向日葵耐盐品种扩繁体系建立的研究

鲁娜　高金秋　尹晶

摘 要 本试验以1628向日葵品种的子叶、胚轴为外植体，接种于不同生长调节剂浓度、不同pH值、不同蔗糖浓度配比的MS培养基上进行组织培养，以研究不同培养基对耐盐向日葵组织培养的影响。试验结果表明：向日葵胚轴在6-BA 为0.1mg/L，IAA为0.07 mg/L，蔗糖浓度为3%，pH值为5.5，培养温度为25 ℃时分化效果最好。

关键词 向日葵；耐盐品种；组织培养；正交设计

中图分类号：S567.239 文献标志码：B 文章编号：1673-890X（2014）12-0-2

向日葵（Helianthus annuus）亦称葵花。菊科，向日葵属，一年生草本植物。向日葵是我国北方地区的主要油料作物，其经济效益一直被受重视。白城处于吉林西部，为中国盐碱地比较严重的地区，土壤以苏打为主，比较难治理。向日葵不仅具有较强的耐盐碱能力，而且还兼有吸盐性能，是土壤改良的首选植物。

本试验旨在筛选出适合向日葵耐盐品系组织培养的最佳培养条件，为向日葵耐盐细胞系的悬浮培养奠定基础；为吉林西部土地资源的充分利用及促进土壤改良，提供技术支持。

1 材料与方法

1.1 材料

试验选用向日葵品种为1628由白城市农科院研究员张义惠赠。

1.2 方法

1.2.1 无菌苗的制备

选取饱满的向日葵种子，用70%的酒精浸泡60S， 再用3%的次氯酸钠浸泡20 min，用无菌水冲洗3～5次，然后放在无菌滤纸上吸干，并接种于MS培养基，培养条件为（25±2） ℃，16h/d，5 000 Lux。7 d后获得无菌苗。

1.2.2 愈伤组织的诱导

切取向日葵无菌苗的子叶、胚轴，接种于含有3%蔗糖及2，4-D 和IAA的MS培养基中，25±2 ℃，16 h/d，5 000 Lux条件下诱导愈伤组织。因素水平选取见表1，其中5号为空白对照组。

1.2.3 芽的诱导

根据愈伤组织诱导结果，选出6-BA（0.05 mg/L，0.1 mg/L，0.5 mg/L）3个浓度，IAA（0.01 mg/L，0.03 mg/L，0.07 mg/L）3个浓度，设计蔗糖3个浓度（100%，66.67%，60%），3个pH值（5.5，6.0，6.5），3个温度值（20 ℃，25 ℃，30 ℃），采用L18（37）做正交表进行体系优化，处理组合见表2，每种组合4皿，两皿子叶、两皿胚轴，每皿15个外植体，培养条件同“1.2.1”，1个月后观察并统计出芽情况。

2 结果与分析

子叶、胚轴，但子叶仅分化出根，胚轴只有少量分化出芽，试验结果见表2。

由表2的数据分析可见：对于向日葵胚轴分化效果的影响，5个参试因子的比较结果是蔗糖>IAA>6-BA>pH=温度；其中以蔗糖因素对向日葵胚轴的分化影响最大，极差为7；pH 与温度影响最小，极差为3。由此得出，在向日葵胚轴分化试验中最佳方案为：6-BA 0.1-0.5 mg/L+IAA 0.07 mg/L+蔗糖30 g/L，培养温度为25℃，pH为5.5。

3 结果与讨论

不同的生长调节剂浓度、蔗糖浓度、pH及培养温度，均对向日葵的芽诱导有影响。试验结果表明，本研究所设计的生长调节剂、蔗糖、pH、温度梯度范围不适合诱导向日葵子叶分化成芽，且子叶有很多处理分化出根，说明生长素浓度偏高或分裂素浓度偏低，后人可据此适当增大浓度梯度，或改变生长调节剂种类。本试验数据表明，当6-BA 为0.5 mg/L，IAA为0.07 mg/L，蔗糖浓度为3%，pH为5.5，培养温度为25 ℃时，向日葵胚轴可分化出芽，且分化率为13.3%，由于向日葵属难再生植物，尽管本试验分化率较低，但只要多次尝试，终会使其分化率提高的。

（责任编辑：刘昀）