放射免疫法和酶联免疫法检测人血浆中乙型肝炎病毒表面抗体效价的效果

史冠宇

摘要：目的对于人体血浆中乙型肝炎病毒表面抗体效价的检测，分别采用放射免疫法、酶联免疫法，并对两种方法的检测效果进行比较。方法研究对象为来自国家临检中心乙肝表面抗体质控品2份，来自中国生物制品检定所提供的线性参比品的国家标准品3份。分别采用放射免疫法、酶联免疫法对其血浆中乙型肝炎病毒表面抗体效价进行检测，并对两种方法的检测效果进行比较。结果对于中国生物制品检定所提供的3份参比品、国家临检中心2份质控品乙肝表面抗体效价的检测，分别采用放射免疫法、酶联免疫法的检测效果无明显差异，P>0.05，差异无统计学意义，样本浓度值相关性良好，相关系数r均大于0.95;对于1-400号高抗血浆、401-800号低抗血浆、801-1000号普通血浆乙肝表面抗体效价的检测，分别采用放射免疫法、酶联免疫法的检测效果无明显差异，P>0.05，差异无统计学意义，样本浓度值相关性良好，相关系数r均大于0.95。结论对于人体血浆中乙型肝炎病毒表面抗体效价的检测，采用酶联免疫法不但检验成本低、操作简单快捷，而且特异性强、准确度高，对血液制品行业乙免原料血浆乙型肝炎病毒表面抗体效价的筛查具有重要的意义，非常值得推广和应用。关键词：酶联免疫法;放射免疫法;乙肝表面抗体效价

酶联免疫吸附剂测定法，简称酶联免疫法，或者ELISA法。它的中心就是让抗体与酶复合物结合，然后通过显色来检测。放射免疫法是利用同位素标记的与未标记的抗原，同抗体发生竞争性抑制反应的方法，研究机体对抗原物质反应的发生、发展和转化规律。本文分析了采用酶联免疫法和放射免疫法对人体血浆中乙型肝炎病毒表面抗體效价进行检测的效果。以下是我的报道：1材料与方法1.1样品材料研究对象为来自国家临检中心乙肝表面抗体质控品2份，来自中国生物制品检定所提供的线性参比品的国家标准品3份。 1.2仪器和试剂盒抗-HBs免疫球蛋白国家标准品，标示浓度值为2.5lU/支（批号20041001）。北京万泰生物药业有限公司表面抗体酶联免疫定量检测试剂盒（批号R20110503），线性范围和正常参考范围分别为10-300mlU/ml，0-10mlU/ml。放免r测量仪（上海原子核研究所四环仪器厂生产），放射免疫法试剂盒（北京北方生物技术研究所提供），表面抗体放射免疫定量检测试剂盒（批号：110620），线性范围和正常参考范围分别为0-1000mlU/ml、0-10mlU/ml。 1.3统计学方法选取SPSS13.0软件，对数据进行统计分析。计数资料采用t检验。差异明显具有统计学意义（P<0.05）。2结果对于中国生物制品检定所提供的3份参比品、国家临检中心2份质控品乙肝表面抗体效价的检测，分别采用放射免疫法、酶联免疫法的检测效果无明显差异，P>0.05，差异无统计学意义，样本浓度值相关性良好，相关系数r均大于0.95;对于1-400号高抗血浆、401-800号低抗血浆、801-1000号普通血浆乙肝表面抗体效价的检测，分别采用放射免疫法、酶联免疫法的检测效果无明显差异，P>0.05，差异无统计学意义，样本浓度值相关性良好，相关系数r均大于0.95。3讨论采用放射免疫法对人体血浆中乙型肝炎病毒表面抗体效价进行检测，不但费时、复杂，而且一次无法进行大量样品检测。酶联免疫吸附剂测定法，简称酶联免疫法，或者ELISA法。本文研究了酶联免疫法对乙型肝炎病毒表面抗体效价的检测，其基本原理是使抗原或抗体结合到某种固相载体表面，并保持其免疫活性;使抗原或抗体与某种酶连接成酶标抗原或抗体，这种酶标抗原或抗体既保留其免疫活性，又保留酶的活性。在测定时，把受检标本和酶标抗原或抗体按不同的步骤与固相载体表面的抗原或抗体起反应。用洗涤的方法使固相载体上形成的抗原抗体复合物与其他物质分开，最后结合在固相载体上的酶量与标本中受检物质的量成一定的比例。加入酶反应的底物后，底物被酶催化变为有色产物，产物的量与标本中受检物质的量直接相关，故可根据颜色反应的深浅来进行定性或定量分析。由于酶的催化频率很高，故可极大地放大反应效果，从而使测定方法达到很高的敏感度。ELISA可用于测定抗原，也可用于测定抗体。在这种测定方法中有3种必要的试剂：①固相的抗原或抗体②酶标记的抗原或抗体③酶作用的底物。根据试剂的来源和标本的性状以及检测的具备条件，可设计出各种不同类型的检测方法。采用酶联免疫法不但检验成本低、操作简单快捷，而且特异性强、准确度高。参考文献[1]许丽枫，张效林.酶联免疫法和胶体金法对乙肝病毒表面抗原检测的对比分析[J].疑难病杂志，2010，04：257. [2]胡晓.乳胶层析法与酶联免疫法测定乙肝病毒标志物的相关性分析[J].浙江预防医学，2010，05：92-93. [3]刘秀琴，傅杭州，张晓俐.化学发光微粒子免疫分析法与酶联免疫法测定乙肝表面抗原的比较[J].海南医学，2010，08：104-105. [4]孔庆飞，班立芳，王勇鸣.酶联免疫法和发光免疫法测定乙肝病毒标志物比较[J].中国现代医生，2010，09：65-67.