两种POCT法测定血HCG的比对研究

袁晓华，杨春菊，胡惠萍，张 伟

(黄石市中心医院检验科，湖北 黄石435000)

两种POCT法测定血HCG的比对研究

袁晓华，杨春菊，胡惠萍，张 伟

(黄石市中心医院检验科，湖北 黄石435000)

目的分析金标斑点POCT法和免疫荧光POCT法检测血HCG的性能。方法将306例样本按照浓度从低到高分为6个组，第1组86例、第2组60例、第3组14例、第4组68例、第5组41例、第6组37例。用电化学发光法(ECLIA)、金标斑点POCT法、免疫荧光POCT法平行检测这6个组的血HCG浓度。以ECLIA法为标准对金标斑点POCT法和免疫荧光POCT法的结果进行配对资料的t检验。结果(1)免疫荧光POCT法的比对：第1组样本，免疫荧光POCT法和ECLIA法的符合性好；2～5组样本，免疫荧光POCT法和ECLIA法的检测结果比较差异无统计学意义；第6组样本，免疫荧光POCT法和ECLIA法的检测结果的差异有统计学意义(P＜0.05)。(2)金标斑点POCT法的比对：1～2组样本，金标斑点POCT法和ECLIA法的符合性好；3～4组样本，金标斑点POCT法和ECLIA法的检测结果比较差异有统计学意义。结论免疫荧光POCT法能简便、快速、准确的检测血HCG的浓度，且检测的准确度比金标斑点POCT法好，检测的量程比金标斑点POCT法宽。免疫荧光POCT法更适合于目前各类医院血HCG的急诊检验。

人绒毛膜促性腺激素；即时检验(POCT)；免疫荧光干式定量法；电化学发光法(ECLIA)

随着免疫技术的发展，即时检验(Point-of-care testing，POCT)在检验医学中的新领域受到人们的关注和重视，它能快速的发出检验报告，对急诊抢救的意义重大，已扩展到监测血凝状态、心肌损伤、酸碱平衡、感染性疾病和激素水平监测等方面[1]。人绒毛膜促性腺激素(HCG)是一种糖蛋白激素，尿液定性检测HCG只能诊断早孕，而血液定量检测HCG能诊断早孕和宫外孕，能动态的观察先兆流产及判断预后，还可用于恶性葡萄胎、绒癌的辅助诊断及治疗后随访的观察指标[2]。POCT法检测血HCG，样本可用全血、血清或血浆，检测过程不超过20min，大大缩短了报告时间，现分析这种方法的检测性能。

1 材料与方法

1.1 一般材料2014年10月1日至2014年10月31日，检验科8 h内检测的血HCG样本共306例。用ECLIA法检测的浓度范围为＜0.1～141428.0 mIU/ml。把这些样本分为6个组：＜2 mIU/ml为第1组86例；2～25 mIU/ml为第2组60例；26～500 mIU/ml为第3组14例；501～15000 mIU/ml为第4组68例；15001～50000 mIU/ml为第5组41例；＞50000 mIU/ml为第6组37例。

1.2 仪器和试剂 ECLIA法，德国罗氏诊断有限公司生产的cobas6000生化免疫分析系统e601模块和配套的绒毛膜促性腺激素及β亚单位检测试剂盒(电化学发光法)，质控品为两个浓度的cobas Cobas preciControl Universal和RANDOX非定值血清(人)水平2和水平3，均值分别为5.97 mIU/ml、46 mIU/ml、25.8 mIU/ml、391 mIU/ml。免疫荧光POCT法，韩国BodiTech Med Inc制造的i-CHROMATM Reader免疫荧光分析仪和配套的总β人绒毛膜促性腺激素检测试剂盒(免疫荧光干式定量法)。金标斑点POCT法，奥普U2型金标斑点法定量读数仪及配套β人绒毛膜促性腺激素检测试剂盒。

1.3 方法 每天在白班结束时，用两种POCT法重新测试当天8 h内用ECLIA法检测过的血HCG样本，记录结果。

1.3.1 POCT法的操作 严格按照试剂盒说明书，取血清进行操作，然后在分析仪中扫描并读取结果。

1.3.2 ECLIA法的操作 遵照试剂盒说明书中有关e601的相关指导，并参照分析仪操作手册来设置免疫分析仪的操作方法，＞10000 mIU/ml的样本，仪器自动1:100稀释。每天用四个浓度的质控品进行质量控制。

1.4 统计学方法 应用SPSS16.0软件对2～6组各检测方法的结果进行配对资料的t检验，以P＜0.05为差异有统计学意义。

2 结 果

2.1 两种POCT法检测低浓度血HCG的符合性 免疫荧光POCT法检测第1组的86例样本，其中有82例＜2 mIU/ml(最小表达单位)，符合率为95.3%。金标斑点POCT法检测第1组的结果全部＜25 mIU/ml(最小表达单位)，符合率为100%，金标斑点POCT法检测第2组的60例样本，其中有49例＜25 mIU/ml(最小表达单位)，符合率为81.7%。说明两种POCT法对于低浓度血HCG的检测和电化学发光法的符合性好。

2.2 免疫荧光POCT法检测中、高浓度血HCG的符合性2～6组的样本220例，对这几组的免疫荧光POCT结果和ECLIA结果分别进行配对资料的t检验，t值分别为1.824、1.913、1.741、1.975、2.357，其中2～5组的P值均＞0.05，说明当血HCG浓度范围在2～50000 mIU/ml时免疫荧光POCT法和ECLIA法的检测结果比较差异无统计学意义。第6组的P值＜0.05，说明当血HCG浓度＞50000 mIU/ml时，免疫荧光POCT法和ECLIA法的检测结果比较差异有统计学意义，见表1。

表1 免疫荧光POCT法和ECLIA法检测220例样本的一致性

2.3 金标斑点POCT法检测中、高浓度血HCG的符合性3～4组的样本82例，对这两组的金标斑点POCT法结果和ECLIA法结果进行配对资料的t检验，t值分别为2.333和2.608，P值均＜0.05，显示当血HCG浓度范围在25～15000 mIU/ml时金标斑点POCT法和ECLIA法的检测结果比较差异有统计学意义，见表2。

表2 金标斑点POCT法和ECLIA法检测82例样本的一致性

3 讨 论

HCG在人的血液中有β单位、α亚单位、高糖基化HCG、缺刻HCG等，是维持妊娠的重要激素之一[3]。近20年来，异位妊娠的发生率持续上升，已成为孕早期死亡的常见原因[4]。因为HCG定性检测不能提示胚胎发育、区分流产、宫外孕、葡萄胎等多种病理情况，所以HCG定量检测替代定性检测这一观念得到了认可和普及。临床上也由此对血HCG的检测技术提出了更高的要求，一是要求检测准；二是要求检测快。应运而生的第一代POCT方法是胶体金试纸法，该方法与化学发光法比较，差异有统计学意义[5]，这里不做讨论。第二代POCT方法是金标斑点定量检测系统和免疫荧光干式定量法。为此，我们做了这两种方法的比对实验来验证哪一种POCT法更适用于临床，这对于人工授精试管婴儿植入成功的早期观察，某些宫外孕以及滋养层细胞肿瘤手术和化疗疗效观察可能有更多的参考意义[6]。

我们选择了以罗氏Cobas6000及配套电化学发光检测系统为比对方法，以免疫荧光POCT法和金标斑点POCT法为实验方法，平行检测了306例临床随机样本。实验结果表明：(1)免疫荧光POCT法对于＜2 mIU/ml的低浓度血HCG样本和ECLIA法的符合性好。对于浓度范围在2～50000 mIU/ml的中、高浓度血HCG样本，免疫荧光POCT法和ECLIA法的检测结果比较差异无统计学意义。只有当血HCG浓度＞50000 mIU/ml时免疫荧光POCT法和ECLIA法的检测结果差异才有统计学意义。可是当血HCG结果在＞50000 mIU/ml这种超高浓度时发生一定程度的偏移，已经不影响医生对病情的诊断。(2)金标斑点POCT法对于＜25 mIU/ml低浓度血HCG样本和ECLIA法的符合性好，对于浓度范围在25～15000 mIU/ml的中、高浓度血HCG样本，金标斑点POCT法和ECLIA法检测结果差异有统计学意义。

以上实验结果说明免疫荧光POCT法在检测血HCG浓度的准确性方面要优于金标斑点POCT法。另外免疫荧光POCT法的最小浓度表达单位为＜2 nmIU/ml，比金标斑点POCT法低了10倍，最大浓度表达单位为300000 mIU/ml，比金标斑点POCT法高了20倍。这种高量程的检测方法在低浓度时能让医生直观确切的知道血HCG浓度，在高浓度时不仅节省了稀释样本的时间，提高了检测效率，还节约了试剂成本，降低了犯错误的机会。结论：免疫荧光POCT法能简便、快速、准确的检测血HCG的浓度，且检测的准确度比金标斑点POCT法好，检测的量程比金标斑点POCT法宽。免疫荧光POCT法更适合于目前各类医院血HCG的急诊检验。

[1]万本愿,姜青龙.POCT的临床应用及存在问题[J].实验与检验医学,2011,29(4):387-390.

[2]叶应妩,王毓三,申子瑜.全国临床检验操作规程[M].3版.南京:东南大学出版社,2006:520-521.

[3]方从举.胶体金试纸法和化学发光免疫法检测全分子HCG的观察[J].临床实验医学杂志,2008,7(5):41-45.

[4]许淑祥.HCG分子结构与免疫定量分析[J].中国医学检验杂志,2004,2:288-31.

[5]卢桂香.胶体金试纸法和化学发光免疫法检测全分子HCG分析[J].当代医学,2012,18(5):25-26.

[6]高晓霞.196例POCT法与化学发光法血HCG检测结果的分析[J].中国医药导刊,2012,14(8):1412-1413.

Comparative study of two point-of-care testing methods in detecting blood HCG.

YUAN Xiao-hua,YANG Chun-ju,HU Hui-ping,ZHANG Wei.Department of Clinical Laboratory,Huangshi Central Hospital,Huangshi435000, Hubei,CHINA

ObjectiveTo analyze the performance between two point-of-care testing methods POCT,dot immunogold method and immunofluorescence technique)for detecting human chorionic gonadotropin(HCG).MethodsA total of306 cases of samples were divided into six groups according to the concentration from low to high:86 cases in group1,60 cases in group2,14 cases in group3,68 cases in group4,41 cases in group5,37 cases in group6.The blood HCG concentration of the6 groups was detected by electrochemiluminescence immunoassay (ECLIA),Dot immunogold method and immunofluorescence technique.On the basis of ECLIAmethod,the performances of dot immunogold method and immunofluorescence technique were analyzed byttest.Results(1)Immunofluorescence technique and ECLIAwere found in good accordance in group1.The detection results of the two methods showed no statistically significant difference in group2～5,while they had statistically significant difference in group6(P＜0.05). (2)Dot immunogold method and ECLIA were in good accordance in group1～2,and the detection results of the twomethods had statistically significant difference in group3～4.ConclusionImmunofluorescence technique is simple,rapid and accurate for the detection of blood HCG,which has better accuracy and wider detection range than dot immunogold method.Thus,immunofluorescence technique is more suitable for the emergency test of HCG in hospitals at present.

Human chorionic gonadotropin(HCG)；Point-of-care testing(POCT);Immunofluorescence technique;Electrochemiluminescence immunoassay(ECLIA)

R446.61

A

1003—6350（2015）22—3332—03

2015-03-10)

10.3969/j.issn.1003-6350.2015.22.1207

杨春菊。E-mail：184951791@qq.com