PSCA基因rs2294008多态性与胃癌的关系

鞠亚菲，刁玉荃，宋明全，姜相君

(青岛大学医学院附属青岛市市立医院 山东 青岛 266021 1 消化内二科； 2 急诊科)



·肿瘤专题·

PSCA基因rs2294008多态性与胃癌的关系

鞠亚菲1，刁玉荃2，宋明全1，姜相君1

(青岛大学医学院附属青岛市市立医院 山东 青岛 266021 1 消化内二科； 2 急诊科)

目的 了解前列腺干细胞抗原(PSCA)基因rs2294008位点多态性与胃癌的关系。方法 收集196例汉族胃癌病人与246例无胃部疾病体检者的外周血样本，提取基因组DNA，采用DNA直接测序法进行PSCA基因rs2294008位点分型。结果 胃癌组PSCA基因rs2294008位点3种基因型CC、CT、TT频率分别为43.40%、47.40%和9.20%，对照组分别为53.70%、39.00%和7.30%。与CC型比较，携带CT和TT型基因型者胃癌发生的危险性增加，OR值分别为1.50(95%CI1.01～2.23)和1.55(95%CI0.77～3.15)。结论 汉族人群PSCA基因rs2294008位点为CT和TT基因型者胃癌发病风险增加。

胃肿瘤；PSCA基因；多态性,单核苷酸

近年来，胃癌的发病率逐渐上升，其发病具有明显的地域特征，东亚地区尤其是中国和日本的发病率一直较高，其中中国胃癌病人约占全球发病总数的42%[1]，山东地区为高发区[2]。我国胃癌的发病年龄还呈现年轻化趋势，以往调查显示发病以40～60岁年龄组居多，现在则以35～55岁年龄组为多，甚至19～35岁的低年龄组发病率也有明显增加的趋势[3]。单核苷酸多态性(SNP)是指在基因水平上由单个核苷酸的变异所引起的DNA序列多态性。前列腺干细胞抗原(PSCA)基因已被证实与胃癌及前列腺癌的发生发展有密切的关系，但对其基因多态性的研究还较少。本研究旨在了解PSCA基因rs2294008位点的多态性与骨癌的关系。

1 资料和方法

1.1一般资料

2012年3月—2013年5月，选择青岛市市立医院住院的胃癌病人196例，男115例，女81例；年龄34.3～69.5岁，平均(57.6±12.3)岁。所有胃癌病人均无血缘关系，均为汉族人群，经胃镜或手术后病理组织学检查证实为胃癌，且均未经放化疗。另从该院体检中心收集健康体检者246例作为对照组，男151例，女95例；年龄31.8～68.2岁，平均(56.4±12.1)岁；均无胃部疾病，其家族中无肿瘤病史者。两组性别构成及年龄差异无显著性。所有研究对象均知情并同意。

1.2PSCA基因检测方法

1.2.1基因组DNA提取 采集受检者空腹静脉血3 mL，采用人血及组织基因组DNA提取试剂盒(离心柱型，北京天根生物科技公司)提取血液基因组DNA，采用紫外线分光光度计测定DNA浓度后，置于-20 ℃冰箱内保存。

1.2.2PCR反应 由Invitrogen生物科技公司设计rs2294008位点的PCR引物。引物序列F:5′-A-AGTCACCTCCAGAGGCCCTCTC-3′,R:5′-CAA-GCCTGCCATCATCAACAG-3′,长度为182 bp。PCR反应体系为30 μL， 其中含DNA模板100 μg/L，10×PCR缓冲液2.5 μL,50 mmol/L的MgCl20.8 μL，10 mmol/L的dNTP混合液0.5 μL，5 μmol/L正向、反向引物各1 μL，Platinum®Taq DNA聚合酶0.2 μL，加灭菌蒸馏水至30 μL。反应在ABi9700 PCR仪中进行，条件为：94 ℃预变性5 min,94 ℃变性30 s，58 ℃退火30 s，72 ℃延伸30 s，共35个循环，72 ℃后延伸5 min。取PCR产物2 μL进行琼脂糖凝胶电泳，以鉴定扩增产物是否合格。

1.2.3DNA测序分析基因型 应用DNA测序仪(型号为ABI PRISMTM 3700)进行测序。

1.3统计学处理

应用SPSS 13.0软件进行统计学分析，首先对样本进行Hardy-Weinberg遗传平衡检验，统计携带CC、CT及TT基因型个体的人数，计算OR及95%CI。以P<0.05表示差异有统计学意义。

2 结 果

PSCA基因rs2294008位点基因测序结果见图1～3。胃癌组病人PSCA基因rs2294008位点3种基因型CC、CT、TT频率分别为43.40%、47.40%和9.20%，对照组分别为53.70%、39.00%和7.30%。与CC型比较，携带CT和TT型基因型者胃癌发生的危险性增加，OR值分别为1.50(95%CI1.01～2.23)和1.55(95%CI0.77～3.15)。

3 讨 论

REITE等[4]在建造人-鼠前列腺癌模型时发现了PSCA基因，这是一个与前列腺癌相关的肿瘤抗原，位于染色体8q24．2位置上，编码含有123个氨基酸的蛋白质分子，其羧基末端为糖基磷脂酰肌醇(GPI)锚定序列[5]。目前对于PSCA基因的研究多集中在前列腺癌方面，并取得了相当大的进展，但对于PSCA基因rs2294008位点多态性与胃癌之间关系的研究还较少。日本学者研究结果显示，稳定转染PSCA基因cDNA的胃癌细胞株HSC57的菌落形成明显少于不表达PSCA的细胞株[6]。在正常胃黏膜中PSCA mRNA呈高表达，主要表达于胃腺体峡部，而胃癌组织中则检测不到PSCA mRNA的表达[7]。提示PSCA可能具有抑制胃癌细胞增殖的作用。SAEKI等[8]的研究结果则显示，PSCA基因rs2294008与韩国人的弥漫型胃癌显著相关，与肠型胃癌的相关性较弱。PSCA表达于胃上皮细胞的分化过程中，具有抑制胃癌细胞增殖的作用，但在胃癌细胞中表达沉默。此外，陈方根等[5]对广东地区汉族人群研究结果显示，PSCA基因rs2294008 T/C多态性与胃癌的发生有关，T等位基因可增加肠型、低分化、非贲门胃癌的发病风险。LI等[9]对湖南人群的调查也得出了同样的结论。另外，赵久达等[10]对青海地区藏族人群的调查结果显示，PSCA基因的rs2294008位点与胃癌发病相关，CT和TT基因型能增加藏族人群的胃癌易感性。

图1 CC基因型

图2 CT基因型

图3 TT基因型

本文研究分析了PSCA基因rs2294008位点多态性与胃癌发病的关系，研究结果显示，PSCA基因rs2294008位点CT和TT基因型显著增加胃癌发病风险。今后尚需更大样本的多中心研究验证上述结果。

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[3] 唐暮白,谢英彪,丁海. 胃癌防与治[M]. 西安:西安交通大学出版社, 2010:9-11.

[4] REITER R E, GU Z, WATABE T, et al. Prostate stem cell antigen: a cell surface marker overexpressedin prostate cancer [J]. Proceedings of the National Academy of Sciences of the United States of America, 1998,95(4):1735-1740.

[5] 陈方根,曾志荣,吴小琴,等. 中国汉族人群前列腺干细胞抗原基因rs2294008多态性与胃癌关系的研究[J]. 胃肠病学, 2010,15(1):17-20.

[6] Study Group of Millennium Genome Project for Cancer, SAKAMOTO H, YOSHIMURA K, et al. Genetic variation in PSCA is associated with susceptibility to diffuse-type gastric cancer[J]. Nature Genetics, 2008,40(6):730-740.

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[9] LI F, ZHONG M Z, LI J H, et al. Case-control study of single nucleotide polymorphisms of PSCA and MUC1 genes with gastric cancer in a Chinese [J]. Asian Pac J Cancer Prev, 2012,13(6):2593-2596.

[10]赵久达,耿排力,赵君慧,等. 中国藏族PSCA基因rs2294008多态性与胃癌遗传易感性的关系[J]. 世界华人消化杂志, 2012,(5):418-421.

(本文编辑 黄建乡)

RELATIONSHIP BETWEEN RS2294008 POLYMORPHISM OF PSCA GENE AND GASTRIC CANCER

JUYafei,DIAOYuquan,SONGMingquan,JIANGXiangjun

(Qingdao University Medical College, Qingdao 266021, China)

ObjectiveTo investigate the relationship between rs2294008 polymorphism of PSCA gene and gastric cancer.MethodsSamples of peripheral blood were collected from 196 Han people with gastric cancer and 246 without gastric diseases, the genome DNA was extracted and rs2294008 genotypes were determined by DNA direct sequencing.ResultsIn gastric cancer group, the frequencies of CC, CT and TT in rs2294008 were 43.40%,47.40% and 9.20%, respectively, and that in the healthy people were 53.70%,39.00% and 7.30%. Compared with CC genotype, the risk of getting gastric cancer in those carrying CT and TT genotypes increased, theORwas 1.50, 95%CI1.01-2.23 and 1.55, 95%CI0.77-3.15, respectively.ConclusionIn Han people with PSCA gene rs2294008 locus of CT and TT genotypes are at increased risk of getting gastric cancer.

stomach neoplasms; PSCA gene; polymorphism, single nucleotide

2014-02-29;

2014-12-10

青岛市公共领域科技支撑计划(2012-1-3-1-(10)-nsh)

鞠亚菲(1987-)，女，硕士研究生。

姜相君(1964-)，女，博士，主任医师，硕士生导师。

R735.2

A

1008-0341(2015)02-0127-03