血清IL－16、IFN－r 在慢性阻塞性肺疾病患者中的检测价值

李敬萍，凌 敏 (新疆维吾尔自治区人民医院呼吸与危重症医学二科，新疆 乌鲁木齐 830002)

慢性阻塞性肺病(chronic obstructive pulmonary disease，COPD)是具有不完全可逆气流受限特征的疾病，呈进行性发展，与肺部对有害气体或有害颗粒的异常炎性反应有关［1］。是临床上常见疾病，且近年来该病患病率和病死率呈上升趋势，但其发病机制尚不清楚。主要认为中性粒细胞、巨噬细胞、淋巴细胞、肥大细胞和其他炎性反应细胞分泌的细胞因子、炎性反应介质参与疾病过程。随着分子生物学的发展，越来越多研究发现细胞因子在COPD 气道炎性反应中起着重要作用［2］。

研究表明COPD 患者在支气管肺泡灌洗液中干扰素－r(INF－r)显著增加，提示INF－r 存在激活或增强巨噬细胞功能［3］。本文旨在通过对COPD 患者的血清及痰中IL－16、INF－r 水平，以探讨其在COPD 发病中的作用及临床意义。

1 资料与方法

1.1 一般资料:选择2010 年9 月～2013 年1 月在新疆自治区人民医院呼吸内科住院的COPD 患者60 例，其中男35 例，女25例;年龄65 ～88 岁，平均(70.23±4.36)岁。均通过临床表现、实验室检查、肺部CT、肺功能等相关检查符合中华医学会呼吸病学会2002 年颁布的《慢性阻塞性肺疾病诊治指南》诊断标准。COPD 组纳入标准:符合指南诊断标准，年龄＞65 岁。按病情分为急性加重期及稳定期组;急性加重期组:指患者咳嗽、咯痰、呼吸困难等症状加重，需要改变日常治疗;稳定期:指患者咳嗽、咯痰气喘等症状稳定或轻微，不需要改变日常治疗，并维持8 周以上。排除标准:年龄＜65 岁;合并支气管哮喘、支气管扩张、有严重心血管系统疾病、肝胆系统疾病、机体其他疾病感染及近2 周内有抗病毒及非甾体类药物用药史。对照组选择年龄相匹配的同期入院体检者30 例，男18 例，女12 例;年龄67 ～85 岁，平均(68.23±3.52)岁，纳入标准:近1 个月无呼吸系统相关疾病，有吸烟史的研究对象需已戒烟5 年以上，且经过仔细病史采集、体格检查、胸部X 线、肺功能检查均未发现异常。

1.2 标本处理:痰液标本收集和处理 受试者清晨用温水漱口，在室温条件下0.9%生理盐水4 ml 吸入，30 min 后深咳留取5ml 痰标本置于带刻度的干燥杯，将收集的痰液与等量生理盐水混合，然后加入等体积的二硫苏糖醇混匀后，漩涡震荡30s，使痰液成完全均匀状态，4℃450 g/min 离心10 min，留取上清液标本置－80℃冰箱中冻存，待测IL－16 及INF－r 浓度。

外周血标本获取 受试者在早晨空腹状态下采静脉血5 ml，以3 000 r/min 转速离心10 min 后取血清，置于－80℃冰箱冻存待检。采用双抗体夹心酶联吸附试验测定血清中IL－16、干扰素－r 水平浓度。IL－16 试剂盒为美国PIERCE 原装试剂盒，IFN－r 试剂盒由北京晶美生物技术公司生产。采用ELx－800 型全自动酶标分析仪以490 nm 波长读盘。

1.3 统计学处理:采用SPSS17.0 软件处理。计量资料以均数±标准差表示。采用方差齐性检验、LSD 法，P ＜0.05 为差异有统计学意义。IL－16 与IFN－r 相关性分析采用Spearman 相关分析，P ＜0.01 为差异有统计学意义。

2 结果

2.1 COPD 患者与健康对照组血清IL－16、INF－r 水平比较:见表1。COPD 患者血清IL－16 水平急性加重期(2445.86±145.39 ng/L)高于稳定期(1 401.67±90.52 ng/L)，而稳定期患者高于健康对照组(129.35±15.48ng/L)，差异具有统计学意义(P ＜0.05);血清INF－r 水平COPD 急性发作期(22.86±3.38 pg/ml)较稳定期(16.55±2.82 pg/ml)，对照组(15.73±2.85 pg/ml)高，差异具有统计学意义(P ＜0.01)。

表1 COPD 患者急性加重期、稳定期和健康对照组血清IL－16、INF－r水平比较

表1 COPD 患者急性加重期、稳定期和健康对照组血清IL－16、INF－r水平比较

注:与稳定期和健康对照组相比，①P ＜0.01;与健康对照组，②P ＜0.01

组别 例数 IL－16(ng/L) IFN－r(pg/ml)急性加重期 30 2 445.86±145.39① 22.86±3.38①稳定期 30 1 401.67±90.52② 16.55±2.82健康对照组 30 129.35±15.48 15.73±2.85 F 值 4 096.024 49.8111 P 值 ＜0.01 ＜0.01

2.2 COPD 患者与健康对照组痰液IL－16、INF－r 水平比较:见表2，急性加重期组诱导痰液中IL－16(1431.16±264.26 ng/L)水平明显高于稳定期组和正常对照组水平(914.93±233.34 ng/L、858.63±144.70 ng/L)，差异有统计学意义(P ＜0.05)。急性加重期痰液中IFN－r 较稳定期组和健康对照组升高，差异有统计学意义(P ＜0.01)。且稳定期组和健康对照组IL－16、IFN－r 水平无明显差异。

表2 COPD 患者急性加重期、稳定期和健康对照组痰液中IL－16、INF－r 水平比较

表2 COPD 患者急性加重期、稳定期和健康对照组痰液中IL－16、INF－r 水平比较

注:与稳定期组、健康对照组比较，①P ＜0.01

组别 例数 IL－16(ng/L) IFN－r(pg/ml)急性加重期 30 1 431.16±264.26① 10.60±3.18①稳定期 30 914.93±233.34 6.51±2.77健康组 30 858.63±144.70 6.38±2.87 F 值 61.715 19.959 P 值 ＜0.01 ＜0.01

2.3 IL－16 水平与IFN－r 的相关性分析:结果显示血液及痰液中IL－16 水平与IFN－r 含量呈显著的正相关关系(r=0.630、0.594，P ＜0.01)。

3 讨论

COPD 是种气流受限疾病，持续性炎性反应和气道重塑是气流阻塞的病理生理基础。现研究表明其发病过程主要有大量细胞因子和炎性蛋白参与。细胞因子是调节和决定免疫反应性质的分泌性蛋白，白介素作为细胞因子家族成员，发挥着免疫细胞的成熟、活化、增殖和免疫调节作用。在对支气管哮喘患者研究中表明气道上皮中IL－16 高水平表达，提示淋巴细胞具有合成IL－16 的作用，并将其储存在细胞内［4］，反之IL－16 具有促进细胞、单核细胞的聚集功能，也可作为细胞生长因子并且促进二者的激活和增生［5］。同时这理论在对COPD 的研究中也得以体现，IL－16 参与了COPD气道炎性反应的发病过程，其机制可能与T 淋巴细胞活化有关［6］。

IL－16 主要由活化的T 细胞产生，与其受体结合后导致多种炎性细胞的浸润和活化。有研究表明单核巨噬细胞、中性粒细胞在炎症早期受到炎性反应刺激时分泌IL－16，同时受到趋化因子影响，使巨噬细胞，中性粒细胞向气道定向移动，引起聚集［7－8］。同时IL－16 可刺激外周血单核细胞、巨噬细胞分泌IL－6、IFN－r 等炎症因子，促进COPD 炎性反应的发生，发展。这一观点与在本试验对IL－16 和IFN－r 相关性分析中，两者存在正相关性相一致。故认为共同参与COPD 炎性反应过程。

本试验表明血清中IL－16 水平在急性发作期较稳定期和健康对照组明显升高，结果与顾浏樱、肖丹［9］，张晓军、何韶衡［10］等对IL－16 与COPD 的研究相一致。提示了可能在COPD 发生发展过程中，活化的T 细胞，中性粒细胞等分泌大量的IL－16，而IL－16 同时具有促进上述细胞因子分泌作用。同时稳定期含量较健康对照组高，表明IL－16 参与气道炎性反应，且水平高低与疾病所处分期有关，可反映气道炎症程度。而诱导痰中IL－16 在急性发作期和稳定期水平虽无统计学意义，但均较正常组明显升高。从而从诱导痰层面间接反映其参与炎性反应过程。同时通过对血清和痰液中IL－16 水平相比，血清IL－16 较痰中更能反映COPD 的炎性反应程度。

IFN－r 主要由活化的T 细胞和NK 细胞产生，可激活巨噬细胞、中性粒细胞和NK 细胞。IFN－r 介导的细胞免疫，具有促进Th1 细胞增殖和活化的能力［11－13］。研究显示COPD 中产生IFN－r 的T 细胞亚群占优势，在COPD 中升高，且具有协同清除病原体的作用。本试验通过对血液和诱导痰中检测IFNr 水平，表明在急性加重期中IFN－r 水平含量较稳定期和健康对照组增高，差异具有统计学意义(P ＜0.05)，但稳定期和健康对照组比较，差异无统计学意义(P ＞0.05)。无法单一通过检测IFN－r 水平来反应COPD 患者炎性反应程度。

本试验表明联合测定血清中IL－16、IFN－r 水平对COPD患者病情程度判断有一定意义。总之，笔者需要不断从分子生物学水平对COPD 的病理生理改变探索，才能对其发病机制有更深入的理解，更好地为临床工作服务。

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