夏新兴 尹友红
摘 要:酒肽,又名醒酒肽,在醒酒、护肝、肝细胞重生增殖、预防高血压等方面有及其广阔的前景。本文采用瓦勒—霍赫法测定酒肽的体外解酒能力,初步证实酒肽与葛根、枳椇子的协同组在激发率(解酒速度)和酒精分解率均高于单一成分。实验结果表明,协同组成分及原谷酒肽组的解酒效率突出,对预防酒后脑卒中、高血压、酒后反应、酒精中毒、肝细胞损伤及肝细胞恢复有重要的实际意义。
关键词:酒肽 原谷酒肽 解酒 护肝 生理功能 应用
中图分类号:TS262 文献标识码:A 文章编号:1672-3791(2015)10(a)-0000-00
酒肽(C-Hangover Peptide CHP),又称醒酒肽,国内为了突出其谷物提取方式,又名原谷酒肽。酒肽是玉米蛋白经过一系列酶解而得到的产物,其中大部分是分子量小于1000的短肽。这种短链低聚肽活性高,通过口服极易吸收,并且有许多独特的生理功能。酒肽是完全从谷物中提取,具备天然的来源、无任何毒副作用、不受使用量限制而倍受青睐。目前除糖尿病人辅助食品外,醒酒用品已经是酒肽的第二大使用源。除上述之外,酒肽还在高血压食品、减肥食品、抗肝性脑病、抗疲劳食品应用广泛。
我国现在的玉米总产量居世界第2位,占世界总产量的20%,从玉米中提取的酒肽为世界产量第一,但大部分为国外订单,国内市场消化有限。其根本原因,是国内消费教育者对酒肽的全面功能还不是很了解。国外对酒肽的研究较早,早在20世纪40年代就已开展。Yamaguchi[1]等率先报道了酒肽具有促进乙醇代谢的醒酒作用,并且对宿醉效果显著。
Yamaguchi[2]等证实,酒肽能够产生稳定的分解乙醇的辅脱氢酶,增强肝脏乙醇脱氢酶和乙醛脱氢酶的活性,促进体内乙醇的分解和代谢,从而降低血液中乙醇浓度,达到醒酒解宿醉的作用。酒肽还具有丰富的氨基酸,能够及时补充到血液中,从而维持脑细胞的能量供应和神经运动,减少酒精造成的神经系统伤害,保持酒中和酒后相对清醒。
本文采用瓦勒—霍赫法[3],通过体外测定乙醇脱氢酶(ADH)活性,比较各成分解酒能力,筛选高醒酒活性的成分组合。
1 材料与方法
1.1 主要材料
醒酒肽:山东天久生物技术有限公司(低聚肽含量为76.8%;批号:150428001002);原谷酒肽:湖南绿大地生物药业有限公司(蛋白质含量64%;批号:20151201);枳椇子粉100g、葛根粉100g、姜黄100g:购自湖南益生大药房,由笔者高级营养师鉴定并按药典要求研磨;氧化型辅酶Ⅰ(NAD+)、乙醇脱氢酶(ADH)、脱氧核糖:美国Sigma公司。
1.2主要仪器
日立835—50氨基酸自动分析仪:日本日立公司;岛津UV—102—02WF紫外可见分光光度计:日本岛津公司。
1.3实验方法
1.3.1 试验样品制备
酒肽组:按醒酒肽含量标号制备溶液,溶液中醒酒肽含量为0.1mg/ml;
协同组[4]:枳椇子粉和葛根粉各100g,分别制备醇提物。取枳椇子和葛根醇提物各0.2g,0.13g酒肽,加1000m纯净l水充分溶解,取1ml制备液;
枳椇子、葛根组:枳椇子醇提物和葛根醇提物各0.2g,分别加纯净水1000ml,各取1ml制备液。
原谷酒肽组:微量凯氏定氮法测得原谷酒肽片蛋白质含量为67.13%,取0.15g,醇提后溶于1000ml纯净水,取1ml制备液。
对照组:1ml纯净水。
1.3.2 乙醇脱氢酶(ADH)活力的测定
瓦勒—霍赫测定。底液使用pH值为9.0的焦磷酸缓冲液1.5ml,30mmlo/L辅酶Ⅰ(NAD+)1.0ml,13%乙醇溶液(v/v)1ml,各实验样品取0.1ml,25℃加盖温育5分钟,加入乙醇脱氢酶(0.25U/ML)0.1mL,摇匀后立即测定吸光度(A340nm),每隔10秒记录一次,连续测定5分钟,作图,并按如下计算激活率:
激活率=(酶活力试验组-酶活力空白组)/酶活力空白组×100%
酶活力计算:根据340nm处的摩尔消光系数6.2,计算乙醇脱氢酶(ADH)的活力。
水解度:温育反应2小时后,测量A340nm,计算乙醇水解总量。
2 结果与分析
2.1 各组成分体外解酒能力的分析
2.1.1乙醇脱氢酶(ADH)激活率和水解度测定
表1 各醒酒成分及协同成分正交试验结果
(平均值±标准差,n=3)
试验序号 试验组 试验结果
时间/min 激活率/% 时间/h 水解度/%
1 醒酒肽组 1 25.28±0.12 2 9.23±0.01
2 枳椇子组 1 15.12±0.01 2 5.44±0.02
3 葛根组 1 12.37±0.06 2 4.98±0.06
4 协同组 1 37.33±0.09 2 17.32±0.04
5 原谷酒肽组 1 35.19±0.02 2 19.11±0.03
2.2 试验分析
正交试验中,激活率除了考察各组成分的解酒能力,同时也代表各组成分的反应速度(解酒速度)。试验中,酒肽组激活率明显高于枳椇子组和葛根组,这可能与酒肽直接作用于ADH的靶位,不同于枳椇子和葛根组的催活机理有关。协同组不光有醒酒肽,还有枳椇子和葛根,激活率明显高于单一成分的1、2、3组。这提示三种成分有着明显的协同作用,比单一成分效率更高。原谷酒肽因為同时含有三种成分,激活效果与协同组接近。
试验中选择水解时间为2h,以保证底料完全反应。乙醇水解度试验显示与激活率有很强的线性相关性,但因为没有经过正交梯度试验设计,所以并不能说明问题。但相同条件下,酒肽水解乙醇的能力明显大于枳椇子和葛根组;协同组水解能力明显大于单一成分,原谷酒肽因为作用原理与协同组接近,水解能力也相当。在协同组(或原谷酒肽)试验量充足的前提下,乙醇水解应接近动物实验。黄敏[5]由酒肽的动物实验得知,在降低血醇含量方面,灌服白酒1h后注射醒酒肽,小鼠血醇含量下降达到63.61%。
卿篤信[6]等通过人体试验证明,长期饮酒者胃黏膜ADH活性明显下降,更容易导致酒精对肝脏和机体的毒害。已知的可以促进乙醇脱氢酶活性的物质很多,主要集中在黄酮类较多的枳椇子、葛根等植物提取物,或多肽类物质。本研究首次证实多肽类物质(酒肽)与黄酮类物质(枳椇子、葛根)协同增强ADH活力。另外从作用部位考察,酒肽主要增强肝脏的解酒能力,枳椇子和葛根主要增强胃肠道ADH活力,两者从乙醇代谢途径能得到很好的补充和配合。
3 酒肽解酒能力综述
3.1预防酒后脑卒中
我国每年因为酒后死亡的人数高达11万4千人,占总死亡人数1.3%;致残人数273万7千人,占总致残率3.0%。长期大量饮酒是脑卒中主要危险因素之一,危险性高于动脉硬化高血压或其他因素。乙醇和其代谢产物可直接影响肾上腺素,刺激其分泌,使血中皮质醇、醛固酮及加压素水平上升,导致血压升高,压破脑血管形成出血的几率大幅增加[7]。酒肽具有明显的降血压作用,但对正常血压不会造成影响。酒肽中含丰富的ACEⅠP(血管紧张素转移酶抑制剂),是其发挥降血压作用的物质基础。[8]
3.2 促进酒精代谢
Yamaguchi等[9]筛选有脑卒中倾向的自发性高血压大鼠(SHA-SP)先后灌服酒肽和乙醇,发现血液中乙醇及乙醛含量都明显降低。同样的结果人体实验中也证实[10],血液中乙醇含量明显降低,并且维持时间长久,达到2h以上。酒肽还可及时补充因受酒精抑制而减少的氨基酸,从而维持脑细胞的能量供应和神经活动,保持大脑相对清醒,减少饮酒反应。郑鸿雁[11]用酒肽进行了抗疲劳实验结果表明酒肽能增强小鼠的游泳耐力,延长爬杆时间,降低血乳酸、血中尿素氮含量,提高肝糖原含量和肌糖含量,具有抗疲劳作用,提示酒肽能促进酒后的恢复。
3.3保护胃黏膜
酒肽因为其亲水性,溶解后首先会在胃粘膜上形成薄膜,可以在一定程度上避免酒精直接接触胃粘膜。其直接分解酒精的能力,会在酒精进入血液循环前,分解一部分酒精。由于酒肽的激活作用,胃部的ADH活性也会相应增强,这样就提高了从胃部到肝部全过程的解酒水平。从以上实验可以推测,协同组或原谷酒肽组的协同解酒能力的提高,也有助于酒精进一步代谢。
3.4保护肝细胞
研究表明:氧化应激及脂质过氧化是多种肝病的共同病理基础,引起不同程度的肝损伤[12-13],导致脂肪肝、病毒性肝炎和肝纤维化。防止肝细胞过氧化是预防肝病的可行途径。通过对肝癌细胞HepG2脂肪堆积和体外过氧化实验表明[14],酒肽通过促进甘油三酯分解和代谢,有效地降低肝细胞内甘油三酯含量,防止肝细胞空洞化脂肪堆积,预防脂肪肝形成。酒肽能显著清除DPPH自由基、羟自由基,以及Fe3+还原能力,自由基清除率高达83.01%。酒精对肝的直接损伤是产生大量自由基破坏肝细胞,酒肽的应用无疑能大大中和这一过程。
3.5促进肝细胞增殖恢复
刘艳等[15]通过研究酒肽对HL-7702人肝细胞增殖及细胞周期的调控作用,以及对细胞形态及存活率的影响,初步证实了酒肽可促进肝细胞增殖,提高细胞活力。推测酒肽可以起到修复肝细胞、促进肝细胞再生的作用,对于肝细胞受到损伤以及减弱的人来说具有重要意义。
4 讨论与结论
本文通过瓦勒—霍赫体外实验说明酒肽、枳椇子和葛根的协同解酒能力,首次结合东方传统解酒成分考察其功效,从实验中证明其解酒速度和代谢程度。酒肽,又名醒酒肽,国内名称原谷酒肽,是公认的有效解酒成分,尤其是日本和美国研究得比较透彻。早在1974年,美国成立了由Edler-Nissen领导的专门研究水解蛋白的课题机构[16],日本在这方面也一直处于领先地位,并率先把酒肽应用于解酒产品和高血压产品,并且在解酒方面倡导用酒肽代替副作用比较大的姜黄,后者因为在肠胃及子宫出血的副作用而应用谨慎。姜黄成分在我国被归入药品类和食品添加剂类,不允许用在食品主料上,用于食品添加剂只限于染色。
我国对酒肽的研究起步较晚,从事的研究也多从医药角度出发,研究力量投入较少,限制了酒肽发挥药食同源的作用。但近几年的研究逐渐活跃,2010年,中国国家卫生部把酒肽列为新资源食品,这也就意味着承认酒肽食用的安全性,极大地扩展了酒肽的应用空间,为企业应用扫除障碍。
原谷酒肽首次将酒肽与东方传统的枳椇子、葛根结合,形成协同效应比较强的解酒产品。枳椇子和葛根是东方的中国、日本、韩国、越南等国公认的解酒成分,通过其类黄酮减缓酒精对肝细胞带来的氧化损伤,但对肝细胞没有修复增殖作用。原谷酒肽原料采用酶解法,酶解彻底,平均分子量小于1000,生物活性更高。协同组实验表明,其酒精分解率和解酒速度(激发率)能够达到单一成分的一倍以上。全部原料采用药食同源食材,对人体无毒副作用。
除此之外,酒肽用于高血压、抗疲劳、预防肝性脑病等方面应用前景广阔,随着科技发展,人们生活水平的提高及保健意识的增强,酒肽的药食同源性将更加显示出其广阔的应用前景。
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