乳腺癌脉管浸润检测中双重免疫组化染色的应用分析

高鹏

乳腺为纤维组织、皮肤、脂肪以及乳腺腺体组成的，乳腺癌则是出现在乳腺上皮组织上的恶性肿瘤。乳腺虽不是人体重要的生命活动器官，且原位的乳腺癌并不会危及患者生命[1-2]。但是乳腺癌的细胞因失去正常细胞特性，使细胞之间较为松散，出现脱落的症状，当癌细胞脱落后，其通过淋巴液或者血液散播到患者全身，出现转移，则会导致死亡[3-4]。癌细胞入侵到血管或者淋巴管时，才能转移到远端部位或者局部的淋巴结，所以乳腺癌患者通过对肿瘤脉管进行浸润检测，才可指定准确良好的治疗方案[5]。本研究选取61例乳腺癌患者进行分析，现报道如下。

1 资料与方法

1.1 一般资料 选取2012年8月～2014年1月南省南阳市中心医院收治的61例乳腺癌患者进行研究，采取乳腺浸润性导管癌的手术切除标本，所有患者均为女性，年龄33～74岁，平均（47.31±3.18）岁，患者在手术前没有进行放疗、化疗或者抗肿瘤的其他治疗，对患者给予重新切片以及HE染色，病理医生给予确诊。

1.2 方法

1.2.1 检测方法 所有患者在免疫组织化学的试剂中选择CD 34和CKpan，以及Dako公司的双重免疫组织化学的试剂盒。将患者的标本采用4%的中性缓冲的甲醛给予固定，并采用常规石蜡的包埋，给予4μm的连续切片，并给予双重免疫组织化学的染色和常规HE染色，在免疫组织化学使用SP法，使用碱性磷酸酶和DAB（二氨基联苯胺）进行双重染色，并给予封固，每个步骤都按照相关文献进行操作。并对检测结果进行详细记录。

1.2.2 结果判定 CD 34若为棕黄色则阳性结果，则定位在内皮细胞；CK若为红色则评为阳性，可定位在瘤细胞胞质。HE和免疫组织化学切片要求2名病理医生进行独立检验，若HE切片中有明确的被覆内皮细胞腔隙，且有肿瘤细胞时，则为LVSI（+），在免疫组织化学的染色切片中，若在CD 34变为棕黄色染成红色的肿瘤细胞的患者内皮细胞腔隙为LVSI（+）[3]。

1.3 统计学方法 采用SPSS 14.0统计学软件处理数据。计量资料比较采用t检验，计数资料比较采用χ2检验，P＜0.05为差异有统计学意义。

2 结果

61例乳腺癌患者中，在HE染色判断中，有16例判断为LVSI（+）。而在双重免疫组织化学染色证实的有：10例患者为LVSI（+），6例患者为LVSI（-），而在HE染色判断中，有45例患者没有确定为LVSI（+）的，在双重免疫组织化学染色的检测后，13例患者为LVSI（+）。两种检测方法的诊断结果差异有统计学意义（P＜0.05）。

3 讨论

乳腺癌患者在早期没有明显的体征和症状，很多人是通过体检而发现的，其主要症状有乳腺肿块、乳头溢乳、皮肤改变，乳腺癌会导致皮肤失去弹性，以及橘皮样的改变，而且乳头、乳晕出现异常，若肿瘤在乳头深部，会使乳头出现回缩，但若肿瘤与乳头的距离较远，则会导致乳头抬高或者回缩[6-7]，对患者正常的工作和生活造成严重的不良影响，一旦肿瘤出现转移，还会造成生命危险。肿瘤转移这个过程较为复杂，且脉管浸润为中药缓解，当肿瘤细胞到达脉管腔，则就会通过淋巴和血液进入到远处的器官和淋巴结中，造成转移瘤的形成，所以在对实体瘤的诊断中，LVSI为重要指标，根据其来判断患者的病情、复发以及生存时间。肿瘤脉管浸润这种方法为：采用光镜对HE切片进行观察，在被覆的内皮细胞腔隙中对瘤细胞进行明确观察，但在有些状态下不能给予较好判断[8]。比如，若制片中，肿瘤细胞团因为收缩导致的裂隙和血管真正的间隙难以辨别；如果血管腔隙的瘤细胞陶绍，则HE染色不能将其在背景血液细胞中进行区分；而且若瘤细胞团填满血管的腔隙，则不能和间质侵润的瘤细胞团进行区分。为了较好避免上述的问题，则在检测中使用免疫组织化学双重标记的方法，对瘤细胞上皮性的标志物与血管内皮的细胞标志物在同1张切片上展示，并和常规的HE染色给予比较，从而得出乳腺癌脉管浸润检测中双重免疫组织化学染色的应用效果。

双重免疫组织化学染色的原理为，利用抗体和抗原之间特异性的结合以及特殊标记的技术，并对细胞和组织内给予抗体或者特定抗原的定性、定位和定量检测[9]。在HE检测中，虽然可区分肿瘤细胞团因收缩造成的裂隙和血管腔的间隙，可是若血管腔隙中瘤细胞较少，则会诊断为血细胞，而导致漏诊现象的出现。而双重免疫组织化学染色这种检测方法，在同一张切片上对瘤细胞给予血管内皮细胞物和上皮性的标记，可明显直观地看到肿瘤组织与血管之间的关系，促进检出率和诊断准确率的提高。

综上所述，乳腺浸润性导管癌患者在检测中双重免疫组织化学染色的检出率，明显比HE观察的检出率高，只有在早期判断出癌细胞是否转移或者复发， 才可进行积极有效的预后治疗，达到较好的预后效果，延长患者的生存时间和生活质量。

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