降脂脉安颗粒质量标准研究

金同庆，朱华荣(.昆山市中医医院，江苏 昆山 25000；2.扬子江药业集团有限公司，江苏 南京 225000)



降脂脉安颗粒质量标准研究

金同庆1，朱华荣2*
(1.昆山市中医医院，江苏 昆山 215000；2.扬子江药业集团有限公司，江苏 南京 225000)

目的：建立和完善降脂脉安颗粒的质量标准。方法：以紫外分光光度法测定降脂脉安颗粒中决明子蒽醌类成分和黄芪总皂苷的含量。结果：决明子蒽醌类成分在0.0025～0.0200mg/mL浓度范围内线性良好，r=0.9999，平均加样回收率97.59%，RSD=1.15%；黄芪总皂苷成分在0.016～0.036mg/mL浓度范围内线性良好，r=0.9996，平均加样回收率97.50%，RSD=1.29%。结论：此方法简便、准确、灵敏度高，重现性好，可作为该制剂的质量控制方法。

降脂脉安颗粒；紫外分光光度；总蒽醌；总皂苷；质量控制

降脂脉安颗粒是昆山市中医医院的自制制剂，处方是由生黄芪、丹参、决明子、生山楂、麦芽按照一定比例组成，并经过适当的方法制成的颗粒制剂。该制剂具有补气活血，消积祛瘀，治疗高脂血症、脂肪肝等症。本文对紫外分光光度法测定制剂中决明子总蒽醌和黄芪总皂苷的方法进行了方法学考察，包括线性范围、精密度、稳定性、重复性、加样回收率5个方面。获得了满意的结果，进一步提高了医院自制制剂的质量控制。

1 仪器与试药

1.1 仪器

FA2004N电子天平(上海精密科学仪器有限公司)，ZF20C暗箱式紫外线分析仪(上海市顾村电光仪器厂)，SHB-ⅢS循环水式多用真空泵(郑州长城科工贸有限公

司)，DZF-6050真空干燥箱(上海精宏实验设备有限公司)，HHS型电热恒温水浴锅(上海博迅实业有限公司医疗设备厂)，RE-52A型旋转蒸发仪(上海申胜生物技术有限公司)，HS3120超声仪。

1.2 试药

1，8-二羟基蒽醌对照品(中国食品药品检定研究院，批号0829-9702)；黄芪甲苷对照品(中国食品药品检定研究院，批号110781-200613)；降脂脉安颗粒(昆山中医医院自制制剂，批号为110708、111103、120309)；使用试剂均为分析纯。

2 定量分析

2.1 决明子

中医认为，决明子具有清肝明目、润肠通便的功效[1]。药理研究表明，决明子能降血脂、降血压、泻下、保肝、护眼[2-7]。决明子含有多种成分，如蒽醌类、萘骈-吡咯酮类、脂肪酸类、氨基酸、无机元素等，主要成分为蒽醌类，含量约占1%。文献报道了蒽醌类成分具有抗菌、调节免疫、降血脂、泻下、抗氧化等作用[8-11]。目前主要采用醇提取蒽醌苷，酸水解苷成苷元，再用氯仿萃取，醋酸镁显色，紫外分光光度法测定制剂中决明子总蒽醌[12-13]。

2.1.1 对照品溶液制备 取1，8-二羟基蒽醌对照品2.50mg，精密称定，置于50mL量瓶中，加乙醇至刻度，摇匀即得浓度为0.05mg/mL的对照品溶液。

2.1.2 供试品溶液制备 取降脂脉安颗粒(批号120309)1袋，约15g，精密称重，置圆底烧瓶中，加入200mL乙醇加热回流2h，滤过，再加入100mL乙醇回流1h，滤过，合并滤液，旋转蒸发至100mL以下，用25%乙醇定容至100mL备用。精密量取20mL，蒸干，加10%(V/V)盐酸溶液30mL，置沸水浴中加热水解1h，立即冷却。用氯仿强力振摇萃取4次，每次20mL，合并氯仿液并回收至干。残渣加入0.5%醋酸镁甲醇液溶解，并稀释至100mL，摇匀。

2.1.3 阴性对照品溶液制备 按处方量制成缺决明子的阴性模拟制剂，按“2.1.1”项下制备成阴性对照品溶液。

2.1.4 最大吸收波长 精密吸取1，8-二羟基蒽醌对照品溶液2mL，置于10mL量瓶中，水浴蒸发氯仿至干，残渣加入0.5%醋酸镁甲醇液溶解，并稀释至刻度，摇匀。于分光光度计200 ～ 800nm处扫描，由扫描结果确定最大吸收波长为507nm。

2.1.5 阴性干扰实验 分别精密吸取1，8-二羟基蒽醌对照品溶液、供试品溶液及阴性对照品溶液各2mL，依照“2.1.4”项下操作。结果1，8-二羟基蒽醌对照品溶液在507nm波长处有最大吸收，供试品溶液在相同的波长处有较大吸收，阴性对照品溶液在相同波长处无干扰峰。

2.1.6 标准曲线绘制 精密吸取1，8-二羟基蒽醌对照品溶液0.5、1.0、2.0、3.0、4.0mL，分别置于10mL量瓶中，水浴蒸发氯仿至干，残渣加入0.5%醋酸镁甲醇液溶解，并稀释至刻度，摇匀。以0.5%醋酸镁甲醇液为空白，于507nm处，按照紫外可见分光光度法(中国药典2010版一部 附录ⅤA)测定吸收度Y为纵坐标，浓度X(mg·mL-1)为横坐标，绘制标准曲线，结果回归方程为：Y=49.924X-0.004，r=0.9999，结果见表1、图1。

表1 标准曲线考察结果

图1 标准曲线

2.1.7 精密度考察 精密量取对照品溶液，按照“2.1.6”项下方法，自“水浴蒸发氯仿至干”起，依法连续测定6次，结果见表2，RSD=1.73%，表明此方法精密度良好。

表2 精密度试验

2.1.8 稳定性考察 取供试品溶液，在分光光度计上，于507nm处，以0.5%醋酸镁甲醇液为空白，每隔10min进行测定，结果见表3，RSD=1.22%，表明70min内溶液的稳定性良好。

表3 稳定性试验

2.1.9 重复性试验 按“2.1.2”项下制得同一批次(120309)供试品5份，以0.5%醋酸镁甲醇液为空白，在分光光度计上于507nm处，测定吸收度。结果总蒽醌平均含量为0.0183%，RSD=1.43%，重复性良好，见表4。

表4 重复性试验

2.1.10 回收率考察 精密称取同一批次(120309)降脂脉安颗粒6份，分别按“2.1.2”项下制得供试品溶液，每份分别量取20mL，加入1，8-二羟基蒽醌对照品溶液10mL，以0.5%醋酸镁甲醇液为空白，在分光光度计上，于507nm处，测定吸收度。结果平均回收率为97.59%，RSD=1.15%，见表5。

2.1.11 样品含量测定 按“2.1.2”项下制得3个批次(110708、111103、120309)供试品11份，以0.5%醋酸镁甲醇液为空白，在分光光度计上于507nm处测定吸收度。计算样品中总蒽醌的含量，结果见表6。

表5 回收率试验

表6 三批样品总蒽醌含量测定

根据3批样品测定结果，暂定样品中每袋含总蒽醌以1，8-二羟基蒽醌计算，每袋不得少于0.002g。

2.2 黄芪

中医认为，黄芪具有补气升阳、固表止汗、利水消肿、生津养血、排脓、生机等功效[14]，药理研究表明，黄芪具有调节免疫、抗炎、镇痛、利尿、耐缺氧及抗疲劳等功效[15-16]。其主要成分为三萜皂苷、多糖及黄酮类化合物。文献报道黄芪皂苷具有免疫调节、抗肿瘤、降糖和改善心血管疾病等生物活性[17-20]。目前黄芪皂苷类化合物多先采用醇类溶剂(如乙醇或甲醇等)提取，然后用紫外分光光度法测定黄芪总皂苷含量[21-22]。

2.2.1 样品制备 取降脂脉安颗粒一袋(批号120309)，约15g，精密称重，置圆底烧瓶中，加入200mL乙醇加热回流2h，滤过，再加入100mL乙醇回流1h，滤过，合并滤液，旋转蒸发至100mL以下，用乙醇定容至100mL备用。

2.2.2 阴性对照品溶液制备 按处方量制成缺黄芪的阴性模拟制剂，同上法制备成阴性对照品溶液。

2.2.3 对照品制备 用电子天平准确称取黄芪甲苷对照品6.0mg，用甲醇溶于50mL容量瓶中摇均即得浓度为0.12mg/mL对照品溶液。

2.2.4 测定波长 用移液管准确吸取1.0mL浓度为0.122mg/mL的黄芪甲苷溶液，加入干燥试管中，于恒温水浴锅中挥干甲醇溶液，加入新鲜配制的5%香草醛-冰酷酸溶液0.2mL，再加入0.8mL高氯酸溶液，摇匀，于60℃水浴加热15min，取出，然后在冰水中冷却10min，最后准确移取5mL冰醋酸至显色后的溶液中，空白为随行试剂，在400～700nm波长范围内进行扫描．结果黄芪甲苷对照品在579nm处有最大吸收，故测定波长为579nm。

2.2.5 阴性干扰实验 分别精密吸取黄芪甲苷对照品溶液、供试品溶液及阴性对照品溶液各1mL，依照“2.2.4”项下操作。结果黄芪甲苷对照品溶液在579 nm波长处有最大吸收，供试品溶液在相同的波长处有较大吸收，阴性对照品溶液在相同波长处无干扰峰。

2.2.6 线性关系考察 精确吸取对照品溶液0.8、1.0、1.2、1.4、1.6、1.8mL分别加入6个干燥具塞试管中，在恒温水浴锅中挥干甲醇溶液，分别加入新鲜配制的5%香草醛-冰醋酸溶液0.2mL，再加入0.8mL高氯酸溶液，摇匀，于60℃恒温水浴加热15min，取出，然后在冰水中冷却10min，最后准确移取5mL冰醋酸至显色后的溶液中，空白为随行试剂。在579nm下，按照紫外可见分光光度法(中国药典2010版一部 附录ⅤA)分别测出它们的吸光度，并以吸光度Y为纵坐标，黄芪甲苷的含量X为横坐标得回归方程为：Y=3.325r-0.0085，R=0.9996，见表7、图2。

表7 标准曲线考察结果

图2 黄芪甲苷标准曲线

2.2.7 精密度试验 精确吸取对照品溶液0.1mL，按照“2.2.6”项下，自“分别加入新鲜配制的5%香草醛-冰醋酸溶液0.2mL”起操作，依法测定吸光度，重复测定5次，其RSD为0.19%，结果表明精密度良好，见表8。

表8 精密度试验

2.2.8 稳定性试验 精确吸取样品溶液0.1mL，转入具

塞试管中挥干乙醇，按照“2.2.6”项下，自“分别加入新鲜配制的5%香草醛-冰醋酸溶液0.2mL”起操作，显色后放置0、0.5、1.0、1.5、2.0h后测定吸光度，其RSD为0.26%，结果表明样品溶液在2.0h内稳定，结果见表9。

表9 稳定性试验

2.2.9 重复性试验 按“2.2.1”项下制得同一批次(120309)样品溶液5份，每份各量取0.1mL，转入干燥具塞试管中挥干乙醇，按照“2.2.6”项下，自“分别加入新鲜配制的5%香草醛-冰醋酸溶液0.2mL”起操作，显色后测定吸光度，其RSD为0.21%，结果表明其重复性良好，结果见表10。

表10 重复性试验

2.2.10 加样回收率试验 称取同一批次(120309)降脂脉安颗粒6份，分别按“2.2.1”项下的方法制得供试品溶液，每份分别量取0.1mL，精密加入一定量的黄芪甲苷对照品溶液，按照“2.2.6”项下，自“分别加入新鲜配制的5%香草醛-冰醋酸溶液0.2mL”起操作，显色后测定吸光度，计算回收率，结果平均回收率为97.5%，RSD=1.29%，见表11。

表11 回收率试验

2.2.11 样品含量测定 按“2.2.1”项下方法制得3个批次(110708、111103、120309)样品溶液11份，每份各量取0.1mL，转入干燥具塞试管中挥干乙醇，按照“2.2.6”项下，自“分别加入新鲜配制的5%香草醛-冰醋酸溶液0.2mL”起操作，显色后测定吸光度，计算样品中总皂苷的含量，结果见表12。

表12 三批样品总蒽醌含量测定结果

根据3批样品测定结果，暂定样品中每袋含总皂苷以黄芪甲苷计算，每袋不得少于0.15g。

3 结语

本实验利用紫外分光光度法，测定医院自制制剂中总蒽醌的含量，方法简便、准确、灵敏度高。利用紫外分光光度法测定，以黄芪甲苷为对照品，测得标准曲线后，再测定黄芪中总皂苷的含量是非常成熟的方法。测定结果具有较高的参考价值。为昆山市中医医院的自制制剂降脂脉安颗粒的质量控制和标准提升，提供了一定的科学依据。

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(责任编辑：余 婷)

Quality Standards for Particles of Lipid-lowering Clock Security

Jin Tongqin1，Zhu Huarong2*
(1.Traditional Chinese Medicine Hospital of Kunshan,Kunshan 215000,China;2.Yangzi River Pharmacetuical Group,Nanjing 225000,China)

Objective:To establish and improve the quality of the particles of lipid-lowering clock security standards.Methods:UV spectrophotometry cassia seed,anthraquinones and saponins in Radix Astragali.Results:cassia seed anthraquinones.0025～0.0200mg/mL concentration range of linear,r = 0.999 9,the average recoveries of 97.59%,RSD=1.15%; total saponins in astragalus 0.016～0.036mg / mL,good linearity in the range r=0.999 6,average recoveries of 97.5%,RSD=1.29%.Conclusion:The method is simple,accurate,high sensitivity,good reproducibility can be used as a quality control method for the preparation

Lipid-lowering clock security particles; UV spectrophotometry; Total anthraquinone; Total saponins determination of content

2015-01-23

金同庆(1980-)，男，江苏省昆山市中医医院主管中药师，研究方向为中药学。

朱华荣(1981-)，男，硕士，扬子江药业集团有限公司高级项目管理师，研究方向为中药、天然药物开发。

R284.2

A

1673-2197(2015)15-0042-05

10.11954/ytctyy.201515018