温阳强心方对慢性充血性心力衰竭家兔细胞因子的影响

郭欣桐

(河北大学临床医学院 河北 保定 071000 )

慢性充血性心力衰竭(CHF)是指存在适量静脉血回流的情况下，受心脏收缩或舒张功能障碍等因素的影响，导致心排血量不足无法满足机体代谢需要的一种临床综合征，该病是大多数器质性心脏病患者的最终结局［1］。有研究表明［2］，中药可显著改善CHF 患者的心功能，缓解其临床症状，采用温阳强心方对CHF 患者进行治疗可获得理想疗效。本研究以40 只普通级新西兰兔作为实验对象，探讨了温阳强心方对慢性充血性心力衰竭(CHF)家兔L－10、TNF－α 和ET－1 等细胞因子的影响，旨在为临床治疗提供实验依据，现报道如下。

1.材料与方法

1.1 材料、药物、试剂与仪器

材料:40 只普通级新西兰兔(南京医科大学实验动物中心提供)，体质量为1.8～2.1kg，雌雄比为1:1。

药物:温阳强心方:组方为附片、红参、干姜、甘草等中药，配药煎煮为含原药材0.23g/mL、0.35g/mL 两种浓度的药液，置入冰箱4℃下保存备用。盐酸阿霉素;生理盐水。

试剂与仪器:IL－10 和ET－1 试剂盒购自北方生物技术研究所，TNF－α 试剂盒购自武汉博士德生物工程有限公司，彩超仪(GE 公司生产，型号LOGIQ－3)由南京中医药大学附属医院体检中心提供。

1.2 造模、随机分组和给药

选取40 只新西兰兔，随机抽取10 只作为对照组，另30 只建立CHF模型，造模之后对家兔行心脏彩超检查，按照心功能分层随机分为CHF模型组、轻剂量和重剂量温阳强心方组，每组10 只。其中轻剂组每次给予煎煮方按每kg10ml 灌胃，其中含原药材2.3g，重剂组按kg10ml 灌胃，含原药材3.5g，每日灌胃1 次，共持续4 周。对照组经兔耳按1mL/kg 静注生理盐水，每周静注两次，持续8 周。对照组与模型组于实验第9 周使用等量蒸馏水灌胃，每日一次，共持续4 周。

1.3 细胞因子检测

于治疗后在兔耳动脉中采血3 管，共9ml，检测IL－10、TNF－α 和ET－1，其中IL－10 与ET－1 采用ELTSA 监测，TNF－α 采用放免方法检测，按试剂盒说明进行操作。

1.4 病理切片

经治疗后在兔耳缘处静注空气10mL，动物死后取出心脏病并使用之前预冷的生理盐水进行清洗，使用4%聚甲醛固定各组织标本、照相，间断连续切片，并行HE 染色。观察MIAS 图像显微摄像系统摄片和家兔心肌细胞形态学变化。

2.结果

2.1 各组一般情况

对照组造模时有1 只因腹泻死亡，2 只因麻醉未醒而死亡，模型组因腹泻、麻醉意外和注射阿霉素时各死亡1 只，轻剂温阳强心方组因腹泻死亡2 只，重剂温阳强心方组因麻醉意外死亡1 只，其中重剂温阳强心方组的疗效最佳，模型组无明显改善。

2.2 各组IL－10、TNF－α 和ET－1 的变化情况

CHF 模型组、轻剂量和重剂量温阳强心方组的IL－10、TNF－α 和ET－1 水平均明显高于对照组，重剂量组的TNF－α 水平低于轻剂量组，IL－10 高于轻剂组，见表1。

表1 各组IL－10、TNF－α 和ET－1 的变化情况比较(±s)

表1 各组IL－10、TNF－α 和ET－1 的变化情况比较(±s)

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2.3 病理结果

对照组心肌组织HE 染色显示其心肌细胞的形态和大小正常，边缘清晰，细胞核与横纹清晰，细胞膜完整;模型组的心肌细胞有明显水肿，颗粒及部分心肌细胞脂肪变性，心肌纤维明显断裂，横纹较模糊，其他各组的心肌损害较轻，炎症细胞浸润减少，心肌细胞间隙大部正常。

3.讨论

中医认为，CHF 属于"心悸"、"水肿"、"喘证"等范畴，其病机为阴阳失调、心气亏虚、痰浊互结并阻于心体［3］。温阳强心方组方为附片、红参、干姜、甘草等中药，附片可补火助阳、回阳救逆，干姜则温中散寒、温化痰饮、回阳通脉，红参可大补元气，益肺补脾，甘草为佐药和使药，诸药合用可益气温阳、利水消肿［4］。

临床研究发现，CHF 的病理生理过程有多种机制参与，其中细胞因子是其中的重要因子。心功能正常时细胞因子网络可发挥正常调控作用，各类型细胞因子处于平衡状态;心功能异常时(CHF 时)细胞因子网络的调节功能严重失控，抗炎性细胞因子明显降低，而促炎性细胞因子大幅增加。IL－10 是机体免疫平衡中抑制炎症因素的最重要部分，可有效抑制并拮抗促炎因子，具有心肌保护作用;TNF－α 可参与心力衰竭的发生及发展，是判断心功能级别的重要指标;ET－1 可强烈收缩血管，具有促细胞生长特性，是诱发多种疾病的炎症因子。本次研究发现，经治疗后CHF模型兔血浆中的TNF－α 和ET－1 水平明显降低，IL－10 水平明显升高，提示温阳强心方可有效调节细胞因子，改善CHF 模型兔心功能，其中重剂温阳强心方的疗效更为突出。

［1］ 陈新宇，唐燕萍，卢青，等.温阳强心方对兔慢性充血性心力衰竭细胞凋亡及心脏结构的影响［J］.湖南中医药大学学报，2012，32(1):16－19.

［2］ 唐燕萍，卢青，谢海波，等.温阳强心方对慢性充血性心力衰竭家兔细胞因子的影响［J］.中国中医药信息杂志，2012，19(2):35－40.

［3］ 陈新宇，张帆，卢青，等.重剂温阳强心方对慢性充血性心力衰竭兔神经内分泌的影响［J］.湖南中医杂志，2011，27(5):118－119.

［4］ 陈佳江，熊敏，周静波，等.附子配伍干姜对附子总生物碱含量的影响［J］.成都中医药大学学报，2010，33 (2):1－3.