卵巢肿瘤患者血清胱抑素C表达水平及临床意义

郑淑华，黄瑞玉，穆小萍，卢春敏

(广东省妇幼保健院检验科，广东 广州 511400)

卵巢肿瘤患者血清胱抑素C表达水平及临床意义

郑淑华，黄瑞玉，穆小萍，卢春敏

(广东省妇幼保健院检验科，广东 广州 511400)

目的 检测卵巢肿瘤患者血清胱抑素C的表达水平，分析其发生变化的原因及临床意义。方法收集40例卵巢癌患者、40例卵巢良性肿瘤患者和40例健康体检妇女的血清标本，采用乳胶增强免疫透射比浊法分别对标本进行血清胱抑素C的检测，总体均值比较采用单因素方差分析，组间均值两两比较采用LSD分析。结果卵巢癌患者血清胱抑素C水平均比卵巢良性肿瘤患者和健康体检妇女的血清水平显著升高，差异均有显著统计学意义(P＜0.01)，而卵巢良性肿瘤者与健康体检者比较则差异无统计学意义(P＞0.05)。结论卵巢癌患者血清胱抑素C水平显著升高，提示胱抑素C参与了卵巢癌的发生发展及转归的过程。

卵巢肿瘤；侵袭；胱抑素C

胱抑素C(cystatin C，Cys C)属于半胱氨酸蛋白酶抑制剂超家族的成员，其生理功能可抑制半胱氨酸蛋白酶(如CatB、H、L和X)的活性，从而保护细胞免受不适当的内源性或外源性蛋白酶的水解，并参与细胞内外蛋白水解过程的调控[1-2]。胱抑素C被认为与肿瘤细胞的增殖、分化和迁移有关，卵巢肿瘤组织内蛋白酶抑制剂表达量的变化与肿瘤细胞向外浸润与转移有着非常密切的关系[3]。本文旨在检测胱抑素C在卵巢良恶性肿瘤患者血清中的表达情况，探讨其在卵巢癌发生发展和侵袭过程中的临床意义。

1 资料与方法

1.1 一般资料 收集2012年1月至2013年10月在我院妇科进行手术的卵巢肿瘤患者80例，经手术后病理确诊为卵巢癌和卵巢良性肿瘤各40例，均排除其他生理性和病理性原因影响胱抑素C浓度变化，患者年龄40～56岁，同时收集相同年龄阶段的健康体检妇女血清标本40例。

1.2 方法 上述三组研究对象均在早晨空腹抽血，立即离心分离血清，采用西门子AD1800全自动生化分析仪分别检测血清Cys C、肌酐、空腹血糖、胆固醇和甘油三酯水平。Cys C检测方法为胶乳增强免疫透射比浊法，试剂及校准品购自四川迈克公司，肌酐、空腹血糖、胆固醇和甘油三酯均采用氧化酶法，试剂及校准品均购自北京Human公司。

1.3 统计学方法 应用SPSS19.0统计软件进行数据分析，所有计量数据以均值±标准差(±s)表示，总体均值比较采用单因素方差分析，组间均值两两比较采用LSD方法，以P＜0.05为差异具有统计学意义。

2 结 果

2.1 三组受试者血清各项指标检测结果 研究对象各项指标检测结果均在本实验室提供的参考范围内，可提示指标正常，排除由其他疾病影响患者血清胱抑素C水平的变化，见表1。

表1 三组受试者的血清各项指标检测结果(±s)

表1 三组受试者的血清各项指标检测结果(±s)

组别 空腹血糖(mmol/L)胆固醇(mmol/L)甘油三酯(mmol/L)肌酐(μmol/L)健康体检组卵巢良性肿瘤组卵巢癌组4.37±0.19 4.59±0.23 4.51±0.17 4.18±0.21 4.12±0.13 4.37±0.16 0.93±0.36 1.06±0.27 1.17±0.21 53.08±5.91 49.89±6.07 54.75±5.29

2.2 三组受试者血清胱抑素C水平比较 卵巢癌组患者血清胱抑素C水平为(2.06±0.19)mg/L，而卵巢良性肿瘤组患者和健康体检组妇女血清胱抑素C水平分别为(0.83±0.13)mg/L和(0.78±0.12)mg/L，组间均值两两结果比较显示，卵巢癌组血清胱抑素C水平比后两组明显升高，差异有显著统计学意义(P＜0.01)，而卵巢良性肿瘤组与健康体检组比较则差异无统计学意义(P＞0.05)。

2.3 三组受试者的血清胱抑素C水平分布频率及均值分布 三组受试者胱抑素C水平分布频率见图1，三组受试者的胱抑素C水平均值分布见图2。

图1 三组受试者血清Cys C水平分布频率（mg/L）

图2 三组受试者血清Cys C水平均值分布图(mg/L，±2s)

3 讨论

卵巢恶性肿瘤是女性生殖器官常见的恶性肿瘤之一，严重威胁着妇女生命安全。近年来，随着肿瘤侵袭和转移机制的深入研究，已发现半胱氨酸内源性抑制剂的Cystatin家族成员与肿瘤的侵袭和转移密切相关[3]，胱抑素C(cystatin C，Cys C)抗肿瘤转移作用的研究正日益受到人们关注。Cys C属半胱氨酸蛋白酶抑制剂超家族成员，分子量仅为13 kDa的非糖基化分子，包含120个氨基酸残基，由机体有核细胞恒定产生，与性别、年龄、肌肉量、饮食无关[1-2]。Cys C是一种蛋白酶抑制剂，储存于组织内，能通过与半胱氨酸蛋白酶(如CatB、H、L和X)结合而抑制其活性，从而保护机体细胞免受内源性或外源性蛋白酶的水解，并参与细胞内外蛋白水解的调控过程[3-4]。目前已发现多种肿瘤的患者组织及血清中出现各种蛋白酶及其抑制剂的异常表达，均与肿瘤的发展与转移相关，组织蛋白酶与其抑制剂之间平衡状态的失调已被认为与肿瘤的恶变和转移密切相关[3-4]。

近年来研究发现，Cys C与肿瘤浸润和转移有关，在卵巢囊液中，Cys C检测结果显示恶性肿瘤患者比良性肿瘤患者要明显高得多[5]，血清Cys C被认为是与恶性肿瘤细胞增殖分化和浸润转移密切相关的一项指标。在卵巢癌肿瘤组织中，细胞外胱氨酸蛋白酶含量明显增高，而细胞内抑制剂则无变化或仅有轻度升高，出现卵巢恶性肿瘤组织中胱氨酸蛋白酶与其抑制剂分泌不平衡的现象，随之机体产生应激反应，使Cys C水平相应升高，以抑制肿瘤组织中升高的胱氨酸蛋白酶的水解活性，从而抑制卵巢肿瘤细胞的生长、侵袭和远处转移[6-7]。

为了解Cys C在卵巢肿瘤患者血清中的表达情况，以及分析其与卵巢肿瘤良恶性的关系，本资料收集相同例数的卵巢癌和卵巢良性肿瘤患者，通过检测其血清Cys C水平，并与正常健康体检妇女比较，发现卵巢癌患者血清中Cys C的浓度明显高于卵巢良性肿瘤患者和健康体检妇女，差异有显著统计学意义(P＜0.01)，并且与其他学者研究结果一致[8]。表明卵巢癌细胞超表达Cys C蛋白质编码基因，在卵巢癌发展过程中胱氨酸蛋白酶与其抑制剂分泌出现失衡现象，从而促进卵巢癌细胞的生长侵袭和远处转移[9]。卵巢癌肿瘤组织中Cys C的高表达，可能是由于机体反馈调节机制的作用，在卵巢癌的发生发展过程中，卵巢肿瘤组织细胞及其微环境大量表达各类半胱氨酸组织蛋白酶，导致细胞内溶酶体中各类半胱氨酸组织蛋白酶类分泌释放出来，并与肿瘤细胞表面结合，发挥生物学功能，溶解组织蛋白，引起肿瘤细胞生长、迁徙、侵袭、血管发生和转移[9]，而肿瘤组织中半胱氨酸蛋白酶上调表达会反馈性引起Cys C表达的增多，于是Cys C发挥其抑制功能抑制了半胱氨酸蛋白酶的活性，使其无法对正常细胞和细胞外基质进行降解和破坏作用，从而降低了卵巢癌细胞向外扩散和侵袭的能力[10]。

由此可见，细胞外半胱氨酸组织蛋白酶类与半胱氨酸蛋白酶抑制剂C水平的平衡对卵巢肿瘤患者来说非常重要，Cys C能抑制细胞内外半胱氨酸蛋白酶的水解活性，在卵巢癌肿瘤细胞的生长、血管生成、浸润和转移中起重要作用，。血清Cys C虽非卵巢肿瘤特异性标志物，但作为肿瘤生化辅助诊断指标仍有一定的应用价值，若结合其他相关卵巢肿瘤标志物检测，可提高阳性检出率，有望成为临床卵巢癌诊断和预后检测的指标。

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Variance of serum cystatin C levels in patients with ovarian cancer and its significance.

ZHENG Shu-hua, HUANG Rui-yu,MU Xiao-ping,LU Chun-min.Department of Clinial Laboratory,Guangdong Women and Children Hospital,Guangzhou 511400,Guangdong,CHINA

ObjectiveTo determine the levels of cystatin C in patients with ovarian cancer,and to analyze the reason of variance and its significance.MethodsForty ovarian cancer patients,40 ovarian benign tumor patients,and 40 healthy individuals were included in the study.Serum cystatin C was detected by the method of Emulsion Enhanced Turbidimetric Immuno-Assay.All data were statistically analyzed using the One-Way ANOVA and LSD method.ResultsThe levels of cystatin C in ovarian cancer group were significantly higher than those in both ovarian benign tumor group and healthy group(P＜0.01).And there was no statistically significant difference between data of the ovarian benign tumor group and healthy group(P＞0.05).ConclusionThe significant increase of cystatin C level in patients with ovarian cancer indicates that cystatin C is actually involved in the development of ovarian cancer.

Ovarian cancer;Invasion;Cystatin C

R737.31

A

1003—6350（2015）17—2551—03

10.3969/j.issn.1003-6350.2015.17.0924

2014-12-21)

郑淑华。E-mail：489611421@qq.com