HPLC法测定舒肝平胃丸中苍术素含量

刘加宝

(牡丹江大学 生物制药与食品工程学院，黑龙江 牡丹江 157000)



HPLC法测定舒肝平胃丸中苍术素含量

刘加宝

(牡丹江大学 生物制药与食品工程学院，黑龙江 牡丹江 157000)

目的：建立高效液相色谱法测定舒肝平胃丸中苍术素含量的方法。方法：采用C18色谱柱，流动相为甲醇-水(79∶21)，流速1.0mL·min-1，检测波长340nm。结果：线性回归方程为Y=0.094 2X+0.046 9，r=0.999 8，线性关系良好；平均回收率(n=5)为100.2%，RSD为0.41%。结论：该方法准确可靠，重现性良好，简单易行，适用于舒肝平胃丸中苍术素含量的测定。

HPLC法；舒肝平胃丸；苍术素；含量

“舒肝平胃丸”为《中国药典》2010版新增品种，由姜厚朴、陈皮、麸炒枳壳、法半夏、苍术、炙甘草和焦槟榔等七味中药组成，具有舒肝和胃、化湿导滞的作用。其中苍术为菊科植物茅苍术(Atractylodeslancea(Thunb.)DC.)或北苍术(Atractylodeschinensis(DC.) Koidz.)的干燥根茎，具有促进胃肠道运动、抗溃疡、抗心肌梗塞、抑制子宫平滑肌、止痛、保肝、抑菌等作用[1]。苍术主要成分为挥发油，其中主要活性成分为倍半萜类和聚乙烯炔类成分，苍术素属聚乙烯炔类成分[2]。舒肝平胃丸收载于《中国药典》2010版，其中记载厚朴中厚朴酚与和厚朴酚的含量测定，难以控制药品的质量，因此建立其他中药含量的测定方法，具有十分重要的意义。苍术中苍术素的含量测定方法报道较多[3-11]，本文在文献报道及法定标准的基础上，建立HPLC法测定舒肝平胃丸中苍术素含量的方法。结果表明，该方法简便、准确、灵敏、稳定，可用于制剂的质量控制，现具体报道如下。

1 材料

1.1 仪器

浙江福立FL2200I高效液相色谱仪(二元高压泵、自动进样器、紫外检测器)，N2200工作站；电子天平；超声波仪。

1.2 试药

苍术素(批号111924-201303)，购自中国食品药品检定研究院；甲醇为色谱纯，水为重蒸水，其他试剂均为分析纯。

2 方法与结果

2.1 色谱条件

色谱柱：C18色谱柱(4.6mm×250mm，5μm)；流动相：甲醇-水(79∶21)；检测波长340nm，柱温30℃。进样量：10μL；流速：1.0mL·min-1；理论塔板数按苍术素峰计算不低于3 000。

2.2 供试品溶液制备

取舒肝平胃丸适量，研细，取约1.0g，精密称定，置具塞锥形瓶中，精密加入甲醇25mL，密塞，称定质量，超声处理(功率350W，频率35kHz)1h，放冷，再称定质量，用甲醇补充减失的质量，摇匀，滤过，即得。

2.3 对照品溶液制备

取苍术素对照品适量，精密称定，加甲醇制成25μg·mL-1溶液，即得。

2.4 阴性对照溶液制备

取不含苍术的阴性对照样品(以舒肝平胃丸制法制备)，按供试品溶液制备方法制得阴性对照溶液。

2.5 线性关系考察

分别精密吸取对照品溶液，进样，进样量分别为2、5、10、15、20μL，记录色谱图，以峰面积(A)对进样量进行回归，线性方程为：Y=0.094 2X+0.046 9，r=0.999 8，线性关系良好，线性范围为0.050 6～0.506 0μg。

2.6 干扰性试验

取不含苍术的阴性样品，按供试品溶液制备方法处理，进样，阴性样品对苍术素无干扰。

2.7 重复性试验

取舒肝平胃丸，按“2.2”项方法制备6份，按“2.1”项色谱条件测定，以含量为指标计算RSD，考察方法重复性。结果显示：苍术素含量平均值为0.530mg/g，RSD为0.90%，表明该方法重复性良好。见表1。

2.8 稳定性试验

取“2.2”项制备的供试品溶液，分别于0、2、4、8、12、16h按“2.1”项色谱条件测定。以峰面积为指标计算RSD，考察供试品溶液的稳定性。结果显示：苍术素在6个时间点所测各色谱峰峰面积的RSD为1.19%，表明供试品溶液在16h内稳定。见表2。

表1 重复性实验结果 (mg/g)

表2 稳定性试验结果 (mg/g)

图1 舒肝平胃丸及对照品HPLC色谱

2.9 加样回收率试验

取已知苍术素含量的供试品5份，分别加入定量苍术素对照品，按拟定含量测定方法提取测定苍术素含量。结果显示：平均回收率为100.2%，RSD为0.41%。见表3。

2.10 三批样品测定

按拟定含量测定方法测定3批样品中苍术素含量，不同批号的苍术素含量稳定，可作为本品质量控制指标。结果见表4。

表3 加样回收率试验结果 (%)

表4 样品测定结果 (mg/g)

3 讨论

本文色谱条件的线性关系、重复性、稳定性、加样回收率均良好，方法可行。舒肝平胃丸中苍术素分离度好，完全分离，为控制该品质量提供较好的方法。该方法样品处理简单易行，能提高药品检验效率。

3.1 色谱条件的选择

流动相分别选择甲醇-水(79∶21)、甲醇-水(77∶23)和甲醇-水(80∶20)进行试验，其中甲醇-水(77∶23)组出峰时间过长，达到23min；甲醇-水(80∶20)组出峰时间较短，7min左右，但分离度不好，与其他成分未能完全分离。甲醇-水(79∶21)组较为合适，出峰时间为11～12min，分离度好，与其他成分完全分离。

3.2 样品处理

对样品分别进行加热回流处理和超声波处理，经比较加热回流方法提取较完全，但操作不方便，时间比较长；超声波法提取较加热回流法不完全，但操作简便，故选择超声波法。分别对超声时间0.5、1.0、1.5h进行试验，其中1h组提取较完全，且省时，故超声波处理时间选择1h。

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(责任编辑：李岚春)

2014-11-20

刘加宝(1977-)，男，硕士，牡丹江大学副教授，研究方向为生物制药。E-mail：baobao6927903@163.com

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1673-2197(2015)04-0040-02

10.11954/ytctyy.201504017