葡萄砧木在驯化过程中生理指标的比较研究

李晓

[摘 要] 以葡萄砧木'SO4'、'5BB'的试管苗、开瓶驯化后的试管苗以及移栽成活的苗木为研究材料，测定了它们枝条在驯化后的根系活力、可溶性糖、可溶性蛋白、叶绿素含量的变化进行综合评价，最终得出结论。

[关键词] 葡萄砧木 试管苗 生物学特性 生理指标

[中图分类号] S663.1 [文献标识码] B [文章编号] 1003-1650 （2015）09-0152-02

砧木，进行嫁接栽培，或称“砧化栽培”，已成为世界各主要葡萄栽培生产国发展葡萄的重要举措口。离体繁殖的试管苗能否大量应用于开发生产，取决于试管苗是否有较高的移栽成活率，因此提高试管苗的成活率具有重要的现实意义和实际应用价值。

1 试验设计与方法

1.1 试验材料

1.1.1闭瓶在恒温箱中的生长期为40天的5BB和SO4试管苗。

1.1.2从恒温箱取出在弱光下训练5天后开瓶在强光下训练5天的5BB和SO4试管苗。

1.1.3驯化后成活的生长期为2个月的5BB和SO4苗木。

1.2 试验方法

1.2.1生根壮苗的培养

1.2.1.1光培炼苗

试管苗生根培养35～40d以后，选择根长1～3cm、苗高5cm左右的发育良好的试管壮苗放在强光下，不打开瓶塞，使试管苗在自然强光的照射下锻炼3～5d，在一定程度上提高移栽成活率。

1.2.1.2透气炼苗经过二次炼苗后，试管苗的根系数量增多，部分有侧根，活力提高；叶片光合能力增强。锻炼过程中因光照渐强，易致高温，故应遮荫。

1.2.2过渡移栽

1.2.2.1移栽基质的准备

用蛭石和珍珠岩的比例为3：1的基质混匀并参杂熟化且含有机质多的表土，腐熟好的牛、羊、马粪，粗细均匀、透气性好的沙，拌匀过筛待用。对基质进行高压、烘烤或药剂灭菌，同时还需定期使用一定浓度的杀菌剂，以便更有效地保护幼苗，如浓度800～1000倍的多菌灵、托布津等，喷药间隔宜7～10d一次。装填育苗钵时要把袋底装上营养土至1/4处，待用。

1.2.2.2移栽技术

将生根试管苗小心从瓶中取出，在20摄氏度的水中浸泡约十分钟，换水两次洗净根部的培养基，在生根剂溶液中浸根3～5分钟，栽于准备好的育苗钵中，每个育苗钵中栽植1株，移栽前，先将基质浇透水，然后用镊子或细竹筷夹住苗后种植在育苗钵内，移栽过程需注意不窝根、不绕根、不伤叶试管苗根部，使根均匀分布于育苗钵中，再用基质填满剩余3/4的空间，装满后在地上轻墩几下使苗根于营养土贴紧，土面距营养钵边沿1cm左右，最后浇足定根水，喷洒一定剂量的杀菌剂，置于阳光充足、平整、潮湿的地面上，用塑料小拱棚保湿，大约十五天左右。

1.2.2.3苗期管理

这是影响移植成活率的关键环节，特别注意以下几方面

第一，保湿并适当遮荫。保持移栽环境内空气相对湿度达到80%～95%。但基质中的水分不宜过多，否则会使苗根颈处湿度过大，感染杂菌而烂茎死亡。故宜采用在移栽苗叶面和小拱棚内空间内人工喷细雾的方法，喷雾次数依外界天气情况而定。移栽后还要注意遮荫，避免中午强光直射，使棚内温度保持在25℃，最高不超过30℃。

第二，通风。 移植后1周开始通风，早期只在温度过高时通风，每次1～2h，以后逐渐延长通风时间直至完全揭除棚膜，此时新的根系生长。同时还需人工喷雾，保持拱棚内一定的空气湿度。揭棚10～15d后才可进行常规管理。

第三，防病保苗。移栽苗在高温，高湿，弱光条件下，最易感病菌。主要在根颈褐变和腐烂，地上部分枯萎后死亡。一般在移苗前使用800倍液多菌灵对介质进行消毒的解决方案，移栽后立即与一定浓度的扑海菌、多菌灵等杀菌剂进行根灌或喷施，成活后每周处理1次，并每次配合追施由大量，微量铁盐组成液肥和水。

1.2.3生理指标的测定

1.2.3.1叶绿素：用80%的丙酮提取法测定；

1.2.3.2植物体内可溶性蛋白质：用考马斯亮蓝G-250染色法测定；

1.2.3.3可溶性糖：用葸酮法测定；

1.2.3.4根系活力：用甲烯蓝法测定。

2 结果与分析

2.1 葡萄砧木品种在不同时期的叶片可溶性糖含量

由图知，品种5BB在整个驯化时期中可溶性糖的含量都高于SO4。不同葡萄砧木和品种的植物组织和细胞可溶性糖含量与其抗寒性密切相关，可溶性糖含量越高，增加的幅度越大，则植物抗寒性越强，所以，5BB较适应寒冷的气候并能茁壮成长。

图1. 两个品种在处理中的可溶性糖含量（%）差异

2.2 葡萄砧木品种在不同时期的根系活力

葡萄砧木试管苗在瓶内生根，生长速度较快，5～7天即伸入培养基内，移栽时部分成褐色，已栓质化，一段时间后葡萄砧木试管苗能迅速长出大量的新根，蒸腾速率恢复，吸收功能大幅提高，逐渐满足地上部分对水分和养分的需求，小苗开始生长。由图知，品种5BB在驯化的过程中根系的活力较强，移栽过程中较易恢复生长。

图2. 两个品种在处理中的根系活力的差异

2.3 葡萄砧木品种在不同时期叶片的蛋白质含量

S04在每个驯化阶段的蛋白质含量显著高于5BB且变化差异较5BB小，可溶性蛋白的亲水性较强，能明显增强细胞的持水力，其含量的增加可以使细胞束缚更多的水分，还可以减少原生质因结冰而伤害致死的机率，从而提高其抗寒性。所以砧木SO4比5BB较适应寒冷的地区移栽。

图3. 两个品种在处理中可溶性蛋白质含量（%）的变化差异

2.4 葡萄砧木品种在不同时期叶片的叶绿素含量

在驯化过程中，葡萄试管苗气孔开张度逐渐减小，蒸腾速率大幅度降低，光饱和点逐渐上升，所以最大净光合速率呈现上升趋势，叶绿素浓度逐渐增加。由图知，两者的叶绿素含量均有上升的趋势，5BB叶片内叶绿素含量稍高于SO4。

图4. 两个品种在处理中叶绿素含量的变化差异

3 讨论

萄砧木品种在生长环境相同的情况下， 硬枝扦插困难，一方面受基因控制，另一方面，扦插时间和栽培技术措施也有一定的影响。实验中两个品种的各个生理指标与成活率虽然呈现一定的线性关系，但是试验所用的材料的种类还是相对较少，实验规模有限，因此还有待于扩大实验样本的容量，进一步研究其他品种。试验中虽然经过驯化后移栽到基质中的葡萄试管苗成活了，但是其长势非常微弱，尤其是品种SO4，经过观察其长出的新根特别少。这种情况也不是移栽中的难题，早有研究认为，葡萄插条在10℃以上才能发根，20～28℃发根速度加快。葡萄根原基形成所需要的温度较萌芽高。在12℃条件下，中柱鞘活动极为缓慢，在25℃～28℃时最适宜其活动、分裂、能快速形成新根。

4 总结

砧木5BB在整个驯化过程中可溶性糖的含量、含量的增加幅度都高于SO4且各阶段间的根系的活力较强，叶片内叶绿素含量稍高于SO4。SO4在每个驯化阶段的蛋白质含量显著高于5BB，且蛋白质含量变化差异较5BB小，综合比较，砧木5BB的长势较SO4的好。