探讨乙肝两对半模式与乙肝病毒DNA定量的相关性

王启龙

摘要：目的 探讨乙肝两对半模式与乙肝病毒DNA定量的相关性，为临床治疗乙型肝炎提供参考。方法 采用荧光定量法对我院2012年2月～2014年2月收治的240例疑似乙肝患者乙肝病毒HBV-DNA含量进行测定，同时采用ELISA法进行两对半指标的检测，对比分析检测结果。结果 125例HBV-DNA呈阳性，占52.08%；115例HBV-DNA呈阴性，占47.92%。定量为5.0×102IU/ml～5.0×108IU/ml。125例HBV-DNA阳性标本中，小二阳14例阳性，小三阳35例阳性，大三阳76例阳性。结论 HBeAg与HBV-DNA拷贝数呈正相关性，为临床制定合理的乙肝治疗方案提供了依据，有利于抑制乙肝病毒的传染。

关键词：乙肝；两对半模式；DNA定量；相关性

乙型肝炎是目前我国主要传染病之一，可引起慢性、急性迁移性肝炎或肝癌。我国是乙肝高发区，相关调查结果显示，我国乙肝病毒感染人群高达10%左右[1]。乙肝两对半检测是临床诊断乙型肝炎最常用的指标，可对人体乙肝病毒的免疫反应状态进行反映。HBV-DNA是衡量乙肝传染性最精确的手段，是确定乙肝病毒感染不同复制状态的重要方法，HBV-DNA阳性显示病毒具有传染性[2]。为探究乙肝两对半模式与乙肝病毒DNA定量的相关性，为制定合理治疗方案提供科学依据，我院对2012年2月～2014年2月收治的240例疑似乙肝患者乙肝病毒HBV-DNA含量及两对半指标进行检测，现将结果报道如下。

1 资料与方法

1.1一般资料 选取我院2012年2月～2014年2月收治的240例疑似乙肝患者的临床资料，排除标准：合并有严重心脑血管疾病患者；有精神病遗传史或家族史患者；无法进行良性沟通的患者。入选资料中男130例，女110例；年龄24～69岁，平均年龄（38.5±1.9）岁。患者对本研究均知情，并签署知情同意书。

1.2方法

1.2.1血液采集 抽取患者早晨空腹肘静脉血液5ml，室温放置2h 3000r/m离心10min，吸取血清-20℃保存。避免反复冻融。

1.2.2 HBV-DNA含量检测 采用荧光定量PCR法对患者血清标本HBV-DNA含量进行检测，采用STRATAGENEMx3000P荧光定量PCR仪。采用FQ-PCR法对HBV-DNA进行定量分析，试剂由厦门安普利生物工程有限公司提供，小于5×102IU/ml为阴性（-），超过5×102IU/ml为阳性（+）。

1.2.3两对半检测 采用酶联免疫吸附试验对患者血清两对半模式进行检测，试剂由英科新创（厦门）科技有限公司提供。所有检测均严格按照说明书进行，实验室设备及操作均严格按照卫生部颁发的实验室工作规范要求进行，以确保检测的准确性及符合度。

2 结果

2.1 HBV-DNA定量检测结果 240例疑似乙型肝炎患者血清标本中，125例HBV-DNA呈阳性，占52.08%；115例HBV-DNA呈阴性，占47.92%。定量5.0×102IU/ml～5.0×108IU/ml。

2.2 HBV-DNA定量与乙肝两对半模式的关系 结果显示，HBV血清标志物为阳性模式中，均存在不同程度的病毒复制，125例HBV-DNA阳性标本中，小二阳14例阳性，小三阳35例阳性，大三阳76例阳性，见表1。

3 讨论

乙肝两对半是临床最常见的乙肝病毒感染检测标志物，乙型肝炎病毒免疫学标志共有三对，分别为表面抗原和表面抗体、e抗原和e抗体、核心抗原和核心抗体[3]。表面抗原是人体已经感染病毒的标志，无法反映病毒有无复制、复制程度及传染性强弱等情况；表面抗体是中和性抗体标志，同时是是否有抵抗力及是否康复的主要标志；e抗原为病毒复制标志，持续阳性3个月则有慢性化倾向；e抗体是病毒复制停止的标志，标志着病毒复制减少，传染性较弱；核心抗体是曾经感染或正在感染都可出现的标志，对于辅助两对半检查具有重要意义[4]。乙肝两对半又被称为乙肝五项，其检查意义在于探究乙肝感染的具体情况。

乙肝病毒DNA是判断乙肝病毒有无复制的黄金指标，其主要用来判断体内乙肝病毒含量及传染程度，HBV-DAN含量越高则表示病毒复制能力越强、传染性越强。

FQ-PCR是进行基因诊断的有效手段，采用全封闭管进行检测，不需进行PCR处理，有效避免了较差污染。实时检测技术的采用，使所得原始模板数量呈线性相关，定量准确率较高。国外研究成果表明，FQ-PCR不仅具有普通PCR的灵敏度，由于荧光探针的应用，可通过广电传统对PCR扩增过程中的荧光信号进行直接探测，因此，该方式还具有光谱高精确性及DNA杂交的高特异性，并在极大程度上客服了PCR的众多缺陷，可用于临床疾病的早期病原体快速诊断、病情及预后评估，并可对治疗效果及遗传性疾病、肿瘤等进行诊断。ELISA检测法检测乙肝两对半是临床诊断乙肝病毒感染的传统手段，它可反应人体对乙肝病毒的免疫反应状态。ELISA是检测乙肝两对半的有效方法，FA-PCR可准确反应HBV-DNA复制水平变化，有利于病情变化及治疗效果的观察。

本研究中，大三阳乙肝病毒阳性率高于小二阳及小三阳患者，与前人研究成果一致。部分HBeAg阳性患者仍存在HBV-DNA为阴性的情况，可能与HBV-DNA的消失比HBeAg消失早或病毒发生变异。小三阳、小二阳HBV-DNA阳性率虽低于大三阳，但仍存在HBV-DNA阳性，提示病毒并未停止复制，只是在一定程度上减缓了复制速度，可能与HBV发生前，病毒基因发生突变或机体发生特异性免疫耐受有关。特异性免疫耐受性的突变在极大程度上引起HBeAg分泌，但对病毒本身的复制不产生影响。在HBeAg为阴性的模式中，部分样本HBV-DNA浓度较高，可见，乙肝患者血液循环中HBV-DNA与HBeAg具有相关性。本研究表明，HBeAg阳性标本通畅存在较高浓度HBV-DNA，HBeAg阴性组HBV-DNA浓度较低，经推理可得HBeAg与HBV-DNA拷贝数呈正相关性。

综上所述，乙肝两对半及HBV-DNA术基层医疗机构常规检查项目，乙肝两队边可充分反映乙肝患者的病情状况，HBV-DNA检测则可对乙肝病毒是否存在传染性进行判断，HBeAg与HBV-DNA拷贝数呈正相关性，为临床制定合理治疗乙肝方案提供了依据。对疑似乙肝病毒携带者可定期进行HBV-DNA的检测，以确定其是否存在传染性，从而从根源上抑制乙肝病毒的传染。

参考文献：

[1]于永歌，佟静，陈莹洁.乙型肝炎病毒与HBV-DNA定量的相关性分析[J].中外健康文摘，2014，20：186-187.

[2]孙翠平.乙肝两对半与HBV-DNA复制的临床对比以及联系[J].中国保健营养（中旬刊），2013，3：590-591.

[3]彭宇生.乙肝病毒外膜大蛋白检测在诊断乙型病毒性肝炎中的临床意义[J].中国保健营养（中旬刊），2013，1：402-402.

[4]曾芸珠，欧阳少燕.乙肝两对半模式与乙肝病毒DNA定量的相关性分析[J].医学信息，2013，28：240-240.编辑/成森