辛 颖,达拉胡
(内蒙古民族大学 蒙医药学院,内蒙古 通辽 028000)
蒙药玉簪花不同萃取部位抗炎活性研究
辛 颖,达拉胡
(内蒙古民族大学 蒙医药学院,内蒙古 通辽 028000)
目的:从蒙药玉簪花的不同萃取部位筛选出活性部位。方法:采用二甲苯致小鼠耳廓肿胀实验模型、角叉菜胶致大鼠足跖肿胀实验模型对蒙药玉簪花不同萃取部位进行抗炎活性考察。结果:玉簪花的乙酸乙酯萃取部位、正丁醇萃取部位可显著减轻二甲苯所致的小鼠耳廓肿胀度(P<0.05,P<0.05)及角叉菜胶作用3、4h后引起的大鼠足肿胀度(P<0.01,P<0.05)。结论:蒙药玉簪花乙酸乙酯萃取部位、正丁醇萃取部位有抑制急性炎症的作用,可能是玉簪花抗炎的活性部位。
玉簪花;蒙药;抗炎作用;耳廓肿胀;足跖肿胀
玉簪花是百合科玉簪属植物玉簪Hostaplantaginea(Lam.)Aschers的干燥花,蒙药名为邦占嘎尔布、查干邦占、哈斯-哈塔胡尔-其其格等[1]。在《中华本草》(蒙药卷)中记载其性寒,味涩、苦,效柔、软、稀,具有清热、解毒、利咽喉、止咳等功效,主治肺热、毒热、咽喉肿痛和音哑等[2]。玉簪花作为蒙医习用传统药材,在蒙医中主要用其花治疗急、慢性咽炎,特别是作为蒙药玉簪清咽十五味丸/散的主要药材之一,治疗咽喉肿痛、气喘、音哑、胸肋刺痛等。本课题组在前期实验中证实玉簪花的乙醇提取物具有明显的抗炎及抑菌作用[3,4],现进一步对玉簪花的抗炎活性部位进行筛选,旨在为玉簪花的物质基础及质量控制研究等方面提供实验依据。
1.1 药材与试剂
玉簪花购自通辽市蒙药股份有限公司;角叉菜胶(Sigma公司,批号127H1227);阿司匹林(贵州信邦药业有限公司,批号110114);其他试剂均为分析纯。
1.2 动物
昆明种小鼠,雌雄兼用,体重18~24g;Wistar大鼠,雌雄兼用,体重180~200g,由吉林大学实验动物饲养中心提供(许可证号:SCXK-(2011-0004))。
1.3 仪器
电子调温电热套(天津市秦斯特仪器有限公司,98-1B型);旋转蒸发仪(EYEL4,OSB-2100);循环水式多用真空泵(河南郑州长城科工贸有限公司,SHZ-Ⅲ);电子天平(上海仪器有限公司,YP1201N),精密电子天平(日本岛津,AUW220D);足趾容积测量仪(中西远大科技有限公司,HZ905-ZH-YLS-7B)。
2.1 玉簪花不同溶剂萃取物制备
将玉簪花的干燥花切断粉碎后过20目筛,倍量95%乙醇加热回流提取3次,合并滤液,减压回收溶剂,加适量水溶解后,依次用石油醚、乙酸乙酯和正丁醇萃取至有机溶剂层颜色较浅,减压回收溶剂,分别得到石油醚部位、乙酸乙酯部位、正丁醇部位的浓缩浸膏,低温保存备用。
2.2 玉簪花不同溶剂萃取物实验用剂量确定
根据前期急性毒性实验结果,得出玉簪花石油醚部位的半数致死量(LD50)为3.95g·kg-1,换算成干燥药材剂量为119.7g·kg-1;正丁醇部位的LD50为8.04g·kg-1,换算成干燥药材剂量为120g·kg-1;乙酸乙酯部位的最大耐受量为3.5g·kg-1,换算成干燥药材剂量为87.5g·kg-1。本实验使用的玉簪花三个萃取部位,在换算成干燥药材量时均相等(12g·kg-1)的剂量下,研究其对急性炎症动物模型的影响。
2.3 二甲苯致小鼠耳廓肿胀实验[5]
取小鼠72只,雌雄各半,按体重随机分为6组,即模型对照组、阿司匹林组、玉簪花石油醚萃取物组、乙酸乙酯萃取物组、正丁醇萃取物组和清喉利咽颗粒组,每组12只。连续灌胃给予不同药物10天,末次给药1h后,将二甲苯均匀涂抹于小鼠右侧耳壳正反两面(每只25μL)后脱颈椎处死,沿耳廓剪下两耳,于同一部位用打孔器(8~9mm)打下耳片,电子天平称重。以两耳重量之差为肿胀度,按公式计算耳肿胀率及肿胀抑制率。肿胀率(%)=(肿胀耳重量—对照耳重量)/对照耳重量×100%;肿胀抑制率(%)=(对照组平均肿胀率—给药组平均肿胀率)/对照组平均肿胀率×100%。
2.4 角叉菜胶致大鼠足跖肿胀实验[6]
取大鼠60只,雌雄各半,按体重随机分为6组,即模型对照组、阿司匹林组、玉簪花石油醚萃取物组、乙酸乙酯萃取物组、正丁醇萃取物组和清喉利咽颗粒组,每组10只。各组连续灌胃给予不同药物10天,末次给药1h后,同时测量其正常右后足跖容积,于大鼠右后足跖掌心向踝关节方向进针,每只皮下注射1%角叉菜胶0.1mL致炎。然后分别于0.5、1、2、3、4、5、6h测定其右后足跖容积,计算肿胀率并比较组间差异性。肿胀率(%)=(致炎后足跖容积—致炎前的足跖容积)/致炎前的足跖容积×100%。
2.5 统计学处理
3.1 二甲苯致小鼠耳廓肿胀实验
致炎30min后,各组小鼠右耳均可见高度红肿。玉簪花的乙酸乙酯萃取部位和正丁醇萃取部位可显著减轻二甲苯致炎小鼠的耳廓肿胀度(P<0.05,P<0.05),石油醚萃取部位则作用不显著(P>0.05),提示乙酸乙酯萃取部位和正丁醇萃取部位有抑制急性炎症的作用,但其抑制作用较阿司匹林弱(P<0.01)。结果见表1。
表1 玉簪花不同萃取部位对二甲苯所致小鼠耳廓肿胀的影响
注:与模型对照组比较,*P<0.05,**P<0.01。
3.2 角叉菜胶致大鼠足跖肿胀实验
致炎1h后,各组大鼠右后足均可见红肿,各组的肿胀度及抑制率结果见表2。实验结果表明,乙酸乙酯萃取部位在造模后2、3、4h足跖肿胀率均显著低于模型对照组(P<0.01,P<0.01,P<0.05);正丁醇萃取部位在造模后3、4h足跖肿胀率极显著低于模型对照组(P<0.01,P<0.05);石油醚萃取部位则作用不显著(P>0.05),提示乙酸乙酯萃取部位、正丁醇萃取部位有抑制急性炎症的作用,但抑制效果低于阿司匹林组(1、2、3、4、5h均表现出很好的抗炎效果,P<0.01)。
表2 玉簪花不同萃取部位对角叉菜胶所致大鼠足跖肿胀的影响 (±s)
注:与模型对照组比较,*P<0.05,**P<0.01。
炎症是机体组织对损伤因子引起局部损伤的防御反应,在炎症的早期,血管受到炎症介质的刺激而扩张,导致血管内皮间隙扩大、血管壁通透性增加以及血浆内液体渗出到组织间隙等,并随着渗出的增加,造成组织肿胀。因此,炎性渗出和组织肿胀是炎症早期的重要特征。
急性炎症发病快、持续时间短,一般仅几天到1个月,主要表现为渗出性病变;慢性炎症持续时间较长,有时可达数月至数年,常伴有增生性病变。急性炎症模型常以致炎剂二甲苯诱发小鼠耳廓肿胀和角叉菜胶致大鼠足跖肿胀等实验验证药物的抗炎作用。化学致炎剂二甲苯可引起组胺激肽、纤维蛋白溶解酶等炎性介质释放,进而引起局部毛细血管通透性增加及炎症细胞浸润,最终引发耳部急性渗出性炎性水肿[7];具有刺激性的角叉菜胶注入大鼠足跖后,可使大鼠的足跖局部毛细血管充血、水肿,引发足跖体积增加,同时伴有红、肿、热、痛等症状[8]。
玉簪花具有清热、解毒、利咽喉、止咳等功效,临床上多用于治疗急慢性咽炎、肺热、毒热、咽喉肿痛和音哑。本实验研究表明,玉簪花的乙酸乙酯萃取部位、正丁醇萃取部位可显著减轻二甲苯致炎小鼠的耳廓肿胀度(P<0.05,P<0.05)和由角叉菜胶作用3、4h后引起的大鼠足跖肿胀度(P<0.01,P<0.05),石油醚萃取部位则作用不显著(P>0.05)。提示其乙酸乙酯部位和正丁醇部位有抑制急性炎症的作用,为玉簪花抗炎活性部位。该研究为今后玉簪花植物中具有抗炎活性单体的研究开发奠定了理论和实验基础,而其抗炎的机制有待进一步研究。
[1] 罗布桑.识药学[M].呼和浩特:内蒙古人民出版社,1998:61.
[2] 国家中医药管理局《中华本草》编委会.中华本草(蒙药卷)[M].上海:上海科学技术出版社,2004:142.
[3] 辛颖,白玉花.蒙药玉簪花乙醇提取物体外和体内的抑菌活性研究[J].中成药,2015,37(3):659-662.
[4] 辛颖,红艳.蒙药玉簪花乙醇提取物的抗炎作用实验研究[J].内蒙古民族大学学报:蒙医药版,2014,24(2):27-31.
[5] 郑仁礼,张晓春,陈敏.复方护肺颗粒抑菌、抗炎作用研究[J].中国现代应用药学杂志,2015,32(2):144-147.
[6] 潘利明,林励.玉叶金花水提物不同萃取部位的抗炎活性研究[J].广东药学院学报,2013,29(5):530-532.
[7] 王秀玲.二甲苯毒理学研究进展[J].国外医学·卫生学分册,1997,24(2):15-17.
[8] 周重楚,高洪波,刘威,等.国产角叉菜胶的致炎作用[J].中国药理学通报,1988,4(4):249-250.
(责任编辑:魏 晓)
Study on the Anti-inflammatory Activities of Different Extracted Portions from Mongolian Medicine Hosta plantaginea
Xin Ying,Dalahu
(The College of Mongolian Medicine and Pharmacy,Inner Mongolia University for the Nationalities,Tongliao 028000,China)
Objective:To investigate the anti-inflammatory portions extracted from Mongolian medicine Hosta plantaginea.Methods:The dimethybenzene-induced mouse ear edema model and the carrageenan-induced rat paw edema model were eatablished to evaluate the anti-inflammatory effect of different extracted portions from Mongolian medicine Hosta plantaginea.Results:The portions extracted with ethyl acetate and n-butanol significantly reduced both the dimethybenzene-induced ear swelling in mice and carrageenan-induced hind paw swelling in rats.Conclusion:The portions extracted with ethyl acetate and n-butanol show an inhibitory effect on acute inflammation.
HostaPlantaginea;Mongolian Medicine;Anti-inflammatory Activities;Ear Edema;Paw Edema
2015-07-10
辛颖(1980-),女,内蒙古民族大学副教授,研究方向为蒙药化学与药理。
R285.5
A
1673-2197(2015)23-0005-02
10.11954/ytctyy.201523002