高效液相色谱法测定曲松素乳膏中醋酸曲安奈德含量

蔡素芬，徐 晓，姚大柯

(广东省广州市皮肤病防治所，广东 广州 510095)

曲松素乳膏为我所自制制剂，主要成分为醋酸曲安奈德，用于治疗神经性皮炎、接触性皮炎、脂溢性皮炎、湿疹瘙痒等，临床疗效显著。原质量标准中无含量测定项目，目前醋酸曲安奈德的测定方法有紫外分光光度法[1]、高效液相色谱(HPLC)法[2]。结合文献[3－7]与临床实践，建立了测定制剂中醋酸曲安奈德含量的HPLC法。现报道如下。

1 仪器与试药

Agilent 1200型高效液相色谱仪(Agilent色谱工作站)。醋酸曲安奈德对照品(批号100125－201105，含量为97.8%，中国药品生物制品检验所);曲松素乳膏(医院制剂，批号20140513，20140625，20140722);甲醇(色谱纯，Merck 公司)。

2 方法与结果

2.1 色谱条件

色谱柱:Agilent EclipseXDB－C18柱(200 mm×4.6 mm，5 μm);流动相:甲醇－水(70∶30);流速:1 mL/min;检测波长:240 nm;柱温:25℃;进样量为20 μL。理论板数按醋酸曲安奈德峰计不得低于3 500。

2.2 溶液制备

称取醋酸曲安奈德对照品18 mg，精密称定，置50 mL容量瓶中，加流动相定容，作为对照品贮备液;精密量取5 mL贮备液，置50 mL容量瓶中，加流动相定容，即得对照品溶液。取本品1 g，精密称定，置50 mL容量瓶中，加流动相适量，置80℃水浴中加热使溶解，放冷至室温，加流动相至刻度，摇匀，置冰浴中冷却2 h，取出后迅速用0.45 μm的微孔滤膜滤过，即得供试品溶液。按处方配制不含醋酸曲安奈德的空白基质，精密称取1 g，按供试品溶液制备方法，得阴性对照品溶液。

2.3 方法学考察

干扰试验:取2.2项下3种溶液，按拟订色谱条件分别进样。结果醋酸曲安奈德色谱峰(保留时间约5.80 min处)无干扰。色谱图见图1。

图1 高效液相色谱图

线性关系考察:精密量取醋酸曲安奈德对照品贮备液1.0，2.0，5.0，10.0，15.0 mL，分别置 50 mL 容量瓶中，加流动相稀释至刻度，摇匀。按拟订色谱条件各取20 μL进样，测定峰面积，以质量浓度(C)为横坐标、峰面积(A)为纵坐标进行线性回归，得回归方程 A=44 670 C+2.364 6，r=0.999 9(n=5)。结果表明，醋酸曲安奈德质量浓度在0.007 4～0.111 g/L范围内与峰面积呈良好的线性关系。

精密度试验:取同一对照品溶液，按拟订色谱条件重复进样6次。结果的 RSD=0.69%(n=6)，表明仪器精密度良好。

重复性试验:取同一批样品(批号20140722)6份，依法制备供试品溶液并测定。结果含量的 RSD=0.85%(n=6)，表明方法重复性好。

稳定性试验:取同一供试品(批号为20140722)溶液，分别于0，2，4，6，8，10，12 h 时测定，计算含量。结果的 RSD=0.78%(n=7)，表明供试品溶液在12 h内稳定。

回收试验:精密量取空白基质9份，按高、中、低3个质量浓度加入醋酸曲安奈德对照品，各3份，依法测定，结果见表1。

表1 醋酸曲安奈德回收试验结果(n=9)

2.4 样品含量测定

取3批样品，按供试品溶液制备方法，在拟订色谱条件下进样并测定。结果批号为20140513，20140625，20140722的样品含量分别为标示量的 98.45%，96.76%，96.54% 。

3 讨论

本试验中采用了不同比例的甲醇－水作为流动相，对比醋酸曲安奈德分离度、保留时间、理论板数、回收率，以及对溶解度和滤过的影响。综合考察，最终选择甲醇－水(70∶30)作为流动相。

2010年版《中国药典(二部)》采用内标法测定含量，内标物为炔诺酮。本试验采用外标法测定醋酸曲安奈德含量，专属性强，重复性和分离效果好，准确度高，可作为曲松素乳膏的含量测定方法。

[1]程淑锋，林 滔，袁 曦，紫外－可见分光光度法测定曲安奈德尿素乳膏中醋酸曲安奈德的含量[J].中国药房，2013，24(45):4 296－4 297.

[2]国家药典委员会.中华人民共和国药典(二部)[M].北京:中国医药科技出版社，2010:1 123.

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