2种辅料对苹果蠹蛾性信息素含量测定的影响

陈传秀，金 青

(青岛科技大学化工学院，山东青岛 266042)



2种辅料对苹果蠹蛾性信息素含量测定的影响

陈传秀，金 青*

(青岛科技大学化工学院，山东青岛 266042)

[目的]研究淀粉、β-环糊精(β-CD)2种辅料对苹果蠹蛾性信息素含量测定的影响。[方法]采用气相色谱法，检测淀粉、β-CD以及分别采用淀粉、β-CD制成的粉剂和颗粒剂中苹果蠹蛾性信息素的含量。[结果]混合物中苹果蠹蛾性信息素的提取回收率为99.64%～100.02%；粉剂和颗粒剂中苹果蠹蛾性信息素的平均回收率为99.95%～100.00%。[结论] β-CD和淀粉均不影响苹果蠹蛾性信息素的含量测定，相容性较好，可进一步进行剂型研究。

淀粉；β-CD；苹果蠹蛾性信息素；含量测定；气相色谱法

Starch；β-CD；Cydiapomonella(L.) sex pheromone；Content determination；Gas chromatography

苹果蠹蛾[Cydiapomonella(L. )]是仁果类主要的害虫之一，自19世纪50年代侵入新疆地区以来，给我国造成了严重的经济损失[1]。苹果蠹蛾对环境的适应能力强，以幼虫蛀果危害，防治难度高[2]；同时化学农药长期大量的使用也造成了苹果蠹蛾抗药性的增加，给防治工作带来了困难[3]。

昆虫性信息素[4]被国外称为“第3代农药”，具有高效、无毒、无污染、不伤害益虫等优点，利用性信息素诱捕害虫成为一种切实可行并且应用广泛的害虫管理技术。1971年，Roelofs等[5]首次鉴定出苹果蠹蛾性信息素的主要成分为E8，E10-十二碳二烯醇，现在主要利用诱芯来监测和诱杀害虫。由于目前苹果蠹蛾性信息素的使用方式较为单一，笔者研究了淀粉和β-CD 2种常用缓释材料对苹果蠹蛾性信息素含量测定的影响，以期为利用该2种辅料制备缓释制剂的研究奠定基础。

1 材料与方法

1.1 材料

1.1.1 主要仪器。电子分析天平(上海精密科学仪器有限公司，FA1004N型)、气相色谱仪(Agilent 6890N GC)、标准检验筛(24、100目，浙江省上虞市沪江仪器纱筛厂)、西林瓶(10 ml，安徽华欣药用玻璃有限公司)、有机滤膜(0.25 μm，上海市新亚净化器件厂)、温湿度计(上海晨光文具股份有限公司)。

1.1.2 试剂。淀粉(药用，天津市广成化学试剂有限公司)、β-环糊精(药用，天津博迪化工股份有限公司)、苹果蠹蛾性信息素(原料药，纯度97%，E8，E10-十二碳二烯醇，上海遐瑞医药科技有限公司)、正己烷(色谱纯，天津市津东天正化学试剂厂)、无水乙醇(分析纯，山东莱阳经济技术开发区精细化工厂)。

1.2 方法

1.2.1 苹果蠹蛾性信息素分析方法的建立。

1.2.1.1 色谱条件与系统适应性试验。色谱条件：毛细色谱柱(30.0 m×250.00 μm×0.25 μm)，普通氮气为载气，以氢气为燃气，空气为助燃气，流速为1 ml/min，初温120 ℃，保留1 min，升温速率为20 ℃/min，终温300 ℃，保留 6 min，检测器300 ℃，气化室250 ℃，进样量1 μl。

1.2.1.2 标准曲线的绘制。称取E8，E10-十二碳二烯醇，用正己烷稀释成浓度为80.5、161.0、241.5、323.0、402.5、563.5 μg/ml的标准溶液，置于10 ml容量瓶中，用Agilent 6890N气相色谱仪测定不同浓度对应的峰面积。

1.2.2 辅料对苹果蠹蛾性信息素含量测定影响的研究。配制低、中、高(243.0、304.0、365.0 μg/ml)3个浓度的性信息素溶液，各取10 ml，分别与1.0 g辅料充分混匀，密闭。5 min后过滤，进样1 μl测其峰面积，计算回收率，考察2种辅料对不同浓度苹果蠹蛾性信息素含量测定的影响程度。

1.2.3 方法学考察。

1.2.3.1 精密度试验。量取浓度为304.0 μg/ml的E8，E10-十二碳二烯醇对照品溶液1 μl进样，测其峰面积值，重复6次，计算相对标准偏差(RSD)。

1.2.3.2 稳定性试验。于0、1、4、8、12、24 h量取304.0 μg/ml E8，E10-十二碳二烯醇对照品溶液1 μl进样，对其峰面积进行积分，计算RSD。

1.2.4 样品的测定。

1.2.4.1 粉剂中信息素含量的测定。称取适量苹果蠹蛾性信息素溶解在1 ml正己烷中，与辅料混合均匀，按每份1 g(约含信息素10 mg)分装在西林瓶中密封。制备3批。每次取3份样品，分别倒入25 ml容量瓶中，用正己烷定容，超声10 min后，0.25 μm滤膜过滤，进样1 μl测其峰面积。

1.2.4.2 颗粒剂中信息素含量的测定。辅料过100目筛，称取处方量苹果蠹蛾性信息素溶解在适量无水乙醇中，缓慢加入处方量的淀粉中，边加边搅拌，搅拌均匀后加适量无水乙醇制软材，过14目筛制湿颗粒。按每份1 g(约含信息素10 mg)分装在西林瓶中密封。制备3批。每次取3份样品，分别倒入25 ml容量瓶中，用正己烷定容，超声10 min后，0.25 μm滤膜过滤，进样1 μl测其峰面积。

2 结果与分析

2.1 苹果蠹蛾性信息素含量测定的标准线性关系

以E8，E10-十二碳二烯醇的浓度(C)对峰面积平均值(A)回归，得标准曲线方程：A=0.794C-14.194，R2=0.999 7，即苹果蠹蛾性信息素在浓度为80.5～563.5 μg/ml范围内线性关系良好。

2.2 辅料对苹果蠹蛾性信息素含量测定的影响

由表1可知，2种缓释材料中苹果蠹蛾性信息素的回收率在99.64%～100.02%，因此，淀粉和β-CD对苹果蠹蛾性信息素含量的测定几乎无影响。

表1 回收率试验结果 %

2.3 方法学考察

2.3.1 精密度。试验结果测得的含量分别为理论值的100.13%、99.66%、98.79%、99.99%、99.97%、100.04%，RSD为0.50%，表明该方法精密度良好。

2.3.2 稳定性。测得含量分别为理论值的98.92%、99.91%、101.00%、99.67%、99.88%、99.14%，RSD为0.74%，表明E8，E10-十二碳二烯醇供试液在24 h内无显著变化，稳定性良好。

2.4 样品的测定

2.4.1 粉剂中苹果蠹蛾性信息素含量。3批淀粉粉剂中苹果蠹蛾性信息素的回收率分别为100.10%、99.93%、99.83%，平均回收率为99.95%，RSD为0.140%；3批β-CD粉剂中苹果蠹蛾性信息素的回收率分别为99.97%、99.92%、100.06%，平均回收率为99.98%，RSD为0.071%。

2.4.2 颗粒剂中苹果蠹蛾性信息素含量。3批淀粉颗粒剂中苹果蠹蛾性信息素的回收率分别为100.06%、100.03%、99.92%，平均回收率为100.00%，RSD为0.074%；3批β-CD颗粒剂中苹果蠹蛾性信息素的回收率分别为99.89%、99.99%、100.01%，平均回收率为99.96%，RSD为0.064%。

3 结论与讨论

该研究采用气相色谱法分析测定淀粉、β-CD 2种辅料制成的粉剂、颗粒剂中苹果蠹蛾性信息素含量。结果表明，

β-CD和淀粉均不影响苹果蠹蛾性信息素的含量测定，相容性较好，可进一步研究开发其剂型。

气相色谱法是药物含量测定和质量检查、中药挥发油分析、体内药物分析、溶剂残留分析中不可或缺的手段。徐妍等[6]以十二醇为内标物，采用气相色谱程序升温法，对不同粒径的梨小食心虫性信息素微囊粒剂的释放特性进行了定期测定；柳丹侠等[7]利用微量气相色谱建立了一种简单的提取分离及制备性信息素的方法，该方法适用于毫微克水平的微量分析。张力等[8]借助于气相色谱法，用残留测定法、静态测定法和蒸汽捕集法3种方法测得了棉红铃虫性信息素夹层塑囊剂中性信息素的释放率。

淀粉[9]是天然的高分子多糖，性质稳定，价廉易得。β-CD[10]为环状低聚糖化合物，可与具有适当大小和形状及疏水性的分子通过非共价键的相互作用形成稳定的包合物。二者作为缓释材料可生物降解，避免了二次污染，有利于推广绿色农业。

性信息素缓释剂型的研究在国内外得到了广泛关注，并取得了一定的进展[11-12]，但工业化生产是国内苹果蠹蛾性信息素缓释剂型未得到广泛应用的重要限制因素之一。根据该试验结果，可进行下一步的缓释制剂研究，为田间应用奠定基础。

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[2] 段辛乐，乔宪凤，陈茂华.苹果蠹蛾抗药性进展[J].生物安全学报，2015，24(1)：1-8.

[3] 王薛婷，朴美花.我国检疫性害虫——苹果蠹蛾研究进展[J].农林科研，2012(27)：42-43.

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[6] 徐妍，吴国林，胡奕俊，等. 气相色谱法测定梨小食心虫性信息素微囊粒剂的释放特性[J].农药，2010，49(2)：111-113.

[7] 柳丹侠，文镜.用于昆虫外激素研究的微量气相色谱分析制备方法[J].北京联合大学学报，2001，15(3)：49-53.

[8] 张力，陈元光，戴小杰.昆虫性信息素释放率的测定方法[J].昆虫知识，1990(3)：169-171.

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陈传秀(1990- )，女，山东枣庄人，硕士研究生，研究方向：药物新剂型及新技术。*通讯作者，副教授，硕士生导师，从事药物新剂型及新技术研究。

2015-11-13

S 482.3+8；TQ 453.8

A

0517-6611(2015)35-203-02

Effects of Two Kinds of Excipients on Determination ofCydiapomonella(L.) Sex PheromoneCHEN Chuan-xiu, JIN Qing*(College of Chemical Engineering, Qingdao University of Science and Technology, Qingdao, Shandong 266042)Abstract [Objective] The aim was to investigate effects of two kinds of excipients on the determination ofCydiapomonella(L.) sex pheromone. [Method] We used gas chromatography to analyze the content ofCydiapomonella(L.) sex pheromone in mixture, powders and granules. [Result] The contents ofCydiapomonella(L.) sex pheromone in mixture ranged from 99.64% to 100.02%, and ranged from 99.95% to 100.00% in powders and granules. [Conclusion] Starch and β-CD have no effect on the determination ofCydiapomonella(L.) sex pheromone, and have good compatibility withCydiapomonella(L.) sex pheromone, so their formulation can be carried out.