藏药六味木香丸对大鼠实验性胃溃疡损伤的保护作用

鲁建美，吕露阳，张吉仲，刘 圆

(西南民族大学民族医药研究院，四川 成都 610041)

藏药六味木香丸对大鼠实验性胃溃疡损伤的保护作用

鲁建美，吕露阳，张吉仲，刘 圆

(西南民族大学民族医药研究院，四川 成都 610041)

实验通过建立SD大鼠幽门结扎致胃溃疡模型和药物致胃溃疡模型，并测量实验大鼠溃疡指数、胃液的pH值、胃液总酸度及胃蛋白酶活性，来观察藏药六味木香丸对大鼠幽门结扎致胃溃疡及药物致胃溃疡的影响和机制.实验结果表明，六味木香丸能明显或部分降低幽门结扎致大鼠胃溃疡模型和消炎痛致大鼠胃溃疡模型的溃疡指数;同时对幽门结扎致大鼠胃溃疡模型药物能明显或部分减少胃液的分泌量，升高胃液pH值，降低胃液总酸度(均P＜0.05或P＜0.01)，显示出药物对胃酸的分泌有一定的抑制作用和碱化胃液效应，但对胃蛋白酶的分泌未见明显影响(P＞0.05).由上述结果可知，藏药六味木香丸对大鼠实验性胃溃疡具有一定的保护作用.

藏药;六味木香丸;胃溃疡;溃疡指数;总酸度;胃蛋白酶

藏药六味木香丸是用于治疗培根木布病(藏民对胃肠疾病的统称)的常用藏药复方，最早记载于《四部医典》，由木香、石榴子、豆蔻、荜茇、巴夏嘎、余甘子6味组成［1］.具有止呕、止痛等功能，用于“培根木布”病引起的胃肠疼痛、嗳气、腹胀、呕吐、溃疡等症有明显的功效［2］.临床报道显示对急慢性胃肠炎、胃十二指肠溃疡等有较好疗效［3-5］.目前有关六味木香丸的抗溃疡的药理作用尚未见系统地研究和报道，本研究通过对SD大鼠药物性胃溃疡，幽门结扎术胃溃疡的实验研究，对胃溃疡模型大鼠分泌胃液和胃蛋白酶分泌及活性的测定，探讨六味木香丸对实验性胃溃疡的作用机制，为其临床应用提供依据.

1 材料

1.1 药物及药液配制

六味木香丸购于四川阿坝州藏医院藏医药研究所(批号:201301)，实验前用蒸馏水配成高、中、低(63，31.5，10.5 mg·mL-1)三个浓度溶液，放置冰箱备用;西咪替丁片，成都锦华药业有限责任公司(批号130805)，给药前用蒸馏水配制成10 mg·mL-1浓度混悬液，放置冰箱备用;消炎痛，山西云鹏制药有限公司(批号 A101201)，按 10 g·mL-1溶于 5%NaHCO3溶液中，用灭菌注射用水稀释成2 mg·mL-1混悬液，放置冰箱备用.

1.2 试剂

1%福尔马林溶液，25mmol·L-1NaOH溶液，0.05 moL·L-1盐酸，酚红指示剂，乙醚.

1.3 动物

SPF级SD大鼠，体质量为180-220 g，雌雄各半，四川省成都中医药大学动物实验中心提供(大鼠的合格证号为:scxk(川)2008-11).

1.4 仪器

灌胃针，手术器械，10 ml具塞试管，注射器，滴定管，游标卡尺，内径1mm长10 cm毛细管，天枰，精密PH试纸(Miro essential Lab)，离心机，恒温水浴箱，恒温箱.

1.5 数据处理软件

采用《中国医学百科全书·医学统计学》统计软件包PEMS3.1进行统计分析.

2 方法

2.1 对大鼠幽门结扎胃溃疡模型的影响

取健康SD大鼠60只，雌雄各半，按体重随机分层分为6组，分别是空白对照组、模型对照组、阳性对照组、六味木香丸高剂量组、中剂量组和低剂量组，每组10只动物.每日灌胃给药1次，连续给药15天.每个实验组分别灌胃给予各受试药物2 mL·100g-1，具体给药量见表2;空白对照组及模型对照组给予等量蒸馏水.各组动物禁食不禁水48 h，除空白对照组外，用适量乙醚将大鼠麻醉，然后固定于鼠板上，从剑突沿腹中线剪开腹壁，切口约2～3 cm，将胃暴露于切口，小心结扎幽门并缝合腹壁切口.将大鼠放回饲养笼，禁食禁水，5 h后将6组大鼠处死.切开腹壁，结扎贲门，将胃取出，将取出的全胃沿胃大弯剪一小口，将胃液倾倒于刻度离心管中备用，以测定胃液总量、PH、总酸度及胃蛋白酶活性.然后将全胃用1%福尔马林固定10 min，沿胃大弯剪开，平展，测量溃疡指数，计算溃疡抑制率［6-10］.

以3000 r·min-1的速度将胃液离心10 min后，吸取上清液，精确记录胃液量，将胃液注入具塞试管中备用.用精密pH试纸测胃液的pH值;采用滴定法测定胃液总酸度［9］，取上清胃液1 mL，加入酚红指示剂1滴，用NaOH(25 mmol·L-1)进行滴定，直至胃液出现桃红色，摇晃后2 s内不消失作为终点，记录NaOH用量，按照公式计算总酸度，总酸度(mEq·L-1)=25×NaOH消耗用量.

麦特氏(Mett)毛细玻管法测定胃蛋白酶活性.将新鲜鸡蛋清顺时针充分搅匀，然后用双层纱布过滤，加超纯水稀释1倍.取1 mm×10 cm干净的毛细玻璃管，利用虹吸作用将毛细玻璃管灌满蛋清，置于85℃恒温水浴中使蛋清凝固，制成蛋白管，有气泡的蛋白管丢弃.冷却后，石蜡封住毛细玻璃管两端，冷藏备用.取上清胃液0.5 mL放入10 mL具塞试管中，加0.05 moL·L-1盐酸5 mL，摇匀后每管中放入3 cm长的备用蛋白管2支，塞好管塞，于37℃恒温箱孵育24 h，取出后用游标卡尺测毛细管两端的透明长度，求其平均值，计算胃蛋白酶活性.

胃蛋白酶活性(U/ml)=平均值×16.

2.2 对大鼠消炎痛胃溃疡模型的影响

实验SD大鼠共60只，雌雄各半，按大鼠重量随机分为空白对照组、模型对照组、阳性对照组、六味木香丸高剂量组、中剂量组和低剂量组共6组，每组10只动物.每日灌胃给药1次，连续给药3天.实验各组分别灌胃给予各受试药物2 ml·100g-1，具体给药量见表1;空白对照组、模型组给予等量蒸馏水.最后一次给药前24 h禁食不禁水，在最后一次给药后1.5 h，除空白对照组外每组大鼠皮下注射消炎痛0.02 g·kg-1，6 h后6组均处死，开腹结扎幽门和贲门，将胃取出后，用1%福尔马林固定10 min，然后沿着胃大弯剪开，平展开，测量溃疡指数［11-14］.

溃疡指数抑制率=(对照组溃疡指数-给药组溃疡指数)/对照组组溃疡指数×100%

计算溃疡指数的方法:点状溃疡、轻度炎症和长度＜1mm类线状溃疡为0.5分;溃疡长度在1-2 mm为2分;2-3 mm为3分;＞3 mm为4分;宽度＞1 mm加倍计分.

3 结果

3.1 对幽门结扎致胃溃疡模型的影响

六味木香丸高、中剂量组能明显降低幽门结扎致大鼠胃溃疡模型的溃疡指数(P＜0.05).对溃疡抑制率没有统计学差异(P＞0.05)，见表1.

六味木香对胃酸分泌有一定的抑制作用(P＜0.05)，同时对胃液分泌量有明显的抑制作用，并对胃液pH有一定的碱化效应(p＜0.05或P＜0.01);对胃蛋白酶活性的影响没有统计学差异(P＞0.05)，见表2.

表1六味木香丸对幽门结扎致溃疡模型的影响(±s，n=10)Table 1 The effects of Liuwei Muxiang pills on pylori-ligation gastric ulcer

表1六味木香丸对幽门结扎致溃疡模型的影响(±s，n=10)Table 1 The effects of Liuwei Muxiang pills on pylori-ligation gastric ulcer

注:与模型组比较，＊＊P＜0.01，*P＜0.05

组别 给药量/g·kg-1 溃疡指数 溃疡抑制率—— —— ——模型对照组 —— 4.15±1.79 ——阳性对照组(西咪替丁) 0.2 1.90±1.13＊＊ 54.2%六味木香高剂量组 1.26 2.35±1.63* 43.4%六味木香中剂量组 0.63 3.35±1.70* 19.3%六味木香低剂量组/%空白对照组0.21 3.05±2.07 26.5%

表2六味木香丸对幽门结扎致胃溃疡模型大鼠胃蛋白酶活性及胃液分泌的影响(±s，n=10)Table 2 The effects of Liuwei Muxiang pills on the secretion of gastric acid and pepsin activities in pylori-ligation gastric ulcer rats

表2六味木香丸对幽门结扎致胃溃疡模型大鼠胃蛋白酶活性及胃液分泌的影响(±s，n=10)Table 2 The effects of Liuwei Muxiang pills on the secretion of gastric acid and pepsin activities in pylori-ligation gastric ulcer rats

注:与模型组比较，＊＊P＜0.01，*P＜0.05

组别 给药量/g·kg-1 胃液量/mL 总酸度/mEq·L-1 pH 胃蛋白酶活性单位317.21±156.71模型对照组 —— 4.76±0.92 46.61±4.72 2.03±0.52 337.30±136.36阳性对照组(西咪替丁) 0.2 3.82±0.75* 29.32±4.04＊＊ 3.15±0.93* 281.40±105.70六味木香高剂量组 1.26 3.29±0.81＊＊ 37.49±8.93* 3.71±0.97＊＊ 304.60±109.20六味木香中剂量组 0.63 3.71±0.96* 44.59±9.24 3.64±0.93＊＊ 299.80±102.69六味木香低剂量组 0.21 4.01±1.00 45.11±6.31 3.04±1.2*/mL空白对照组 —— 3.13±0.0.87＊＊ 36.28±5.63* 3.59±0.88＊＊301.30±116.49

3.2 对药物性胃溃疡模型的影响

六味木香丸高剂量组能明显降低消炎痛致大鼠胃溃疡模型的溃疡指数(P＜0.05)，对溃疡抑制率没有统计学差异(P＞0.05)，见表3.

表3六味木香丸对药物性溃疡模型的影响(±s，n=10)Table 3 The effects of Liuwei Muxiang pills on drug gastric ulcre

表3六味木香丸对药物性溃疡模型的影响(±s，n=10)Table 3 The effects of Liuwei Muxiang pills on drug gastric ulcre

注:与模型组比较，＊＊P＜0.01，*P＜0.05

组 别 给药量/g·kg-1 溃疡指数 溃疡抑制率—— —— ——模型对照组 —— 5.25±2.09 ——阳性对照组(西咪替丁) 0.2 2.35±1.29＊＊ 55.2%六味木香高剂量组 1.26 3.40±1.85* 35.2%六味木香中剂量组 0.63 4.90±3.26 6.7%六味木香低剂量组/%空白对照组0.21 4.15±2.00 21.0%

4 讨论

六味木香丸由木香、石榴子、豆蔻、荜茇、巴夏嘎、余甘子6味组成，该方性偏温热，有去胃寒、健胃消食、消除胀满、抗炎、镇痛等作用.有研究表明，从木香中分离得到的3种化学成分saussureamines A、B、C对实验性胃损伤显示了良好的抗溃疡活性［15］，木香里的主要化学成分木香烃内酯和去氢木香烃内酯对大鼠胃溃疡也有明显的改善作用;余甘子提取物能明显减少幽门结扎大鼠胃液分泌和胃酸分泌的强度，能明显降低溃疡指数［16］;赛北紫堇(巴夏嘎)有很好的镇痛作用;荜茇可明显预防寒冷型应激性胃粘膜损伤［17］;石榴籽温胃、消食，对胃寒引起的胃腹胀满、冷痛、食欲不振有良好的疗效.实验结果显示六味木香丸在1.26 g·kg-1高剂量下对消炎痛及幽门结扎所致的大鼠胃溃疡模型具有明显改善作用(P＜0.05或P＜0.01).同时六味木香丸在1.26 g·kg-1和0.63 g·kg-1高、中剂量下能抑制大鼠的胃液及胃酸分泌，对胃液PH有一定的碱化效应(P＜0.05或P＜0.01).实验结果表明六味木香丸能够减少胃酸分泌，具有明显的抗胃粘膜损伤作用.现代研究发现胃酸分泌过高及胃蛋白酶活性过高是导致胃溃疡的主要因素之一［18］，所以，可以认为六味木香丸抗溃疡作用是该方中各个药物综合作用的结果，可能通过抑制胃液及胃酸过高的分泌，并碱化部分胃酸，保护胃黏膜，从而达到治疗作用.对于深层次的机制研究有待后期进一步研究.藏药六味木香丸是青藏高原地区常用来治疗胃肠疾病的藏药复方，但是其作用机制尚没有明确的科学依据，通过一系列的实验来确定其作用机制很有必要.

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Protective effect of Tibetan medicine Liuwei Muxiang pills on experimental rat gastric ulcer

LU Jian-mei，LU Lu-yang，ZHANG Ji-zhong，LIU Yuan
(Ethnic Medicine Institute，Southwest University for Nationalities，Chengdu 610041，P.R.C.)

To explore the effects and mechanism of Tibetan medicine Liuwei Muxiang pills on pylorus ligated gastric ulcer and drug gastric ulcer in rats，the pylorus ligated gastric ulcer model and drug gastric ulcer model were set up，and ulcer index，pH value of gastric juice，total acid of gastric juice and pepsin activity were measured.The results showed that Liuwei Muxiang pills could obviously or partly lower the ulcer index of gastric ulcer caused by indomethacin and ylori-ligation，also could obviously or partly reduce the secretion of gastric juice caused by pylori-ligation，and raise pH value of gastric juice，lower total gastric acid(P＜0.05 orP＜0.01)，suggesting that Liuwei Muxiang could inhibit the secretion of gastric acid and have alkalizing effect on pH of gastric juice(P＜0.05 orP＜0.01)，but no significant effect on pepsin secretion(P＞0.05).All results indicated that Liuwei Muxiang pills had certain protection effect on experimental gastric ulcer of rats.

Tibetan medicine;Liuwei Muxiang pill;ulcer;ulcer index;total gastric acid;pepsin

R285

A

2095-4271(2015)06-0713-04

10.11920/xnmdzk.2015.06.010

2015-06-24

吕露阳(1974-)，女，汉族，四川成都人，博士，讲师，研究方向:民族药物开发研究.E-mail:466472608@qq.com

四川省应用基础项目(编号:2013YJ0042);十二五国家科技支撑计划项目(2012BAI27B07)

(责任编辑:李建忠，付强，张阳，罗敏;英文编辑:周序林，郑玉才)