痰标本中检出一例水生拉恩菌

方 毅，赵付菊， 张景皓，赵 虎

(复旦大学附属华东医院检验科，上海200040)

水生拉恩菌(Rahnella aquatilis)属于肠杆菌科拉恩菌属中的一个种［1］，为条件致病菌，较少引起临床致病，从深部咳痰标本中分离出此菌极少见。复旦大学附属华东医院检验科从1例患者痰标本中分离出1株水生拉恩菌。

一、病例资料

1.一般情况 患者女，60岁。入院前1周患者自觉全身乏力加重，有咳痰，痰量不多，于复旦大学附属华东医院住院治疗。入院检查显示，血常规:白细胞12.4×109/L，中性粒细胞88%，淋巴细胞10%，单核细胞2%，血红蛋白104 g/L，血小板208×109/L，C反应蛋白17.0 mg/L;神智清楚，体温36.8℃，双肺叩诊呈清音，呼吸音清晰，未闻及干、湿性啰音。入院后取患者深部咳出的痰标本进行细菌培养，分离到水生拉恩菌，且从其在血琼脂平板上的菌落生长情况来看，此菌落较纯，基本抑制了痰中的正常菌群(如草绿色链球菌和卡他布拉汉菌等)和其它杂菌的生长。经左氧氟沙星抗感染治疗，患者1周后治愈出院。

2.培养与分离 收到痰标本后，立即对痰标本质量进行检查，涂片染色结果为合格痰标本(白细胞＞25/低倍视野，上皮细胞＜10/低倍视野)。随即接种血平板、中国蓝平板和巧克力琼脂平板(上海科玛嘉公司)，5%～10%CO2环境中培养24h后，血琼脂平板上可见中等大小、灰白色、圆形稍凸起、光滑湿润、边缘整齐、不溶血的菌落。将第2天血琼脂平板上的纯培养菌落进行涂片和革兰染色镜检，为革兰阴性杆菌，氧化酶试验为阴性。

3.细菌的鉴定 (1)采用VITEK 2 Compact全自动微生物分析系统及其配套的鉴定卡(GN卡，法国生物梅里埃公司)进行鉴定，根据其生化反应结果的编码4601530513560010，鉴定为水生拉恩菌，鉴定率为90%;(2)采用质谱仪(VITEKMS)(法国生物梅里埃公司)进行鉴定，鉴定为水生拉恩菌，鉴定率为99.9%;(3)采用分子生物学方法进行鉴定(测序)，由上海桑尼生物工程有限公司合成细菌的通用引物，27F:5'-AGAGTTTGATCCTGGCTCAG-3'，1492R:5'-CTACGGCTACCTTGTTACGA-3'。试验方法:利用 16SrDNA两端的引物聚合酶链反应(polymerase chain reaction，PCR)扩增未知菌株的16SrRNA基因，并进行DNA测序，与NCBI GenBank中的已知序列进行同源性比较后，判定细菌种类，将细菌划分到属或种。鉴定结果:水生拉恩菌，鉴定率为99%。

4.药物敏感性试验 采用纸片扩散法进行体外药物敏感性试验［2］。抗菌药物纸片由Oxoid公司提供，水解酪蛋白胨平板由科玛嘉公司提供。试验结果提示该菌对头孢噻肟、头孢曲松、头孢他啶、头孢美唑、头孢西丁、美罗培南、亚胺培南、氨苄西林-舒巴坦、左氧氟沙星、哌拉西林-他唑巴坦、复方磺胺甲噁唑均敏感，而对一、二代头孢菌素类(头孢唑啉和头孢呋新)均耐药，对青霉素类单药(氨苄西林)耐药。

二、讨论

拉恩菌属为肠杆菌科中的一个菌属，其较为重要的一个种即为水生拉恩菌。有报道从同一患者的血液中2次分离培养出同一株水生拉恩菌，此患者出现了持续1周的高热，并伴随右上腹疼痛［3］;还有报道从一位老年患者脑脊液中分离出1株水生拉恩菌，此患者有头痛、发热伴呕吐的症状［4］。华东医院的这例患者在2014年3月诊断为抗中性粒细胞抗体相关性血管炎，给予甲泼尼龙进行治疗，并在4、5、6月进行了3次环磷酰胺冲击治疗，因为该药物为免疫抑制剂，可导致患者抵抗力下降，容易引起条件致病菌继发感染。该患者在7月下旬入院时有咳嗽、咳痰，肺部CT未见明显炎症，考虑急性支气管炎，使用左氧氟沙星抗感染治疗后，在住院期间咳嗽、咳痰的症状有所好转。

人体内及外界环境中存在很多种类的细菌，人类和细菌是共存的，有些细菌为正常菌群，有些则是条件致病菌。细菌检出的部位不同，其临床意义也不同。如草绿色链球菌在痰标本中检出是正常菌群，但在血标本中检出则为致病菌，可能是亚急性细菌性心内膜炎的病原菌。此次讨论的这个病例就可能是由于机体接受免疫抑制剂治疗后机体抵抗力下降，导致条件致病菌引发机体感染。对于这个病例，我们的体会是微生物工作人员在对患者的标本做细菌鉴定和药物敏感性试验时，需要全面考虑，不放过任何一个有可能引起感染的细菌(包括一些定植菌和条件致病菌)，对所检出的细菌做全面的药物敏感性试验，让医生及时选用合适的抗菌药物进行有针对性的治疗，有利于患者尽早康复。

［1］叶应妩，王毓三，申子瑜.全国临床检验操作规程［M］.3版.南京:东南大学出版社，2006:801-821.

［2］Clinical and Laboratory Standards Institute.Performance standards for antimicrobial susceptibility testing;twenty-second Informational Supplement［S］.M100-S23，CLSI，2013.

［3］张春花，谢国艳，倪语星，等.血液培养分离出水生拉恩菌1例［J］.检验医学，2004，19(2):162.

［4］邓书杰，张京文.水生拉恩菌致脑膜炎1例［J］.临床检验杂志，2002，20(2):97.