《金匮》“虚劳建中”理论探讨建中理劳汤对慢性肾衰的影响研究❋

沈 会，陶汉华，张 诏，展兆双，马美燕，朱炜楷

(1.大连医科大学附属第一医院，辽宁大连 116011;2.山东中医药大学，济南 250355)

《金匮》“虚劳建中”理论探讨建中理劳汤对慢性肾衰的影响研究❋

沈 会1，2，陶汉华2△，张 诏2，展兆双2，马美燕2，朱炜楷1

(1.大连医科大学附属第一医院，辽宁大连 116011;2.山东中医药大学，济南 250355)

目的:通过检测24 h尿蛋白、尿素氮、肌酐观察建中理劳汤改善模型慢性肾衰大鼠的机制。方法:采用腺嘌呤灌胃法复制慢性肾衰大鼠模型，设空白对照组、模型对照组、建中理劳汤预防干预高低剂量组、建中理劳汤高低剂量组、尿毒清组，观察不同剂量给药对模型大鼠各指标的影响。结果:建中理劳汤能够改善慢性肾衰大鼠临床症状和体征，降低其24 h尿蛋白、血尿素氮、肌酐的含量，与模型组比较差异有统计学意义。结论:建中理劳汤能够改善慢性肾衰大鼠肾功能。

虚劳建中;《金匮要略》;建中理劳汤;慢性肾衰

慢性肾衰(chronic Renal Failure，CRF)主要临床症状与《金匮要略》虚劳病各种症状相类似，所以我们认为，“虚劳”能更好地概括CRF基本特征。慢性肾衰为中医虚劳病，当按虚劳进行辨证论治［1］。在前期研究中，我们在“虚劳建中”理论指导下创立了建中理劳汤，该方能明显改善慢性肾衰患者临床症状，改善贫血，提高生活质量，推迟透析和肾移植时间［2］。本研究以腺嘌呤灌胃法复制慢性肾衰模型为研究对象，评价“虚劳建中”法对慢性肾衰大鼠肾功能的影响及预防作用，以探讨其作用机制，为临床应用提供理论依据。

1 材料

1.1 实验药物

建中理劳汤由党参30 g、黄芪30 g、山药30 g、茯苓30 g、炙甘草10 g、生地黄15 g、菟丝子15 g、泽泻10 g、当归10 g、丹皮10 g组成。5剂量加适量水浸泡1 h，砂锅煎2遍，将2次药液混合后置于旋转蒸发仪内浓缩至950 ml，配得每毫升含生药1 g的建中理劳汤高剂量溶液。用蒸馏水将高剂量稀释1倍即得低剂量建中理劳汤溶液。

尿毒清颗粒，广州康臣药业有限公司(国药准字H31022805，5 g/包);腺嘌呤，美国AMRESCO公司(EINECS号200-796-1，10 g/支)。

1.2 动物

SPF级雄性Wista大鼠70只，体质量200～230 g(山东中医药大学实验动物中心提供，动物许可证编号SCXK(鲁)20110003)。实验动物饲养及观察在山东中医药大学动物实验中心(SPF)。

1.3 试剂

苦味酸、生理盐水、0.5%戊巴比妥钠、伊红染液、考马司亮蓝和BUN、Cre测定试剂盒。

1.4 仪器

普通天平、试管、电子天平、动物手术台、药匙、灌胃器、注射器、匀浆机、离心机和生化分析仪等。

2 方法

2.1 模型复制

腺嘌呤诱导法复制慢性肾衰具有稳定性好、与5/6肾切除法比较技术难度低等优点［3］。将2.5%腺嘌呤溶液按1 mL/100 g体质量对大鼠灌胃，每日1次，连续21 d。空白组每日灌胃等量的生理盐水。

2.2 分组与处理

适应性喂养1周后，根据大鼠体质量，使用SPSS 19.0统计软件将大鼠按随机数字表法分为(剔除死亡动物)空白对照组、模型对照组、建中理劳汤预防干预高剂量组、建中理劳汤预防干预低剂量组、建中理劳汤高剂量组、建中理劳汤低剂量组、尿毒清组7组，每组各10只。除空白对照组每笼饲养5只外，其余各组均每笼饲养1只。实验期间大鼠饲料由山东中医药大学实验中心提供。整个实验过程中大鼠均自由摄食和饮用自来水，室温控制在19～22℃，相对湿度维持在60% ～70%。造模当日，建中理劳汤预防干预高剂量组和低剂量组即开始给药，其中建中理劳汤预防干预高剂量组以2 ml/ 100 g体质量灌胃(每毫升含生药1 g，用20倍人单位公斤体质量剂量中药)，建中理劳汤预防干预低剂量组以2 ml/100 g体质量灌胃(每毫升含生药0.5 g，用10倍人单位公斤体质量剂量中药)，共21 d。造模成功后，建中理劳汤(颗粒稀释剂)高剂量组每日灌胃2 ml/100 g(每毫升含生药1 g)，建中理劳汤低剂量组每日灌胃汤剂2 ml(每毫升含生药0.5 g)，生理盐水2 ml/100 g体质量灌胃;尿毒清组每日中药灌胃汤剂2 ml(每毫升含生药0.5 g)。每日1次，连续给药21 d。

2.3 指标检测

大鼠体质量监测，造模期间每5 d监测体质量1次，用药后每周测量体质量1次，随时观察动物一般状态及死亡情况，观察并记录实验动物皮毛光泽度、竖毛情况、反应灵敏度、自主活动情况、饮食、大小便等情况。在各观测时间点，取各组的大鼠分别置代谢笼，禁食、自由饮水，收集24 h尿液，考马斯亮蓝法测定24 h尿蛋白含量。留完尿液后，第2天用0.5%戊巴比妥钠(麻醉剂量约1.5 ml/只)腹腔注射麻醉大鼠，将麻醉后大鼠固定于手术台，用剪刀剪开腹壁，下腔静脉取一定血样离心后用生化分析仪检测BUN、Cre。

3 结果

3.1 各组药物对慢性肾衰大鼠一般情况影响

空白对照组大鼠体质量增加，体形丰满，眼睛有神、机警，对声音刺激敏感，毛色光亮，反应灵敏，活动灵活，进食饮水及二便均正常，垫料干燥。腺嘌呤灌胃的模型组大鼠5 d后体质量有所下降，随着实验进程日渐消瘦，精神不振，反应迟钝，出现嗜睡、毛质粗糙、有束发现象，饮食量减少，大鼠尿量增加，便稀，垫料严重潮湿。建中理劳汤预防组在14 d左右开始出现饮食减少，体质量亦有下降，精神不振，活动量少，反应迟钝，毛色干枯发黄并出现脱落，尿量增加，便稀，其症状表现均较模型组轻。建中理劳汤治疗组给药后大鼠状态略有恢复，饮食稍增，尿量减少，大便变干且量较前增多，体质量缓慢增加。

3.2 各组药物对慢性肾衰大鼠24 h尿蛋白定量、肾功能的影响

表1显示，空白组和模型组比较，24 h尿蛋白定量前者明显较低(P＜0.01)，各治疗组及干预组与模型组比较24 h尿蛋白定量，治疗组及干预组偏低(P＜0.01)，建中理劳汤预防干预高低剂量组、建中理劳汤高低剂量组、尿毒清组24 h尿蛋白定量比较差异无统计学意义(P＞0.05)。

表1 各组大鼠治疗后24 h尿蛋白定量、肾功能比较(±s)

表1 各组大鼠治疗后24 h尿蛋白定量、肾功能比较(±s)

注:与空白组比较:＊＊P＜0.01;与模型组比较:ΔΔP＜0.01

组别 例数 24 h尿蛋白(g/L) 尿素氮(mmol/L) 肌酐(μmoI/L)空白组50.2020±0.195240 7.01±0.290 48.20±4.170模型组 5 0.8760±0.181330＊＊ 16.73±1.166＊＊ 95.80±6.730＊＊建中理劳汤预防干预高剂量组 6 0.3550±0.120210＊＊ΔΔ 12.48±1.010＊＊ΔΔ 79.00±7.581＊＊ΔΔ建中理劳汤预防干预低剂量组 5 0.3440±0.197560＊＊ΔΔ 12.63±1.641＊＊ΔΔ 72.22±4.701＊＊ΔΔ建 中 理 劳 汤 高 剂 量 组 8 0.4388±0.247350＊＊ΔΔ 11.77±1.271＊＊ΔΔ 83.20±9.951＊＊ΔΔ建 中 理 劳 汤 低 剂 量 组 8 0.4325±0.138440＊＊ΔΔ 10.59±0.651＊＊ΔΔ 70.42±3.931＊＊ΔΔ尿 毒 清 组 8 0.3950±0.313101＊＊ΔΔ 12.33±1.061＊＊ΔΔ 77.37±4.881＊＊ΔΔ

空白组和模型组比较，尿素氮、肌酐前者明显较低(P＜0.01)，各治疗组、干预组与模型组尿素氮、肌酐比较，治疗组及干预组偏低(P＜0.01)，建中理劳汤预防干预高低剂量组、建中理劳汤高低剂量组、尿毒清组尿素氮、肌酐比较差异无统计学意义(P＞ 0.05)。

4 讨论

在CRF进展过程中，往往各种病因交互影响致虚损劳伤、耗气伤精血、阴损及阳、阳损及阴，最终导致阴阳两虚。CRF虽然主要责之于肾的精气阴阳亏虚，但脾为后天之本，与先天之本的肾紧密联系。肾中精气在人体出生之后必须依赖后天之精的充养，才能维持肾脏的正常生理功能。因此，应注重脾肾在CRF发病过程中的相互关系，重视脾胃在CRF治疗中的重要地位。对于阴阳两虚之虚劳，正如尤在泾所说:“欲求阴阳之和者，必求于中气，求中气立者，必以建中也。［4］”因此我们认为，CRF虽然病位在肾，但防治CRF亦应从补肾与建补中气法两法入手。在“虚劳建中”理论指导下，结合前期研究成果提出慢性肾功能衰竭属于中医“虚劳”范畴，对其治疗首先以“建补中气为主，佐以补肾兼以化瘀泄浊”。

建中理劳汤由保元汤、当归补血汤、肾气丸3方化裁而成。党参、黄芪、山药、茯苓均系味甘之品，主入脾经，建中央以运四旁，以资后天气血生化之源;炙甘草补脾，生地黄、菟丝子补肾，先后天同补;山药、茯苓、泽泻健脾养阴、利水泄浊;当归、生地黄、牡丹皮补肾养血活血。诸药相合以建补中气为主，脾肾同治，气血阴阳并补，俾使先天与后天相互资生，气血充足，阴阳平衡，并辅以化瘀泄浊、补泻兼施、寓泻于补。

CRF患者在小便的排量上通常表现为少尿或无尿，而人体的代谢产物大部分都要经尿液排出，一旦尿量减少、代谢产物蓄积，就会加重对肾功能的损害，因此尿量的多少既是CRF的临床特征之一，又是加重肾脏负担的重要因素［5］。本次实验表明，建中理劳汤预防干预组大鼠开始出现饮食减少、质量下降、精神萎靡、反应迟钝、毛色干枯发黄、便稀等症状，均较模型组晚且轻。建中理劳汤治疗组给药后大鼠状态略有恢复，饮食稍增，尿量减少，大便变干且量较前增多，体质量缓慢增加，说明建中理劳汤能够改善慢性肾衰的临床症状和体征，可以预防慢性肾衰并延缓慢性肾衰的发生。

尿素氮和肌酐分别为含氮的有机物和蛋白质代谢的终末产物，当肾小球滤过功能减低时，血尿素氮和肌酐因潴留而增高［6］。本次实验表明，模型组大鼠血清尿素氮、肌酐水平与24 h尿蛋白定量和正常组比较均异常增高，各建中理劳汤预防及治疗组大鼠血清尿素氮、肌酐水平均低于模型组。

总之，本研究从动物实验角度观测建补中气法为主的建中理劳汤对腺嘌呤致大鼠慢性肾衰模型的影响，进一步研究和揭示建补中气法为主的建中理劳汤治疗慢性肾衰的主要功效和作用机理，为基于《金匮》“虚劳建中”理论的建中理劳汤治疗慢性肾衰提供了一定的实验依据，利于建中理劳汤治疗慢性肾衰的临床推广。

［1］沈会，陶汉华，张诏，等.基于金匮虚劳理论探讨慢性肾衰的辨治规律［J］.中华中医药杂志，2014，29(3):103-105.

［2］沈会，陶汉华，马美燕，等.陶汉华治疗慢性肾功能衰竭经验［J］.辽宁中医杂志，2013，40(9):1783-1784.

［3］张志新，何立群.肾小管间质纤维化动物模型的研究进展［J］.时珍国医药，2010，21(4):969-973.

［4］尤在泾.金匮要略心典［M］.上海:上海科技出版社，1958，9:44.

［5］黎磊石，刘志红.中国肾脏病学［M］.北京:人民军医出版社，2008:1284-1287.

［6］王海燕，王梅.慢性肾脏病及透析的临床指南［M］.北京:人民卫生出版社，2005:347-348.

Effects of Jianzhong Lilao Decoction on the Chronic Renal Failure Based on the Replenishing the Middle Theory in Jin Gui Yao Lue

SHEN Hui1，2，TAO Han-hua2△，ZHANG Zhao2，ZHAN Zhao-shuang2，MA Mei-yan2，ZHU Wei-kai1
(1．The First Affiliated Hospital of Dalian Medical University，Liaoning Dalian 116011，China; 2．Shandong University of Traditional Chinese Medicine，Shandong Jinan 250355，China)

Objective:In reference to the existing chronic renal failure model of rat，observe impact on every index of 24 hours urine protein，urea nitrogen，creatinine in rats，mechanism of Jianzhonglilao Decoction to improve the kidney functions of chronic renal failure.Methods:Rats were randomly divided into 7 groups(blank control group，model control group，Jianzhonglilao Decoction for prevention and intervention in high dose group，Jianzhonglilao Decoction for prevention and intervention in low dose group，Jianzhonglilao Decoction in high dose group，Jianzhonglilao Decoction in low dose group，Niaoduqing group).Model was reproduced in rats with chronic renal failure induced by adenine.All groups were intragastric corresponding built in Jianzhonglilao Decoction，physiological saline，Niaoduqing，to observe the different indexes of model rats of different doses of Jianzhonglilao Decoction on renal function.Results:Jianzhonglilao Decoction can improve symptoms and signs of chronic renal failure rats caused by adenine，reduce urine protein of chronic renal failure rats of 24 hours，reduce urea nitrogen and serum creatinine in the blood of rats of chronic renal failur.There were significant differences compared with the model group.Conclusion:Jianzhonglilao Decoction can improve the disorder of metabolism in chronic renal failure rats.

Reinforcing middle-energizer;Synopsis of Golden Chamber;Jianzhonglilao Decoction;Chronic renal failure

R692.5

:B

:1006-3250(2015)09-1097-02

2015-03-25

国家自然科学基金面上项目(81273635)-基于《金匮》“虚劳建中”理论探讨建中理劳汤对慢性肾功能衰竭及TGF-β/smad通路的影响研究

沈 会(1979-)，女，贵州瓮安人，副主任医师，医学博士，从事中医的临床、教学与科学研究。

△通讯作者:陶汉华(1951-)，男，山东莱芜人，教授，博士研究生导师，从事中医内科杂病的辨证论治规律研究，Tel: 13698625509，E-mail:sdthh@163.com。