HPLC法测定脑血栓片中阿魏酸含量

郭淑霞,张秀丽(.朝阳健康药业有限公司,辽宁 朝阳 000；.朝阳市食品药品检验所,辽宁 朝阳 000)



HPLC法测定脑血栓片中阿魏酸含量

郭淑霞1,张秀丽2
(1.朝阳健康药业有限公司,辽宁 朝阳 122000；2.朝阳市食品药品检验所,辽宁 朝阳 122000)

目的：采用高效液相色谱法测定脑血栓片中阿魏酸的含量。方法：采用Kromasil C18(4.6mm×250mm,5μm)色谱柱；以甲醇-2%醋酸溶液(20∶80)为流动相；流速:1.0mL/min；检测波长λ=323nm；柱温:28℃。结果：阿魏酸线性范围为10.05～201.00μg/mL (r=0.999 5),平均回收率为99.27%，RSD为1.2% (n=6)。结论：该方法简便、准确、重复性好，可用于脑血栓片的质量控制。

脑血栓片；HPLC法；阿魏酸；含量测定；质量控制

脑血栓片收载于卫生部药品标准中药成方制剂第十九册，是由川芎、 红花、当归、水蛭(制)等10味中药制备而成的片剂，具有活血化瘀、醒脑通络、潜阳熄风之功效，对于因瘀血﹑肝阳上亢出现的中风先兆，如肢体麻木﹑头晕目眩等及脑血栓形成出现的中风不语﹑口眼歪斜﹑半身不遂等症具有预防和治疗作用。脑血栓片原质量控制标准过于简单，为了更好地控制其质量，本试验增加了川芎的含量测定项[1-6]。

1 仪器与试药

岛津LC-2010A型高效液相色谱仪(包括LC-2010型紫外检测器、LC solution色谱工作站)；岛津UV-2550紫外分光光度计；阿魏酸(批号：111773-201012)；对照品购自中国食品药品检定研究院；脑血栓片(吉林一晟达药业有限公司，批号：20120101、 20120304、 20130401)；甲醇为色谱纯，其它为分析纯；水为超纯水。

2 方法与结果

2.1 色谱条件

色谱柱：Kromasil C18(4.6mm×250mm；5μm)；流动相：甲醇-2%醋酸溶液(18∶82)；柱温：28℃;流速：1.0mL/min；进样量：10μL；理论塔板数以阿魏酸计不低于8 000。

2.2 溶液制备

取本品20片，除去包衣，精密称定，研细，取约2.0g，精密称定，置具塞锥形瓶中，精密加入40%乙醇-冰醋酸(20∶1)混合溶液25 mL，称定重量，置水浴上加热回流1h，放冷，再称定重量，用40%乙醇-冰醋酸(20∶1)混合溶液补足减失的重量，摇匀，离心，取上清液经0.45μm滤过即得供试品溶液。取阿魏酸对照品适量，精密称定，加40%乙醇-冰醋酸(20∶1)混合溶液制得每1mL含10.05μg的对照品溶液。按处方及工艺制备不含川芎的阴性样品，同供试品溶液的制备方法制备阴性对照溶液。

2.3 方法学考察

2.3.1 阴性干扰试验 取“2.2”项下3种溶液各10μL，分别注入高效液相色谱仪，结果见图1，显示待测峰与其它峰分离度大于1.5，峰形良好，阴性无干扰。

图1 脑血栓片HPLC色谱

2.3.2 线性关系考察 分别精密吸取对照品溶液1、5、10、15、20μL，分别注入液相色谱仪中，测定峰面积。以进样量(X)为横坐标，色谱峰面积(Y)为纵坐标，绘制标准曲线，得阿魏酸线性回归方程为Y=314 614.5X-101 902(r=0.999 6)，线性范围为10.05～201.00μg/mL。

2.3.3 精密度试验 精密吸取对照品溶液，连续进样6次，每次进样10μL，测定峰面积，结果阿魏酸峰面积的RSD为1.03%，表明仪器精密度良好。

2.3.4 重复性试验 取同一批(批号为20120101)样品2.0g，按“2.2”项下供试品溶液制备方法平行制备6份供试品溶液，依法测定，结果贝阿魏酸的RSD为0.95%，表明该方法重复性良好。

2.3.5 稳定性试验 取同一批供试品溶液(批号为20120101)10μL，按上述色谱条件，分别于0、2、4、 8、12、24h时测定，结果阿魏酸峰面积的RSD为0.89%，表明供试品溶液在24h内稳定。

2.3.6 加样回收率试验 取已知含量的供试品溶液(批号20120101，阿魏酸含量为0.1835mg/g)6份，每份约1.0g，精密称定，分别精密加入阿魏酸对照品，按供试品溶液方法制备，依法测定含量并计算回收率。结果见表1。

表1 阿魏酸回收率试验结果

2.4 样品含量测定

取3批样品，依法测定，采用外标法计算样品中阿魏酸的含量，批号20120101、20120304、20130401样品中阿魏酸含量分别为：0.183 5mg/g、0.179 4mg/g、0.180 2mg/g；RSD分别为0.87%、1.01%、0.76%。

3 讨论

3.1 检测波长的选择

取阿魏酸对照品溶液，在200～400nm范围内进行扫描，结果在波长323nm处有最大吸收，所以选323nm作为测定波长。3.2 流动相的选择

分别以甲醇-水(18∶82)、乙腈-水(18∶82)、甲醇-2%醋酸溶液(18∶82)作为流动相进行试验，结果以甲醇-2%醋酸溶液(18∶82)为流动相时，分离度大于1.5，峰形良好，所以选甲醇-2%醋酸溶液(18∶82)为流动相。3.3 提取时间的选择

比较加热回流提取30、60、90min的提取效果，结果表明加热回流提取60min提取率最高。

[1] 国家药典委员会. 中国药典[S].一部.北京：中国医药科技出版社，2010：274.

[2] 闫建坤，李红英，于得才，等.HPLC测定温肾调经颗粒中阿魏酸的含量[J].包头医学院学报,2014,30(2):9-10.

[3] 张祖亮,梁健健.HPLC法测定催乳颗粒中阿魏酸的含量[J].海峡药学,2014,26(4):70-71.

[4] 胡小云,马海平,赵吉平.HPLC法测定头痛糖浆中阿魏酸的含量[J].湖北中医杂志,2014,36(5):67-68.

[5] 郑江平,雷震,黄良永.川芎及其配方颗粒中阿魏酸的含量比较[J].中医药信息,2014,31(2):73-76.

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(责任编辑：宋勇刚)

Determination of Ferulic Acid in Cerebral Thrombosis Tablets by HPLC

Guo Shuxia1,Zhang Xiuli2
(1.Chaoyang Health Pharmaceutical Co., Ltd., Liaoning 122000,China; 2.Chaoyang Food and Drug Inspection Institute, Liaoning 122000, China)

Objective:To develop a HPLC method for the determination of ferulic acid in Naoxueshuan table. Methods:The separation was performed at 28℃ on a Kromasil C18column(4.6mm×250mm,5μm) with a mobile phase of methanol-2% acetic acid(18∶82)； The flow rate was 1.0mL/min , and the detecting wavelength was set at 323nm;Results:The linear rang of Schisandrin was from 10.05～201.00μg/mL。The average recovery of Schisandrin was 99.27%,RSDwas 1.2%(n=6);Conclusion:The method is simple and can accuraate with good reproducibility，It can be used for quality control of Naoxueshuan table.

Naoxueshuan Table；HPLC；Ferulic Acid； Content Determination ；Quality Control

2015-03-25

郭淑霞(1966-),女，朝阳健康药业有限公司主管中药师，研究方向中药鉴定。

R284.2

A

1673-2197(2015)15-0047-02

10.11954/ytctyy.201515019