IgA肾病与尿白蛋白多聚体的关系

钱白音，王玉新，林宇静，张桦，李中和，郑晶

(1中山大学附属第五医院，广东珠海519000;2厦门市第二医院)

IgA肾病是全球范围内最常见的肾小球疾病，也是导致终末期肾衰竭的一个主要原因［1］。因此，寻求有效的方法阻止或延缓IgA肾病的进展意义重大。IgA肾病患者尿蛋白水平与肾功能损害进展程度呈正相关［2］，尿蛋白既是反映肾功能损害的指标，也是加速肾功能恶化的重要因素［3，4］。白蛋白往往是蛋白尿的重要组成部分，是肾脏损伤的重要指标［5］。有学者发现，尿白蛋白可聚合成白蛋白多聚体(PAs)，其阳性率与某些肾脏疾病的血清肌酐(Scr)水平、疾病活动指数升高及对类固醇的治疗反应密切相关，但其与IgA肾病的关系目前尚鲜有报道。2008年1月～2011年12月，我们选用免疫印迹法检测34例同步行肾活检诊断明确IgA肾病患者尿液中尿PAs的存在情况，以了解PAs在IgA肾病发病机制中的作用。

1 资料与方法

1.1 临床资料 选择同期中山大学附属第五医院及合作医院收治的IgA肾病患者34例，男13例、女21例，年龄13～42岁、平均29.6岁。均经肾活检明确诊断，除外紫癜性肾炎、狼疮性肾炎、乙肝病毒相关性肾炎等继发性肾病或合并其他肾脏疾病及高血压、糖尿病等患者。

1.2 方法

1.2.1 主要试剂及器材 垂直式平板电泳槽(购自北京崇文东方仪器厂)、半干转仪(购自北京六一仪器厂)、硝酸纤维膜(购自Sigma公司)、兔抗人白蛋白多克隆抗体(购自Santa Cruz公司)、羊抗兔IgG(购自博士德公司)。FM-8P全自动冰点渗透压计(测量尿渗透压)购自上海医大仪器厂，尿总蛋白检测试剂盒(邻苯三酚红法)购自广州标佳科技有限公司，肌酐试剂盒(肌氨酸氧化酶法)购自上海科华生物股份有限公司。试剂均为分析纯。

1.2.2 尿渗透压、尿总蛋白、Scr检测及肾组织病理观察 采用FM-8P全自动冰点渗透压计测量尿渗透压，邻苯三酚红法测量尿总蛋白，肌氨酸氧化酶法测量Scr。肾小管间质病理参数半定量积分采用Katafuchi等的标准，共为0～9分，包括间质炎性细胞浸润(0～3分)、间质纤维化(0～3分)和肾小管萎缩(0～3分)。

1.2.3 PAs免疫印迹检测 留取肾活检术前3 d内24 h尿，磺基水杨酸法定性，据定性结果决定加样量。在10℅聚丙烯酰胺凝胶上电泳，然后转移至硝酸纤维膜，50 g/L脱脂奶粉溶液封闭1 h，加入一抗(兔抗人白蛋白多克隆抗体)，比例为1∶1 000。室温孵育3 h，再加入羊抗兔辣根过氧化物酶标记的第二抗体(羊抗兔IgG)，比例为1∶500。室温孵育1 h，4-氯-1-萘酚显色，至少在100 kd处出现一条条带者为PAs阳性。

1.2.4 统计学方法 采用SPSS17.0统计软件，检测结果以±s表示，两组间比较用t检验。P≤0.05为差异有统计学意义。

2 结果

2.1 尿PAs与IgA肾病肾小管间质损害 IgA肾病患者尿PAs阳性18例，尿PAs阴性16例。IgA肾病尿PAs阳性与尿PAs阴性肾小管间质损害评分分别为(4.28 ±2.89)、(2.13 ±2.60)分;IgA 肾病PAs阳性患者，肾小管间质损害评分明显升高(P＜0.05)。

2.2 尿PAs与IgA肾病尿渗透压水平 IgA肾病尿PAs阳性患者与尿PAs阴性患者尿渗透压分别为(457.83 ±95.50)、(553.50 ±123.24)mOsm/kg;IgA肾病尿PAs阳性患者尿渗透压明显降低(P＜0.05)。

2.3 尿PAs与IgA肾病24 h尿蛋白定量 IgA肾病尿PAs阳性患者与尿PAs阴性患者24 h尿蛋白定量分别为(3.45 ±2.00)、(2.16 ±1.40)g;IgA 肾病尿PAs阳性患者，24 h尿蛋白定量明显增加(P＜0.05)。

2.4 尿PAs与IgA肾病Scr水平 IgA肾病尿PAs阳性患者与尿 PAs阴性患者 Scr水平分别为(114.78 ±65.29)、(75.04 ±37.16)μmol/L;IgA 肾病尿PAs阳性患者，Scr水平明显升高(P＜0.05)。

3 讨论

IgA肾病是慢性肾衰竭的最常见病因之一，是一种进展性疾病，多达40%的患者最终发展为终末期肾病［6］。其发展和预后不仅与肾小球本身的损害有关，更与肾小管间质病变的严重程度关系密切［7，8］。IgA 肾病发病机制至今尚未完全明确［9］，仍是目前困扰肾脏病学者的一个重要难题。

研究表明，蛋白尿是肾小球肾炎最重要的预后指标，肾小管细胞对蛋白尿的反应是肾脏进展性纤维化的一个重要决定因素［10］。除了尿蛋白的量与持续时间，尿蛋白成分也与IgA肾病的预后密切相关［11］。现已发现，不少尿蛋白成分对肾脏均有毒性作用，可能参与了肾小管及间质的损伤［12，13］。白蛋白往往是蛋白尿的重要组成部分，可能直接增加肾小球肾炎患者小管间质损害。国外学者证实，肾病患者血浆中的白蛋白荧光谱特性与正常人不同，即肾病患者血浆中的白蛋白较正常人发生了改变［14］。而且，白蛋白在尿液中也可能会改变［15］，与在血浆中的改变不同。因此，研究肾脏疾病患者尿液中白蛋白与疾病的关系应该更符合真实的病理生理状况。有研究者已发现，尿白蛋白可聚合成PAs，其在尿液中的阳性率与某些肾脏疾病的严重程度、预后及疗效相关。我们发现，肾小管间质损害评分、24 h尿蛋白定量及Scr水平，IgA肾病尿PAs阳性患者均较尿PAs阴性患者升高;而尿渗透压IgA肾病尿PAs阳性患者较尿PAs阴性患者降低。有学者指出，肾小管间质损害在IgA肾病进展中起重要作用，可加速肾功能恶化，对于IgA肾病预后具有重要影响［16，17］。尿渗透压可反映 IgA肾病患者小管间质损害程度［18］。有研究表明，持续蛋白尿是IgA肾病病情进展的独立预测指标［19］，是公认的IgA肾病预后不良的临床指标。有学者指出［20］，尿蛋白在肾间质炎症细胞浸润、肾小管上皮细胞活化或损伤及细胞外基质的降解过程中发挥重要作用，促进肾小管间质纤维化过程，可以作为判断肾功能恶化速度及预后的指标。因为肾活检是一种侵袭性检测手段，并只能反映很少一部分肾组织的状况。因此，尿PAs作为一种无创性检测手段，对判断IgA肾病患者肾小管间质损害的程度、肾功能恶化速度及预后具有重要意义。

总之，本研究发现尿PAs可能与IgA肾病的某些病理生理过程有关。作为一种无创性检测手段，尿PAs较肾活检技术取材简便、安全，有助于评估IgA肾病的肾小管间质损害程度，可以作为判断肾功能恶化速度及预后的指标。

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