北细辛原粉及其不同提取物抗炎作用初探

魏新智，王清华，付勇强，王 珲，王 英，尤春来，孙科峰

(辽宁中医药大学附属医院中医药实验中心，辽宁 沈阳 110032)

北细辛原粉及其不同提取物抗炎作用初探

魏新智，王清华，付勇强，王 珲，王 英，尤春来，孙科峰

(辽宁中医药大学附属医院中医药实验中心，辽宁 沈阳 110032)

目的 初步探讨北细辛原粉及其不同提取物的抗急性炎症作用。方法采用巴豆油引起的小鼠耳肿胀法和角叉菜胶引起的大鼠足爪肿胀法，观察北细辛原粉及其不同提取物的抗急性炎症作用。结果北细辛原粉低、中、高剂量组及北细辛挥发油低、中、高剂量组均有抑制小鼠耳肿胀作用；挥发油高剂量组还具有抑制及大鼠足趾肿的作用。结论北细辛原粉及北细辛挥发油有抗急性炎症作用。

北细辛；急性炎症；小鼠；大鼠

北细辛为马兜铃科植物北细辛[Asarum heletotropoides Fr.SehmidI var.mandshurieum(Maxim.)Kitag.]的干燥根及根茎，具有祛风散寒，通窍止痛，温肺化饮等功效，主要用于风寒感冒、头痛牙痛、鼻塞流涕、鼻鼽鼻渊、风湿痹痛、痰饮喘咳[1]。进年来随着对细辛的临床及实验研究，发现细辛及其提取物具有抗炎作用[2-10]，但对于同一品种细辛的药材及其提取物的系统的抗急性炎症研究少见。北细辛为辽宁的道地药材，相较于其他产地细辛具有高效低毒[5，11]、资源丰富等特点，为目前临床应用的主要品种，因而对北细辛的深入详细研究十分必要。本实验就北细辛药材及其提取物抗炎作用方面做一初步研究，为临床应用提供药理学数据。

1 材料与方法

1.1 实验动物 KM品种SPF级小鼠，雄性，18~22 g，北京华阜康生物科技有限公司，许可证编号：SCXK(京)2009-0004；SPF级Wistar大鼠，体重130~150 g，雄性，北京华阜康生物科技有限公司，许可证编号：SCXK(京)2009-0004。

1.2 试验药物 北细辛药材购自辽宁本溪，经辽宁中医药大学鉴定教研室翟延君教授鉴定为药典所载品种的根及根茎。

1.2.1 北细辛原粉 北细辛500 g，粉碎成细粉后过100目筛，得灰白色粉末420 g。

1.2.2 北细辛水煎液 北细辛1 000 g，第1次加水10倍量，煎煮2 h，第2次加水8倍量，煎煮1.5 h，合并两次煎煮液，浓缩至500 ml深棕色药液，浓度为2 g/ml。

1.2.3 北细辛挥发油 北细辛3 kg，加10倍量水，水蒸气蒸馏提取挥发油，收集挥发油40 ml。

1.2.4 阳性对照药 醋酸泼尼松片，天津太平洋制药有限公司生产，产品批号：100106，实验时用生理盐水配成相应浓度。

1.3 试剂 巴豆油：日本和光株式会社产品，批号 DCCL7737；乙醇：沈阳第一试剂厂，批号2001110801；吡啶：天津市大茂化学试剂厂，批号20040514；无水乙醚：国药集团化学试剂有限公司，批号20070416；角叉菜胶：sigma公司。

1.4 主要仪器 打孔器：YLS-25A济南益延科技发展有限公司；足趾容积测量仪：YLS-7B济南益延科技发展有限公司。

1.5 方法

1.5.1 小鼠耳肿胀法[12](1)巴豆油混合液：V巴豆油：V乙醇：V吡啶：V乙醚=1：10：20：69。(2)操作步骤：小鼠适应性饲养3 d，随机分为生理盐水组、大豆油组，醋酸泼尼松组，北细辛原粉低、中、高剂量组，北细辛水煎液低、中、高剂量组，北细辛挥发油低、中、高剂量，各组按表1剂量给药，每日两次，分别给药3 d，第4天早给药1次，30 min后将巴豆油混合液涂在小鼠右耳的前后面上，每只0.01 ml。左耳不做任何处理，1 h后，将动物处死，剪下双耳用打孔器分别在同一部位打下圆耳片，分析天平称重，观察耳肿胀度(鼠右耳重量-左耳重量)。

1.5.2 大鼠足爪肿胀法[12](1)致炎剂配制方法：角叉菜胶，蒸馏水配成1%浓度的溶液。(2)操作步骤：大鼠适应性饲养3 d，随机分为生理盐水组、大豆油组，醋酸泼尼松组，北细辛原粉低、中、高剂量组，北细辛水煎液低、中、高剂量组，北细辛挥发油低、中、高剂量，各组按表2剂量给药，每日两次，分别给药3 d，第4天早给药1次，30 min后将动物右后肢拉直，用注射器先自足趾中部皮下向上注入一部分角叉菜胶，然后向下掉转针头向下注完，每只0.1 ml，分别于注入后30 min、1 h、2 h、4 h、6 h，用足容积检测仪测定各组每只大鼠右后足趾容积，每只大鼠致炎前先测右后足趾容积，观察不同时间点足肿胀度(右足致炎后体积-右足致炎前体积)。

1.6 统计学方法 应用SPSS13.0统计软件进行数据分析，实验数据以均数±标准差(±s)表示，组间比较采用t检验，以P＜0.05为差异有统计学意义。

2 结果

2.1 小鼠耳肿胀法 北细辛原粉低、中、高、剂量组有抑制小鼠耳肿胀的作用，与对照组比较差异有统计学意义(t=2.576，P＜0.05；t=2.538，P＜0.05；t=8.125，P＜0.01)；北细辛挥发油低、中、高剂量组有抑制小鼠耳肿胀的作用，与对照组比较差异均有统计学意义(t=5.234、t=7.082、t=7.929，P＜0.01)，而水煎液无明显抑制小鼠耳肿胀的作用，见表1。

表1 北细辛原粉及不同提取物抗急性炎症实验—耳肿胀法统计结果(±s)

表1 北细辛原粉及不同提取物抗急性炎症实验—耳肿胀法统计结果(±s)

注：a表示醋酸泼尼松组与生理盐水组比较t=8.310，P＜0.01；b表示北细辛散剂低、中剂量组与生理盐水组比较分别为t=2.576，P＜0.05；t= 2.538，P＜0.05；c表示北细辛散剂高剂量组与生理盐水组比较t= 8.125，P＜0.01；d表示北细辛挥发油低、中、高剂量组与大豆油组比较分别为t=5.234、t=7.082、t=7.929，P值均＜0.01。

组别生理盐水组醋酸泼尼松组北细辛散剂低剂量组北细辛散剂中剂量组北细辛散剂高剂量组北细辛水煎液低剂量组北细辛水煎液中剂量组北细辛水煎液高剂量组大豆油对照组北细辛挥发油低剂量组北细辛挥发油中剂量组北细辛挥发油高剂量组动物只数12 11 12 12 12 11 12 11 12 12 12 12药物剂量-0.01 g·kg-1·d-10.3 g·kg-1·d-11.0 g·kg-1·d-13.0 g·kg-1·d-10.3 g·kg-1·d-11.0 g·kg-1·d-150.0 g·kg-1·d-1-0.02 ml·kg-1·d-10.06 ml·kg-1·d-10.20 ml·kg-1·d-1耳肿胀度(mg) 5.4±1.0 1.9±0.6a3.8±0.9b3.5±1.1b2.0±0.5c3.8±1.1 4.6±1.4 4.2±0.8 5.0±1.1 2.5±0.8d1.9±0.5d1.7±0.4ab

2.2 大鼠足爪肿胀法 北细辛挥发油高剂量组有抑制大鼠足趾肿胀作用(4 h、6 h)，与大豆油组比较差异均有统计学意义(t=3.982、t=5.515，P＜0.01)，而原粉、水煎剂及挥发油低、中剂量组无明显抑制大鼠足趾肿胀作用，见表2。

表2 北细辛原粉及不同提取物抗急性炎症—足肿胀法实验结果(±s)

表2 北细辛原粉及不同提取物抗急性炎症—足肿胀法实验结果(±s)

注：a表示泼尼松组(2 h，6 h)与生理盐水组比较分别为t=2.634、t=2.519，P均＜0.05；b表示泼尼松组(1 h，4 h)与生理盐水组比较分别为t=9.824、t=12.758，P＜0.01；c表示北细辛挥发油高剂量组(4 h，6 h)与大豆油组比较分别为t=3.982、t=5.515，P均＜0.01。

组别 动物数 药物剂量 不同时间点(右足致炎后体积-右足致炎前体积)容积(ml)生理盐水组醋酸泼尼松组北细辛散剂组北细辛散剂组北细辛散剂组北细辛水煎液组北细辛水煎液组北细辛水煎液组大豆油组北细辛挥发油北细辛挥发油北细辛挥发油991 0 -10 10 10 10 10 10 10 10 10 0.01 g·kg-1·d-10.2 g·kg-1·d-10.6 g·kg-1·d-11.8 g·kg-1·d-10.2 g·kg-1·d-10.6 g·kg-1·d-135.0 g·kg-1·d-1-0.015 ml·kg-1·d-10.050 ml·kg-1·d-10.150 ml·kg-1·d-130 min 0.32±0.09 0.19±0.09 0.42±0.08 0.40±0.09 0.32±0.07 0.25±0.04 0.28±0.07 0.29±0.09 0.33±0.08 0.30±0.09 0.29±0.09 0.31±0.06 1 h 0.55±0.08 0.23±0.06b0.68±0.14 0.75±0.17 0.46±0.10 0.37±0.09 0.35±0.07 0.48±0.07 0.43±0.15 0.38±0.10 0.35±0.11 0.34±0.04 2 h 0.59±0.06 0.37±0.07a0.62±0.07 0.84±0.22 0.53±0.13 0.44±0.07 0.48±0.13 0.50±0.14 0.53±0.13 0.56±0.12 0.44±0.10 0.45±0.07 4 h 0.71±0.10 0.27±0.02b0.72±0.11 0.90±0.19 0.59±0.11 0.60±0.13 0.56±0.15 0.62±0.20 0.55±0.17 0.57±0.19 0.47±0.13 0.30±0.08c6 h 0.59±0.07 0.32±0.07a0.49±0.10 0.61±0.18 0.42±0.09 0.65±0.10 0.59±0.16 0.61±0.19 0.60±0.11 0.49±0.13 0.46±0.12 0.35±0.09c

3 讨 论

细辛，以气为治也。凡药香者，皆能疏散风邪，细辛气盛而味烈，其疏散之力更大。且风必挟寒以来，而又本热而标寒，细辛性温，又能驱逐寒气，故其疏散上下之风邪，能无微不入，无处不到也，具有祛风散寒、通窍止痛、温肺化饮等功效。而现代药理学研究细辛及其提取物具有广泛的药理作用，包括：中枢抑制、解热镇痛作用，抗炎、免疫抑、强心、扩血管、降血脂、解痉平喘、祛痰镇咳、抗菌、抗病毒作、抗氧化、抗衰老作用[13]。同时，细辛为小毒中药材，古有“细辛，若单用末，不可过半钱匕，多即气闷塞，不通者死”之说，即使是2010版《中华人民共和国药典》规定细辛用量为1~3 g，散剂为0.5~1 g，但是现代临床上汤剂里细辛用量达到80 g[14]。本实验用剂量是根据临床常用剂量及前期毒性试验剂量而设计，且不同组别的高剂量组均为安全且可灌胃给药的最大剂量。

炎症是临床常见的症状，是机体对于刺激的一种防御反应，急性炎症以发红、肿胀、疼痛等为主要征候，即局部血管扩张和毛细血管通透性增加所致。而小鼠耳肿胀和大鼠足趾肿胀法，具有方法简便、见效快、用药量少、复制成功率高、差异性小、重现性好等特点，是目前比较常见的抗炎药物筛选模型。

本实验应用两种急性炎症动物模型——小鼠耳肿胀法和大鼠足爪肿胀法，双重评价北细辛原粉及不同提取物的抗急性炎症作用，结果发现北细辛原粉及挥发油在两种动物模型中均有明显的抗炎作用，而水煎液无明显抗炎作用，另外我们还对北细辛脂溶性成分(高剂量组)进行了研究，未发现有抗炎作用，这与文献报道[2，5]不一致，可能是由于实验用药处理方法不同所致。

综上，可认为本实验条件及实验剂量下挥发油在北细辛抗炎作用中起主要作用，但是抗炎的具体成分及机理还有待于进一步研究，而挥发油也是细辛的主要毒性物质，提示临床应用散剂时应注意剂量。

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Anti-inflammatory roles of Asarum original powder and different extracts in experimental research.

WEI Xin-zhi,WANG Qing-hua,FU Yong-qiang,WANG Hui,WANG Ying,YOU Chun-lai,SUN Ke-feng.Experiment Center of Traditional Chinese Medicine,the Affiliated Hospital of Liaoning University of Traditional Chinese Medicine,Shenyang 110032,Liaoning,CHINA

ObjectiveTo explore the roles of Asarum original powder and different extracts against acute inflammation.MethodsThe anti-inflammatory roles of of Asarum original powder and extracts were observed by investigating their effect against croton oil-induced mouse ear swelling and carrageenan-induced rat paw swelling.ResultsThe Asarum original powder of low,medium and high dose and volatile oils of low,medium and high dose all can inhibit mouse ear swelling.Volatile oil of high dose can also inhibit rats paw swelling.ConclusionThe Asarum original powder and volatile oil have anti-inflammatory effect.

Asarum;Acute inflammation;Mice;Rats

R-332

A

1003—6350（2015）09—1253—03

10.3969/j.issn.1003-6350.2015.09.0451

2014-10-28)

孙科峰。E-mail：kefengsun_lnzy@hotmail.com