微波辅助乙醇提取葛根素技术研究

王 辉，刘长路

(四川文理学院“特色植物开发研究”四川省高校重点实验室，四川达州635000)

1 引言

葛根素是一种异黄酮化合物［1］，主要来源为豆科植物野葛或甘葛藤的根部提取。目前已经被证明具有促进血液循环，提高免疫，增强心肌收缩力，保护心肌细胞，降低血压，抗血小板聚集等作用［2－3］。因此，从葛根中提取葛根素的研究已有较多的研究报道［4－6］。而粉葛作为日常一种保健功能的中药材，其中葛根素的含量直接决定其的保健及药用功效。采用微波辅助乙醇提取粉葛中的葛根素的方法，通过正交实验对比选择提取葛根素的最佳提取工艺条件，不但可以确立一种微波提取葛根素的工艺，还可以为粉葛中的葛根素含量检测提供理论基础。

2 实验部分

2.1 仪器与试剂

仪器:紫外分光光度计(日本岛津，UV2550)，微波催化合成/萃取仪(上海新仪，MAS－II)。试剂:葛根(粉葛，采购于达州市博爱大药房)，葛根素分析标准品(阿拉丁试剂)，其余试剂均为分析纯。

2.2 葛根素标准曲线的绘制

精密称取称取葛根素5.9 mg定容于100 mL，取2.0、4.0、6.0、8.0、10.0 mL 于 25 mL 容量瓶中，95% 乙醇定容摇匀。用紫外－可见分光光度计以95%乙醇试剂作为空白参比，在250 nm处测吸光度。通过回归方程分析得到葛根素质量浓度和吸光度的关系式:y=0.0758x+0.0059，R2=0.9999。如图1所示，表明葛根素质量浓度在5～25 mg/L范围内线性良好。

2.3 超声波辅助乙醇提取工艺考察

2.3.1 正交实验设计

真空干燥后的葛根经中药粉碎机粉碎后准确称取2.00 g分别按照正交实验L9(34)因素条件(表1)进行提取，提取后进行抽滤除去滤渣，然后将滤液使用95%乙醇定容于100 mL容量瓶中，然后精密量取2.0 mL所以95%乙醇定容于25 mL容量瓶中，摇匀后在250 nm处测其吸光度。

图1 葛根素标准曲线

表1 正交实验的因素与水平(设定提取温度:80℃)

2.3.2 正交实验结果

按照表一中正交实验的因子与水平，设计并进行正交实验，根据吸光度计算提取含量所得实验结果如表2所示。

表2 正交实验结果

从表2分析可见，4个正交实验因素对白藜芦醇的提取影响可以看出其中R－D为最大值，说明提取时的料液比是影响提取的关键因素;R－B为最小值，说明提取微波功率影响葛根素提取效果最小。综合以上各因素的影响，粉葛中提取葛根素的4个提取因素含量影响大小的顺序为D＞C＞A＞B。并可以确定超声波提取白藜芦醇最佳工艺为50% 乙醇、500 W超声波功率、25 min提取时间以及1∶30的料液比。

3 结果讨论

正交实验结果可以直接看出，微波辅助乙醇提取粉葛中的葛根素的几个因素都存在着不同大小的影响，其中料液比影响较大，可以认为是由于粉葛中的淀粉较多，随着加热的进行，大量淀粉溶出致使葛根素提取受到影响。根据正交试验优化后的提取条件对葛根素进行提取，在50% 乙醇、500 W超声波功率、25 min提取时间以及1∶30的料液比的条件下葛根素提取率为0.837%。

［1］张尊听，王小玲，刘谦光，等.秦岭太白野葛根异黄酮成分的研究［J］.中国药学杂志，1999，34(5):301 ～302.

［2］朱应磊，吕欣然.葛根素的药理学和临床应用研究进展［J］.中草药，1997，28(11):693 ～696.

［3］王 靖，吉 民，华维一，等.葛根素研究进展［J］.药学进展，2003，27(2):70 ～73.

［4］韩 剑，曹 伟，尹 华，等.正交试验法优选葛根素提取工艺［J］.中国医院药学杂志，2007，27(3):332 ～333.

［5］邱 远，芮 昕，谢翌冬，等.响应面法优化超声提取葛根素工艺［J］.食品科学，2014，35(6):1 ～3.

［6］孙向阳，张永玲，张振巍，等.星点设计－效应面法优化葛根素提取工艺［J］.中药材，2012，35(6):980 ～983.