轻轻颠倒混匀6～8次，2 h内完成检测），体液标本准确度使用30例体液标本（脑脊液10例、腹水10例、胸水10例，标本无凝块、不粘稠）。

1.1.2 仪器与试剂

XT-4000i及其原装配套试剂、校准物和质控物；经校准后符合要求的XE-2100全自动血细胞分析仪及配套试剂；OLYMPUS CX21显微镜；瑞氏染液按照《全国临床检验操作规程》（第3版）[1]要求配制。

2 方法

2.1 本底检测

每次开机后，查看仪器的本底检测结果。

2.2 携带污染率（CR）实验[2]

分别针对WBC、 RBC、HGB、PLT4个项目进行检测，按CLSI EP102A文件要求，在仪器稳定状态下，取1份高值样本连续测定3次，所得检测值依次为H1、H2、H3，接着取1份低值样本连续测定3次，所得检测值依次为L1、L2、L3。按公式计算：CR =|（L1-L3）|/（H3-L3）×100%。

2.3 精密度分析[2]

2.3.1 批内精密度

取正常浓度水平样本和医学决定水平样本（低值）两个水平的样本，按常规方法在仪器上连续检测20次，计算20次的算术平均值和标准差，计算变异系数即为批内精密度。

2.3.2 日间精密度

使用高值、中值和低值的室内质控品，每日至少检测1次，连续检测20天，计算在控数据的变异系数即为日间精密度。

2.4 准确度分析[2]

2.4.1 全血细胞计数（CBC）

实验材料为SYSMEX公司提供的定值标准物质（SCS-1000），连续测定4次后取均值，计算相对偏差。

2.4.2 白细胞分类

选取30例非血液科、非肿瘤科住院患者新鲜抗凝全血标本，应用XT-4000i对每份标本重复检测2次，取五分类均值；显微镜分类[1]，每份样本推血片2张，由2人选择血片体尾之间区域细胞分布均匀处使用油镜，各计数200个白细胞，分别取其平均值，与XT-4000i五分类均值结果进行相关性比对。

2.5 线性范围

选取1份接近预期上限的高值全血样本，用同源血小板血浆按100%、80%、60%、40%、20%比例依次稀释，每个稀释度样本分别重复测定3次，计算测定结果的均值，将实测值与理论值作比较（偏差＜10%），验证线性范围[3]。

2.6 比对实验[2]

以校准后符合要求的XE-2100为参考仪器，XT-4000i 和XE-2100分别检测涵盖各医学决定水平的新鲜抗凝全血样本共30例，样本均在2 h内完成检测。比较WBC、RBC、HGB、PLT，对每一项参数确定其相关系数和线性回归方程，相关性检验应用配对t检验，并且计算P值。

2.7 体液标本准确度分析

2.7.1 XT-4000i计数与分类

30例体液标本（脑脊液10例，腹水10例，胸水10例，标本无凝块，不粘稠），每例标本连续测定2次后取均值。

2.7.2 手工计数与分类

检测方法严格按照第3版《全国临床检验操作规程》，采用标准的改良牛鲍计数板在显微镜下计数体液标本的红、白细胞，透明或微浑的标本直接冲池计数，浑浊的标本根据情况用生理盐水稀释后计数RBC；WBC用0.2%冰醋酸稀释后计数，所有细胞均计上下10个大方格总数。所有标本在1 h内与XT-4000i同时检测。

3 统计学分析与结果

运用SPSS17.0统计学软件进行统计学分析，以P<0.05为差异有统计学意义。

3.1 本底计数

XT-4000i本底检测结果显示每次本底检测计数均达到厂商设计规定的要求。

3.2 携带污染率（CR）实验

WBC、RBC、HGB和PLT的CR分别为：0.1%、0.31%、0.59%和0.18%，均远低于判定标准，满足卫生部临检中心要求的标准[3]，全部合格，见表1。

表1 XT-4000i全血细胞分析仪携带污染率的测定结果

3.3 精密度分析

3.3.1 批内精密度

批内精密度检测结果见表2。对正常浓度水平样本检测各项目的批内精密度均在允许范围内，符合行业标准。对医学决定水平样本检测各项目的批内精密度也均符合行业标准，见表3。

表2 XT-4000i对正常浓度水平样本进行检测的批内精密度结果

表3 XT-4000i对医学决定水平（低值）样本进行检测的批内精密度结果

3.3.2 日间CV

对高、中和低值质控物检测各项目的日间精密度均符合卫生行业标准，见表4。

表4 对高、中和低值质控物进行检测的日间精密度结果

3.4 准确度分析

3.4.1 全血细胞计数

XT-4000i五项主要检测指标其相对偏差均符合WS/ T406-2012卫生行业标准，见表5。

表5 XT-4000i对CBC检测的准确度结果

3.4.2 白细胞分类

以显微镜法为金标准，XT-4000i测定的白细胞分类比值与镜检法比较，得出各自的回归方程和相关系数。其中，中性粒细胞（N）、淋巴细胞(L)、单核细胞（M）、嗜酸性粒细胞（E）和嗜碱性粒细胞（B）的相关系数分别为0.993、0.987、0.914、0.898和0.812。

3.5 线性范围

WBC、RBC、HGB和PLT线性范围评价结果见表6。行业标准：a≤1±0.05、r≥0.975，均符合CLSI H26-A2行业标准。

表6 XT-4000i的线性范围评价结果

3.6 血液标本比对实验

以XE-2100系统作为参考仪器，XT4000检测结果与其进行相关与回归分析，得出两台仪器各参数的线性回归方程和相关系数，见表7。各项目的相关系数r均＞0.99，说明回归统计的斜率和截距可靠。

表7 血液标本比对试验结果

3.7 体液标本比对实验

以手工法检测结果为标准，根据计数值将RBC（×106/L）分为3个浓度水平，I：100～1000；II：1001～100000；III：>100000。为便于统计分析未收集RBC＜100×106/L的标本。WBC（×106/L）分为3个水平，I：1～50；II：51～100；III：>100。其计数分析结果见表8。

表8 体液标本比对试验结果

4 讨论

选择性能良好的检测系统或方法是保证患者检验结果可靠性的重要前提，检测系统或方法的分析性能评价是临床实验室质量管理的重要内容。ISO15189《医学实验室质量和能力的专用要求》（下称ISO15189要求）参加认可的实验室，在开展某一检测项目前，需提供并保留相关的方法学验证实验数据；美国颁布的临床实验室修正法规的最终法规（CLIA´88 Final Rule）明确要求：每个实验室在引入未作修改的、FDA认可或批准的检测系统时，在报告患者检测结果前，必须作性能指标的确认。本实验室依照国家行业标准中关于血液分析仪的性能要求及验证方法的明确规定，参考ISO 15189要求并结合仪器实际性能，探讨并制定了针对Sysmex XT-4000i血液分析仪性能验证方案，供同行参考。

检测系统最主要性能为精密度、准确度、线性报告范围和携带污染率等。对XT-4000i评价结果显示，携带污染率均＜1.00%的标准要求；批内精密度和日间精密度变异系数（CV%）在国家卫生行业标准规定范围内＜CLIA´88指标规定；正确度结果显示各偏差均＜1/2 CLIA´88允许总误差；线性范围内WBC、RBC、HGB、PLT测定值与理论值相关系数均＞0.999，线性及相关良好；在血液标本比对分析中，XT-4000i与XE-2100相比较，主要参数的相关系数均＞0.99，相关性良好。XT-4000i对白细胞分类检测与镜检法比较，N、L符合率最高，其次是M、E，B相对较差。分析其原因：① 不同种类白细胞在外周血出现比例差异较大，B最少（参考值为0%～1%），数据变异较大；② 人工镜检法计数量远低于仪器计数量，且单核细胞的形态变异较多，仪器不易分辨[5]，仪器计数时还会出现单核细胞与中性杆状核粒细胞相混淆现象。

XT-4000i带有体液模式，可直接对各种体液标本进行检测，实现了体液标本的自动化。利用XT-4000i检测体液标本中的细胞，与手工计数相比具有较好的相关性，但是对于细胞数较少的标本，两种方法的结果差异较大。分析其原因：① 细胞分布不均，所计数的标本用量较少；② 仪器本身检测范围的基数设计可能不适用于细胞数太少的标本。XT-4000i设定的WBC检测限为0.001×109/L～99.999×109/L，对应手工法的检测限为1×106/ L～99999×106/L，故WBC本底值为1×106/L，仪器对RBC设定的检测参数低限为0.001×1012/L，但是研究参数低限为0.0001×1012/L，对应手工检测低限为100×106/L。故建议低细胞数标本应手工镜检。XT-4000i对体液细胞的检测有很高的应用价值,但是尚不能完全代替手工计数，两者应相互结合，以便对临床提供更准确的参考信息。

总之，XT-4000i具有较高的临床应用价值[6-7]，其携带污染率低、精密度、准确度、线性及可比性良好，能满足临床实验室常规血液标本的检测，其对白细胞较多的体液标本可部分代替人工镜检进行计数及分类。对于血液五分类结果可能会受到患者本身细胞状态影响，需结合仪器报警及人工显微镜分类后再综合评估。

[1] 叶应妩,王毓三,申子渝.全国临床检验操作规程[M].3版.南京:东南大学出版社,2006.

[2] WS/T406-2012,临床血液学检验常规项目分析质量要求[S].

[3] CLSI.alidation.Verification,and Quality of Automated Hematology. lyzers.CLSI document H26-A2[S]. Wayne,Pa.:Clinical and Laboratory Standards Insyitute.2010.

[4] YY/T0653-2008,血液分析仪[S].

[5] Amundsen EK, Henriksson CE, Holthe MR, Urdal P. Is the blood basophil count sufficiently precise, accurate, and specific?: three automated hematology instruments and flow cytometry compared[J]. Am J Clin Pathol. 2012 Jan;137(1):86-92.

[6] 白雪.X T-400i多功能全自动细胞分析仪在体液细胞检测中与手工法的应用比较[J].中国医疗设备,2012,27(1):75-76.

[7] 孙颖.多台全自动血细胞分析仪测试结果比对及相关性分析[J].基层医学论坛,2012,(1):86-87.

Application Performance Evaluation of SYSMEX XT-4000i Hematology Analyzer

XIA Hong-an, LIU Ying, LU Xiao-long
Clinical laboratory, The People’s Hospital Guang’an City, Guang’an Si chuan 638001, China

Objective To test and evaluate the performance of SYSMEX XT-4000i hematology analyzer. Methods Clinical blood samples, body fluid samples and quality control materials were used to test and evaluate the background counting, contamination rate, precision (within-run precision, within-day precision), linear range, accuracy, and the contrast between XT-4000i machines. Results The background counting tested by XT-4000i was lower than the specified requirements designed by the manufacturer. Using the XT-4000i to test the WBC, RBC, HGB and PLT has advantages of low contamination rate, and high precision, linear range and accuracy, as well as strong correlation between differential leukocyte counting and microscope classification. The results of testing the WBC, RBC and differential leukocyte manual counting by XT-4000i are highly related. Conclusion The XT-4000i hematology analyzer has good performance to meet the requirements of clinical routine detections of blood and body fluid samples.

hematology analyzer; performance assessment; body fl uid detection; quality control

R197.39；TH776

B

10.3969/j.issn.1674-1633.2015.01.037

1674-1633(2015)01-0114-04

2014-08-06

作者邮箱：xiahongan@126.com