两种相似度表征参芪王浆养血口服液指纹图谱质量研究

祖 双，刘黎峰，梁 洁，刘明颖，肖 雪2,,4，罗国安

(1.吉林敖东延边药业股份有限公司，吉林 延边 133700；2. 广东药学院，广东 广州 510006；3.清华大学 分析中心，北京 100084；4. 中山大学 南沙研究院， 广东 广州 511458)



两种相似度表征参芪王浆养血口服液指纹图谱质量研究

祖 双1，刘黎峰1，梁 洁2*，刘明颖3，肖 雪2,3,4，罗国安3

(1.吉林敖东延边药业股份有限公司，吉林 延边 133700；2. 广东药学院，广东 广州 510006；3.清华大学 分析中心，北京 100084；4. 中山大学 南沙研究院， 广东 广州 511458)

目的：用两种相似度评价方法进行参芪王浆养血口服液指纹图谱相似度的评价，为其质量控制提供依据。方法：采用中药色谱指纹图谱相似度评价系统(2004A版)和程度相似度对参芪王浆养血口服液指纹图谱进行相似度评价。结果：两种方法对参芪王浆养血口服液指纹图谱相似度均有有效表征。结论：程度相似度可作为参芪王浆养血口服液的质量控制方法。

参芪王浆养血口服液；指纹图谱；相似度

参芪王浆养血口服液是由人参、黄芪、当归、蜂王浆等原料经现代生产工艺制成，主要功能为补益气血、养心安神，可用于气血两虚证，症见神倦乏力、食欲不振、失眠等[1]。在研究过程中，我们采用中药色谱指纹图谱相似度评价系统(2004A版)对其进行了相似度评价研究[2-4]，发现其表征参芪王浆养血口服液的整体质量存在些许不足。因此本试验引入了程度相似度技术[5-7]对参芪王浆养血口服液指纹图谱进行相似度评价研究。

1 仪器与试药

1.1 仪器

Agilent 1100型高效液相色谱仪(包括G13158 DAD检测器、G1312A低压四元泵、在线脱气机、自动进样器、柱温箱)(Agilent科技有限公司，美国)，KQ-500E超声波清洗器(昆山超声设备有限公司)，Mill-Q Synthesis超纯水纯化系统(美国Millipore公司)，Excellence XP205型十万分之一分析天平(Mettler Toledo公司)，SL300N型电子天平(上海精密科学仪器有限公司)等。

1.2 材料

乙腈(色谱纯、Fisher公司)，甲酸(分析纯，北京现代东方精细化工有限公司)，超纯水自制。参芪王浆养血口服液由吉林敖东延边药业股份有限公司提供。

1.3 软件

中药色谱指纹图谱相似度评价系统(2004A版)(国家药典委员会)，程度相似度评价软件V1.0(清华大学罗国安教授研究团队自主研发)

2 方法与结果

2.1 色谱条件[8]

Agilent Zorbax-SB C18色谱柱(4.6mm×250mm，5μm)；流动相：采用梯度洗脱，A相为水，B相为乙腈(0～20min，B：1.0～8.0%；20～35min，B：8.0～40%；35～60min，B：40～95%；60～65min，B：95%～95%)；流速：1.0mL/min，DAD检测器，柱温35 ℃，检测波长为203nm，进样量为5μL。所得到的指纹图谱见图1。

2.2 中药色谱指纹图谱相似度评价

采用中药色谱指纹图谱相似度评价系统(2004A版)进行相似度评价，选取13个共有峰为参照，将9个批次指纹图谱导入中药色谱指纹图谱相似度评价系统(2004A版)，时间窗设置为0.1min，以S1为基准，设为中位数，自动匹配，生成对照图谱，并采用夹角余弦法计算相似度，结果见表1。

图1 参芪王浆养血口服液203nm检测结果

2.3 程度相似度评价

程度相似度软件V1.0是清华大学罗国安教授研究团队自主研发的一款用于评价指纹图谱量化相似度软件，其主要原理是通过比较各色谱峰峰面积的差异，来表征指纹图谱的相似度。本试验选取“2.2”项下13个指标峰的峰面积作为原始参数，同时求算13个指标峰的平均值，导入程度相似度软件，以平均值为目标指标，计算各个指标峰的程度相似度，并计算13个指标峰的平均程度相似度作为该指纹图谱的程度相似度。结果见表1。

表1 9批成品相似度评价结果

3 讨论

按照国家药典委员会关于“中药注射液指纹图谱研究的技术要求(暂行)通知”，采用中药色谱指纹图谱相似度评价系统(2004A版)计算的相似度均≥0.85，其结果表明，参芪王浆养血口服液指纹图谱方法可操作性强、重复性好，也说明了在此指纹图谱条件下参芪王浆养血口服液中含有的物质基础变化不大。此相似度评价技术可以作为参芪王浆养血口服液指纹图谱的初步评价基础。

采用程度相似度软件得到的相似度数据参差不齐，整体数据偏低，同时程度相似度计算的是各个指标峰的峰面积，其代表了该指标峰所表征的物质含量，因此，程度相似度的数据一定程度上表明了参芪王浆养血口服液中主要指标成分的含量差异较大。

目前诸多中药(原药材、提取物、中间体、成品等)采用中药色谱指纹图谱相似度评价系统进行质量评价，均取得了较好的研究结果[9]。我们建议在保证采用中药色谱指纹图谱相似度评价系统得到良好的质量保证之后，开展对中药的主要成分进行含量稳定性的控制研究，而采用程度相似度技术则是一个较好的选择。

[1] 金光日，洪海. 参芪王浆养血口服液中10-羟基-2-癸烯酸(10-HAD)的含量测定[J].长春中医药大学学报，2007，23(5)：32-33.

[2] 罗国安，梁琼麟，王义明.中药指纹图谱-质量控制与新药研发[M].北京：化学工业出版社，2009.

[3] 罗国安，王义明.中药指纹图谱的分类和发展[J]. 中国新药杂志，2002(11):46-51.

[4] 肖雪，罗国安，王义明，等.中药板蓝根高效液相色谱法指纹图谱研究[J].江西中医学院学报，2010，22(3)：67-69.

[5] 段和祥，刘永锁，罗国安，等.程度相似度结合聚类分析在金银花药材质量评价中的应用[J]. 中成药，2007，29(3)：318-321.

[6] 刘永锁，孟庆华，蒋淑敏，等. 相似系统理论用于中药色谱指纹图谱的相似度评价[J]. 色谱，2005，23(2)：158-163.

[7] 聂磊，曹进，罗国安，等.中药指纹图谱相似度评价方法的比较[J].中成药，2005，27(3)：249-252.

[8] 祖双，梁洁，刘明颖，等.参芪王浆养血口服液高效液相指纹图谱研究[J].亚太传统医药，2014,11(2)：19-21.

[9] 曹进，饶毅，沈群，等. 中药指纹图谱及其建立原则[J].中药新药与临床药理，2001，12(3)：200-203.

(责任编辑：宋勇刚)

The Quality Study of Nourishing Oral Liuid of Royal Jelly, Ginseng and Astragalus Root by Two Kinds of Similarity Methods

Zu Shuang1, Liu Lifeng1, Liang Jie2*, Liu Mingying3, Xiao Xue2, 3, 4, Luo Guoan3

(1.Jilin Aodong Medicine Industry Group Co., Ltd., Yanbian 133700, China; 2.Guangdong Pharmaceutical University, Guangzhou 510006, China; 3.Analysis Center, Tsinghua Unviersity, Beijing 100084, China; 4.Nansha Research Institute, Sun Yat-sen University, Guangzhou 511458, China)

Objective:To evaluate the quality of Nourishing Oral Liuid of Royal Jelly, Ginseng and Astragalus Root (NOLRJGA) by two kinds of similarity methods.Methods:The chromatographic fingerprint similarity evaluation system (2004 A) and the extent similarity were used to evaluate the fingerprints of NOLRJGA.Results: The two kinds of similarity methods were useful to evaluate the quality of NOLRJGA. Conclusion:The extent similarity could be an effective method to control the quality of NOLRJGA.

Nourishing Oral Liuid of Royal Jelly, Ginseng and Astragalus Root, Fingerprint, Similarity

2014-09-27

祖双(1970-)，男，吉林敖东延边药业股份有限公司主管药师，研究方向为中药质量控制。

梁洁(1969-)，女，广东药学院副教授，研究方向为食品质量安全及中药质量控制。

R284

A

1673-2197(2015)03-0030-02

10.11954/ytctyy.201503012